Способ оценки чувствительности к диетотерапии больных ишемической болезнью сердца Советский патент 1990 года по МПК G06F17/17 

Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии, и может быть использовано для определения индивидуальной чувствительности больных ишемической болезнью сердца (ИБС) к диетам с различным составом жирных кислот.

Цель изобретения - упрощение способа за счет сокращения числа трудоемких операций, а также повышения точности способа за счет индивидуализации оценки диетотерапии.

Способ осуществляется следующим образом.

Больным ИБС, перенесшим инфаркт миокарда различных сроков давности, назначается противоатеросклеротичес- кая диета с повышенным содержанием полиненасыщенных жирных кислот (ПНЖК) за счет включения в рацион растительных масел, сниженным уровнем холестерина и солей натрия, общей калорийностью 2400 ккал0

В состав диеты входят, г: белки 85; жиры 78; углеводы 350; холестерин 0,260, отношение полиненасыщенных жирных кислот к насыщенным соеел

о

4 СП

3

тавляет 1,42. Диетотерапия проводится 35 дней.

Содержание общего холестерина (ХС) в крови определяют по неспецифической реакции на стеролы, ХС тем же методом, но с предварительным разделением на липопротеиды высокой и низкой плотностей и тригли- цериды (ТГ) по титрованию восстановленного глицерина. Фракцию эфи- ров (э Ф) ХС выделяют из сыворотки крови и разделяют на индивидуальные молекулярные формы, методом высокоэффективной жидкостной хроматографии рассчитывают их содержание,относительные величины и индекс индивидуальной чувствительности по формуле

иич (-Ј- - -31.)

(Л1 ол°

лп. олп

) +

л

л

(i1i.1ч

I. Ап Ао

где ИИЧ - индекс индивидуальной

чувствительности; Л - содержание линолената

холестерина; П - содержание пальмитата

холестерина; А - содержание арахидоната

холестерина;

ОЛ - содержание олеата холестерина

О - показатель до лечения П - показатель после лечения. Эффект диетотерапии оценивают по одновременному увеличению содержания А и снижению П и ОЛ и приближению их значений к соответствующим значениям у здоровых людей. Расчет ИИЧ позволяет индивидуализировать оценку: при значении ИИЧ + 1,5 и выше делают вывод о положительном действии диетотерапии, причем эффект тем больше, чем выше величины ИИЧ, а при значениях ИИЧ - 1,2 и ниже делают вывод о неэффективности диетотерапии.

Для выделения фракции эфиров холестерина сыворотку крови последовательно обрабатывают органическими растворителями: ацетоном, смесью хлороформ - метанол (2:1) и гексан - эфир (85:15). Нейтральные липиды разделяют на фракции ЭФ ХС и ТГ препаративной ТСХ. Эфиры холестерина анализируют методом ВЭЖХ на колонке

15645474

с обращенной фазой типа Ultrasphe- re ODS (250x4,6 мм, 5 мкм) в качестве подвижной фазы используют смесь ацетон - ацетонитрил - гексан (64 : : 36:5) со скоростью потока 1,5 мл/ /мин, детектирование проводят при Я 206 нм. На хроматограмме с помощью стандартов идентифицируют 4 пика,коJQ торые соответствуют следующим молекулярным формам эфиров холестерина: арахидонату (А), линолеату (л), олеа- ту (ОЛ) и пальмитату (П) холестерина.

J5 Методом внутренней нормализации по площадям пиков рассчитывают их количественное содержание и относительные величины,

В табл.1 представлено процентное

2о содержание молекулярных форм этери- фицированного холестерина, а также данные клинических анализов - ОХС, tf-XC и ТГ у 20 больных до и после диетотерапии, при этом у пяти боль25 ных (№ 6,10,14,19 и 20) эффекта не обнаружено.

