Способ определения активности воспалительного процесса при периодической болезни у детей Советский патент 1991 года по МПК G01N33/68 

Изобретение относится к медицине, а именно к диагностике периодической болезни (ПБ) у детей.

На чертеже представлены данные по изменению активности фосфолипазы А в сыворотке крови при ПБ у детей в зависимости от тяжести заболевания: а - стадия ремиссии, б - стадия приступа.

Целью изобретения является повышение точности способа.

Цель достигается тем, что в известном способе определения степени активности воспалительного процесса при периодической болезни у детей путем исследования сыворотки крови определяют активность фосфолипазы А и при значении активности фермента (в ед. фосфолипазной активности) 1,25; 1,55; 1,84 - 2,0 вне приступа определяют соответственно легкую, среднюю и тяжелую степени воспалительного процесса при периодической болезни у детей.

Способ осуществляют следующим образом.

1,0 мл сыворотки крови инкубируют в течение 15 мин при 60°С в водяном термостате. К 0,5 мл инкубированной сыворотки добавляют 0,5 мл 1 %-ного раствора трипсина и выдерживают 1 ч при 0°С. К 0,5 мл инкубированной смеси добавляют 1 мл рабочего раствора субстрата и выдерживают в течение 1 ч в термостате при 37°С. Затем добавляют 0,5 мл 0,06 М раствора хлористого кальция (для прекращения реакции) и титруют 0,1 н. раствором NaOH в присутствии фенолфталеина.

Холостой опыт. К 0,5 мл сыворотки добавляют 1 мл рабочего раствора субстрата и 0,5 мл 0,06 М раствора хлористого кальция. Титруют, как и в предыдущем опыте (0,1 н. NaOH) до появления бледно-розового окрашивания.

Реактивы (фосфолипидную массу) готовят следующим образом.

Ё

О 00 ON 00 О

На 1 г ячеистого желтка добавляют 10мл раствора хлороформетанол (2.1) Сосуд с раствором ставят на магнитную мешалку на 30 мин. Затем верхний слой удаляют, а нижний слой сушат в токе газового азота. Рабочий раствор субстрата готовят во время опыта. К 7 мг фосфолипидной массы прибавляют 3 мл 0,5 мл трис-№С -бу- фера, (рН 8,0), который затем смешивают с 9 мл раствора натриевой соли дезоксихоли- евой кислоты.

Расчет проводят по формуле

х 2 х 1 ул сед. фосфолипазы

А в 1 мл сыворотки

где (о опыт:

хо холостой опыт).

Исследования проводили у 29 больных детей с ПЕ Контролем служили данные, полученные у 17 практически здоровых детей.

В сыворотке крови указанным выше способом определяют активность фосфолипазы А Статическая обработка полученных данных проводилась по Стьюденту и ФишеРУ

Результаты проведенных исследований, приведенные в табл 1, 2 и на чертеже, свидетельствуют о значительном увеличении активности фосфолипазы А в сыворотке крови больных детей различными формами ПБ как в стадии ремиссии, (а) так и во время приступа (б). Примечательно что степень изменения активности фосфолипазы А - умеренная (при значении активности фермента 1,25 1,40), выраженная (1,46-1,75) и резкая (1,80 2,00) находится в прямой зависимости от тяжести заболевания (легкая, средняя и тяжелая степени соответственно). Умеренные изменения наблюдаются при торакальной форме БП (II) вне приступа -- в стадии ремиссии выраженные - при адбоминальной и смешанной формах III, a резкие - при ПБ осложненной амилоидо- зом (IV). На чертеже столбики I обозначают группу здоровых лиц

Способ иллюстрируется следующими примерами:

Пример 1. Больной П.Ж,, 11 лет, обследовался в Республиканской детской клинической больнице г.Еревана (РДКБ) в 1987 г. Мальчик от 5-х родов, беременность и роды протекали нормально. В анемнезе не отмечаются частые ангины, ОРЗ. наследственность отягощена отец болел периодической болезнью (ПБ) с 4-летнего возраста.

