Способ определения чистоты и гибридности семян подсолнечника Советский патент 1991 года по МПК A01H1/04 

Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано в сельском хозяйстве при селекции и семеноводстве подсолнечника

Цель изобретения - повышение точности способа.

Способ состоит в том, что определяют изоферментный спектр суперосиддисмута- зы (СОД), выделенной из семянок подсолнечника.

Для достижения более высокой разрешающей способности метода, выявления полиморфизма по возможно большему числу локусов СОД используют различные методы выделения фермента и его разделения в гелевых носителях При электрофоре- тическом разделении получают четкие генотипические различия по спектру СОД. Наличие в изоферментном спектре СОД характерных для отцовской формы аллеломорфов фермента рассматривается как доказательство гибридности этих семян.

Чистота материала характеризуется типичностью изоферментных спектров СОД различных семян данной линии.

П р и м е р 1. Семянки подсолнечника (линии Одесский 3369, Одесский 4В и их гибрид Одесский 123) гомогенизируют в 0,1 М К - фосфатном буфере рН 7,8 (отношение массы семянки к объему буфера 1:1).

Супернатант после центрифугирования при 15 тыс. в течение 10 мин при +2° С используют как сырой экстракт СОД. С целью выявления новых аллельных состояний СОД в среду выделения добавляют 2% / -меркаптоэтанол Среда инкубации содержит 14 мг ксантина; фенозинметосуль- фата 8 мг; 30 мг нитротетразолиевого синего 0,20 ед. ксантиноксидазы на 100 мл К-фос- фатного буфера рН 8,0.

После проявления гелей сравнивают электрофореграммы СОД исследуемого материала с электрофореграммами СОД известных форм подсолнечника. Чистоту материала определяют по типичности изоферментных спектров СОД различных семян данной линии. Доказательством гибридности семян служит наличие в изоферментном спектре характерных для отцовской формы аллеломорфов фермента.

О

о N ю о о

316642004

П ример ы2 иЗ .Проводят аналогично ности семян подсолнечника, включающий примеру 1, исследуя другие линии и гибри-электрофоретическое разделение маркер- ды подсолнечника: Одесский 128, Одесскийных белков родительских и гибридных 1036, Одесский 1В, Одесский 5В.форм, сопоставление полученных электро- Значительный полиморфизм по СОД5 фореграмм с последующей оценкой чистоты позволяет оценивать чистоту материала ии гибридности по белковым спектрам, о т - гибридность значительно большего числаличающийся тем, что, с целью повыше- линий и гибридов по сравнению с известны-ния точности способа, в качестве маркерно- ми способами.го белка используют фермент - Форм у-л а изобретения10 супероксиддисмутазу, выделенную из семя- Способ определения чистоты и гибрид-нок подсолнечника.

Изобретение относится к биотехнологии и касается оценки чистоты и гибридности семян подсолнечника. Целью изобретения является повышение точности способа. Изобретение состоит в том, что исследуют электрофоретический спектр фермента - супероксиддисмутазы, выделенной из семянок подсолнечника, при этом по наличию определенных компонентов спектра судят о чистоте и гибридности.