30

35

40

Полученные данные сравнительно небольшого массива больных (20 человек) и здоровых (5 человек, см, табл.2) были обработаны на ЭВМ по программам непараметрической статистики по Вилкоксону, Спирману,Кендалу, а также методом кластерного анализа, была оценена информативность исследованных параметров и показано наличие корреляции между общепринятыми параметрами оценки обмена ХС (общий ХС, ), ТГ сыворотки крови и индивидуальными формами ЭФ ХС в ней. При этом выявлена существенная зависимость между арахн- донатом ХС и общего ХС (ОХС) в процессе диетотерапии и менее существенная, но достоверная взаимосвязь между уровнями пальмитата, олеата ХС и ОХС. Из четырех индивидуальных форм ЭФ ХС принадлежность к одному типу распределения показана только для трех молекулярных типов ЭФ ХС - арахидоната, олеата и пальмитата ХС« Линолеат ХС по данным критериям не является информативным для оценки обмена холестерина. Три молекулярные формы ЭФ ХС (пальмитат, олеат и ара- .хидонат ХС) более подвержены изменениям под воздействием диеты, а потому являются более чувствительными f критериями, а следовательно, и более

45

50

0

5

0

Полученные данные сравнительно небольшого массива больных (20 человек) и здоровых (5 человек, см, табл.2) были обработаны на ЭВМ по программам непараметрической статистики по Вилкоксону, Спирману,Кендалу, а также методом кластерного анализа, была оценена информативность исследованных параметров и показано наличие корреляции между общепринятыми параметрами оценки обмена ХС (общий ХС, ), ТГ сыворотки крови и индивидуальными формами ЭФ ХС в ней. При этом выявлена существенная зависимость между арахн- донатом ХС и общего ХС (ОХС) в процессе диетотерапии и менее существенная, но достоверная взаимосвязь между уровнями пальмитата, олеата ХС и ОХС. Из четырех индивидуальных форм ЭФ ХС принадлежность к одному типу распределения показана только для трех молекулярных типов ЭФ ХС - арахидоната, олеата и пальмитата ХС« Линолеат ХС по данным критериям не является информативным для оценки обмена холестерина. Три молекулярные формы ЭФ ХС (пальмитат, олеат и ара- .хидонат ХС) более подвержены изменениям под воздействием диеты, а потому являются более чувствительными f критериями, а следовательно, и более

5

0

51

информативными для оценки диетотерапии,

С помощью кластерного анализа по трем выбранным критериям - индивидуальным формам этерифицированного холестерина - у 15 из 20 обследованных больных было найдено преобладание положительного эффекта под влиянием диетотерапии. При положительном эффекте диетотерапии арахидонат холестерина повышался (исходный уровень был 9,2, после лечения 19,5, у здоровых лиц 23,3), пальмитат и оле- ат холестерина снижались (соответственно исходный уровень 8,3 и 13,6, после лечения 5,3 и 9,8, у здоровых лиц 6,6 и 10,3).

Таким образом, тенденция изменения выбранных показателей при положительном эффекте диетотерапии вполне отчетливы и приближаются к значениям их у здоровых лиц. Иную картину наблюдаем при отсутствии эффекта: уровень пальмитата и олеата ХС возросли, а уровень арахидоната ХС снизился.

Как указано выше, для оценки индивидуальной чувствительности больного ИБС к диетотерапии рассчитывают индекс индивидуальной чувствительности (ИИЧ), который определяют как сумму разностей относительных величин до (о) и после (П) лечения: линолеата холестерина к пальмитату (Л°/П° - ), олеату (Л°/ОЛ° - ЛП/ОЛП) и арахидонату (ЛП/АП - Л°/А°) холестерина. Следует пояснить три обстоятельства в указанной формуле: во-первых, на относительных величинах в меньшей степени отражаются погрешности измерений, хотя и при использовании абсолютных величин формула определения индивидуальной чувствительности правомерна: во-вторых, в числителе указанных относительных величин используется значение линолеата холестерина, малоизменяемой и неинформативной формы в процессе диетотерапии; в-третьих в последнем слагаемом (ЛП/АП - Л°/А°), в сравнении с двумя другими, составные меняются местами, что обусловлено разнонаправленными тенденциями в изменениях количеств молекулярных форм 3 ХС в процессе диетотерапии.

В табл.3 представлены индексы индивидуальной чувствительности (ИИЧ) 20 больных.