Настоящее заболевание началось в возрасте 5 лет. Предлагаемая причина заболевания не обнаружена Приступы заболевания чаще возникают в связи с простудой, приемом острой пищи Наблюдаются приступообразные острые боли в груди переменной локализации (больше в правой

половине грудной клетки), иррадируюущие в правое плечо и сочетающиеся с повышением температуры до 39°С. Приступы сопровождаются выраженной потливостью, ознобом, одышкой Длительность присту0 пов составляет 1 -2 дня, в течение года они наблюдаются 10-12 раз, несколько учащаясь зимой.

Состояние при поступлении средней тяжести, кожные покровы бледные. Со сторо5 ны сердца и легких вне приступа патологии не обнаруживается, во время приступа тоны сердца учащены, умеренно приглушены, в легких справа (на месте локализации болей) дыхание ослаблено, кратковременный, неж0 ный шум трения плевры, умеренное укорочение перкуторного звука Живот мягкий безболезненный (в том числе во время приступов). Печень и селезенка во время приступа не прощупываются Стул и

5 мочеиспускание в норме

Из лабораторных данных, лейк. 9,5 х 109/л. нетрофилез - 75%, лимфопения - 22%, СОЭ - 22 мм/ч. Биохимический анализ крови без особенностей, СРП , повы0 шение скаловой кислоты 0,260 ед. опт. пл. Со стороны мочи патологии не обнаружено. На ЭКГ - синусовая тахикардия, признаки повышения электрической активности миокарда левого желудочка. На рентгенограм 5 ме грудной клетки во время приступа - умеренное утолщение плевры справа.

На основании анамнеза, клиники и лабораторных испытаний у ребенка диагностирована периодическая болезнь,

0 торакальная (грудная) форма

С целью выявления диагностической значимости предлагаемого метода в сыворотке крови была определена активность фосфолипазы А предложенным выше спосо5 бом. Активность фермента во время приступа была равна 1.42 ед., вне приступа - 1,25 ед., что соответствует легкой степени воспалительного процесса.

Пример 2 Больной А.В,, 12 лет,

О обследовался в РДКБ в 1988 г. Мальчик от 1-й беременности, 1-х родов,Масса при рождении 3,950. Перинатальный анамнез без особенностей. В 6 лет перенес корь, а в 7 лет - эпилемический паротит, в 8 лет - ветряную

5 оспу и аппендэктомию. В родословной случаев ПБ не обнаружено.

Заболевание началось в 8-месячном возрасте с приступов болей в животе и повышения температуры Боли в животе носили разлитой характер, температура

поднималась до 38 39°С Болевой симптом отличается постоянством локализации бо ли всегда локализуются в правом подреберье, иррэдируются в левое и правое плечи Приступы сопровождаются диспеп- тическими явлениями (тошнота, рвота с примесью желчи), дизурическими явлениями Спустя 5 лет от начала заболевания во время приступов болей в животе отмечалось послабление стула (понос) Длительность приступов обычно составляла 1-3 сут, частота приступов в месяц колеблется от 0 до 2 раз, в среднем до 5 раз Их частота увеличилась в зимне-весенний период, а также в связи с простудой За час до начала приступа проявлялась нейровегетативная аура покраснение щек подавление настроения.