645476

При положительной динамике индекс выражается положительными величинами и колеблется от 1,5 до 48,4, при отсутствии динамики - отрицательными величинами от -1,2 до -.Полученные результаты по ИИЧ полностью коррелируют с клиническим состоянием больных,

Ю Пример. Больной С-нов В.Г. (№5), 53 лет, поступил в клинику лечебного питания с диагнозом: ИБС; атеросклероз венечных сосудов сердца, аорты; постинфарктный кардиоскле15 роз, хроническая коронарная недостаточность, стенокардия напряжения ФК-П. В анамнезе - острый трансму- ральньй инфаркт миокарда; В момент поступления в стационар беспокоили

20 колющие боли в области сердца, особенно при повышенных физических нагрузках, возникающие практически ежедневно и купируемые приемом нитроглицерина (1-2 таблетки в день). Ддитель25 ными курсами принимал нитраты пролонгированного действия. В условиях клиники больному назначалась диета, описанная выше. Медикаментозной терапии не проводили,

30 Анализ крови на содержание ОХС, &-ХС и индивидуальных форм эфиров холестерина, У больного берут кровь из вены (5-6 мл) утром натощак,сыворотку отделяют от эритроцитов цент35 рифугированием (2000 об/мин). К 2 мл сыворотки кровя добавляют 2 мл охлажденного ацетона, 2 мл смеси хлороформ - метанол (2:1), 2 мл смеси гексан - эфир (85:15) и 2 мл эфира,

40 Фильтрат и промывки упаривают в вакууме, а из оставшейся водной фазы нейтральные липиды экстрагируют смесью гексан - эфир (85:15) 3 раза по 2 мл. Объединенные экстракты упа45 ривают в токе азота досуха, остаток растворяют в 0,1 мл смеси гексан - эфир и наносят на пластину с силика- гелем (размер частиц 5/40 мега,ЧССР) в виде полоски и 0,1 мкл в пятно

50 для контроля, хроматографируют в системе растворителей петролейный эфир - диэтиловый эфир (15:2)о После проявления контрольной зоны иодом, шпателем снимают с пластины зону с

55 силикагелем, соответствующую ЭФ ХС (Rf 0,8) и элюируют смесью гексан- эфир (85:15) 0 Элюаты упаривают досуха, остаток растворяют в 0,1 мл свежеперегнанного гексана и вводят микрошприцом 5 мкл раствора в инжектор жидкостного хроматографа Альтекс- Бекман 334 с использованием колонки с обращенной фазой типа Ultrasphe- re ODS 5 ммк, 250x4,6 мм, детектор Kratos SP757 при Я 206 нм. Разделение проводят с использованием в качестве подвижной фазы смеси растворителей ацетон - ацетонитрил - гек- сан (64:36:5) со скоростью потока 1,5 мл/мин, чувствительностью - 0,02 в течение 20-25 мин. На хр§ма- тограмме идентификацию пиков1 проводят по временам удерживания стандартов, с помощью интегратора CR 3 (фирма .Шимадзу, Япония) рассчитывают процентное содержание указанных выше ЭФ ХС по соответствующим площадям пиков о

Данные лабораторных анализов до лечения: ОХС 7,8 ммоль/л; С/-ХС 2,4 ммоль/л; ТГ 3,1 ммоль/л; эфиры ХС; пальмитат 11,6%; олеат 19,6%; линолеат 59,6%; арахидонат 9,2%.После лечения: ОХС 5,6 ммоль/л; 2,2 ммоль/л; ТР 2,0 ммоль/л; ХС: пальмитат 4,8; олеат 8,4; линолеат 58,4%; арахидонат 27,3%.

На фоне лечения диетой,обогащенной ПНЖК, в течение 35 дней отмечено улучшение самочувствия,полностью исчез, кардиальный синдром, повысилась толерантность к физическим нагрузкам, что позволило больному на время полностью отказаться от применения коронароактивных средств. Индекс индивидуальной чувствительности составил 15,28,

Пример 2. Больной Г-ков М.В, 56 лет, инвалид III группы, находился на лечении в клинике с диагнозом: ИБС II ст,, стенозирующий атеросклероз венечных артерий, атеросклероз

64547

ОХС 9,5 ммоль/л;

10

15

20

25

30

35

40

(X - ХС 2,2 ммоль/л; ТГ 1,2 ммоль/л; Эй ХС: пальмитат 4,5%; олеат 5,5%; линолеат 71,0%;. арахидонат 18,6%, После лечения: ОХС 6,4 ммоль/л; 0J.-XC 1,5 ммоль/л; ТГ 1,3 ммоль/л; ЭФ ХС: пальмитат 5,5%; олеат 12,2%; линолеат 71,2%; арахидонат 11,2 %,

После проведения курса диетотерапии состояние больного практически не изменилось, сохранились кардиалгии прежней частоты и интенсивности, толерантность к физическим нагрузкам осталась на прежнем уровне. В данном случае использованная диета была малоэффективной. Возможно,коррекция изменения в обмене липидов у данного больного может быть достигнута с использованием рационов с другим соотношением ПНЖК, Индекс индивидуальной чувствительности,рассчитанный для данного больного по результатам относительных величин молекулярных форм ХС, составил отрицательную величину и равен -12,45.

Предлагаемый способ позволяет проводить оценку эффективности диетотерапии по трем выбранным критериям эфиров холестерина: пальмитату,олеату и арахидонату как наиболее показательным и изменяемым формам. Вместе с тем определение этих показателей до лечения дает возможность у большинства больных ИБС прогнозировать эффективность диетической терапии и своевременно решать вопрос о необходимости сочетанного использования ее с другими лечебными факторами.

Предлагаемый метод прост,корректен, обладает большой информативностью, возможной индивидуализацией оценки в сравнении с другими методами и может быть использован в ка

Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии. Цель изобретения - упрощение способа за счет числа трудоемких операций и повышение его точности за счет индивидуализации оценки. Осуществляют забор венозной крови у больных до и после диетотерапии и определяют содержание в ней эфиров холестерина: арахидоната, пальмитата, олеата и линолената методом высокоэффективной жидкости хроматографии. Приближение содержания этих эфиров к соответствующим значениям здоровых лиц свидетельствуют об эффективности диетотерапии. Индивидуализация оценки достигается расчетом индекса индивидуальной чувствительности (ИИЧ) по формуле ИИЧ=(Л°/П°-Л^п/П^п)+(Л°/ОЛ°-Л^п/ОЛ^п)+(Л^п/А^п-Л°/А°), где Л, П, А и ОЛ - содержание соответственно линолената, пальмитата, арахидоната и олеата холестерина

о - показатель до лечения

п - показатель после лечения. Значения ИИЧ, равные и выше +1,5, свидетельствуют о положительном действии диетотерапии, а -1,2 и ниже - о ее неэффективности.

церебральных артерий и аорты, Постин- 45 честве оценочного критерия при лече- фарктный атеросклероз. Хроническая коронарная недостаточность. Стенокардия напряжения, ФК III, В амбулаторных условиях постоянно принимал нитраты пролонгированного действия. При поступлении в клинику беспокоили сжимающие боли за грудиной при ходьбе, снимаемые нитроглицерином. При физических нагрузках страдает одыш50

нии больных ИБС, а также как метод диагностики изменения липидного обмена у лиц, предрасположенных к ате- росклеротическим изменениям в любом возрасте, либо лиц, подверженных наследственной гиперлипидемии.

Особое значение имеет предлагаемый способ для выявления начальных нарушений липидного обмена и проведекой. Больному назначена протйвоатеро- ss ния соответствующих профилактичессклеротическая диета, описанная выше. Из лекарственных средств назначены симптоматические препараты.Данные лабораторных анализов до лечения:

ких мероприятий у лиц молодого воз раста с избыточной массой тела.

Предлагаемый способ может быть использован при профилактическом

честве оценочного критерия при лече-

нии больных ИБС, а также как метод диагностики изменения липидного обмена у лиц, предрасположенных к ате- росклеротическим изменениям в любом возрасте, либо лиц, подверженных наследственной гиперлипидемии.

Особое значение имеет предлагаемый способ для выявления начальных нарушений липидного обмена и проведения соответствующих профилактических мероприятий у лиц молодого возраста с избыточной массой тела.

Предлагаемый способ может быть использован при профилактическом

обследовании здоровых лиц для выявления фактора риска ИБС.

Формула изобретения

.2, Способ по п.1, отличающийся тем, что, с целью повыгае

ния точности способа за счет индивидуализации оценки эффекта диетотерапии, дополнительно определяют содержание линолената холестерина и рассчитывают индекс индивидуальной чувствительности по формуле

ИИЧ

г-л

{ ол°

где ИИЧ - индекс индивидуальной чувствительности;

Л - содержание линолената холестерина;П - содержание пальмитата

холестерина; А - содержание арахидоната

холестерина;

ОЛ - содержание олеата холестерина;

О - показатель до лечения; П - показатель после лечения, при этом значения ИИЧ + 1,5 и выше свидетельствуют о положительном действии диетотерапии, причем большая величина индекса сооветствует большому лечебному эффекту, а значения индекса - 1,2 и ниже свидетельствуют о неэффективности диетотерапии.

13

1564547 4

Таблица2