Состояние при приеме средней тяжести, кожные покровы бледные чистые Зев спокойный, в легких отклонении нет Границы сердца в пределах нормы Тоны сердцо звучные, во время приступа тахиаритмич- ные. Живот вне приступа мягкий, безболезненный при пальпации Во время приступа пальпация невозможна из-за резких болей и выраженного дефанса мышц После стихания болей печень пальпируется на 2 см ниже реберной дуги Стул и мочеиспускание во время приступов учащены

Из лабораторных данных лейкоциты 6,7«109/л, лимфоциты 38%, СОЭ 23 мм/час, СРП -Ц- опаловые кислоты - 260 ед опт пло,трансаминазы АсАТ-03 0,72мкмоль- чл. АлАТ/0,45-1,06 моль/ч л / Анализ мочи без особенностей, склонность к никтурии Сонография: стенки желчного пузыря утолщены. Холецистография моторика желчногопузыряненарушена. Эзофагогастродуоденоскопия - картина выраженного поверхностного гастрита, эрозивного дуоденита

На основании клинико-лабораторных данных и анамнеза был поставлен диагноз периодическая болезнь абдоминальная форма. Осложнения, поверхностный гастрит, аэрозивный дуоденит. С диагностической целью была определена активность фосфолипазы А, которая была равна во время приступа 1,84 ед вне приступа - 1,55 ед., что соответствует средней тяжести воспалительного процесса

Пример 3. Больной И А 12 лет, обследовался в РДКБ в 1987 г 88 г Мальчик от 2-й беременности, 2-х родов. Перинатальный анамнез без особенностей Перенесенные заболевания, кишечная инфекция неясной этилогии (1 г.), свинка (5 лет), в 4 года - аппендэктомия Случаев ПБ среди родственников не наблюдалось

Заболевания началось в возрасте 1 5 го дя Предлагаемая причина заболевания кишечный токсикоз (понос) Приступы заболевания чаще возникают в свчзи с приемом 5 пищи эмоциональным стрессом Период предвестников отмечается всегда за 1 2 дня до начала приступа в виде пожелтения и помутнения склер Дпительность приступа 1-3 дня, в течение месяца наблюдалось от О 10 до 3 обострений, в среднем за год около 8 Начальными проявлениями заболевания в период приступа были абдоминэлгия повышение температуры от 39 до 40° Приступам часто сопутствуют явления диспепсии (по- 5 нос, рвота), а также артропатии (боли в коленных суставах). В момент приступа моча темнеет, отмечаются учащенное мочеиспускание, озноб

Боли в животе острого характера пере0 менчивые чаще локализованы в левом и правом подреберье На пятом году заболевания у мальчика к болям в животе присоединились боли в нижних отделах грудной клетки, больше слева, иррадирующие в пле5 чо При болях в грудной клетке температура была не всегда В течение 1 мес ребенок получал колхицин В течение года приступов не было а затем возобновились Приступ купируется приемом амидопирина,

0 энтеросептола

Состояние при поступтении тяжелое кожные покровы бледные с землистым оттенком Отеки на лице нижних конечностях, туловище Со стороны легких на фоне жест5 кого дыхания единичные хрипы в нижних отделах легких ослабленное дыхание Границы сердца в пределах возрастной нормы. Тоны сердца приглушены, ритмичны систолический шум на верхушке, АД 110/70 Ап0 петит умеренный, язык с беловатым налетом, живот мягкий, умеренный асцит, безболезненный вне приступа, в момент обострения - болезненность и напряжение мышц передней брюшной стенки Печень

5 выступает на 2 см ниже реберной дуги Стул полуоформленный с непереваренными остатками пищи

Анализы Со стороны гемограммы - постоянное ускорение СОЭ (во время присту0 па 66 м/ч, вне - 58 мм/ч), тенденция к лейкоцитозу (10,2-13,6-10 /л), нейтрофилез (до 74%), лимфопения (24%) анемия - Нв - 84 г/л эр 2,59-10 /л Отмечалось диспроте- инэмия/ гипоальбуминэмия, оп , с& гипер5 глобулинэмия, наличие СПР (++, +++) СК (130, 280 ед пт пл ), увеличение содержания липопротеидов (65-120 ед.), остаточного азота (32-47 ммоль/л). Обнаружены сдвиги в гуморальном (lgA-350 мл%, lgM-180 мл%,

IqG 1400 мл%) клеточном (Т лимфоциты 47%) иммунитете

Со стороны мочи постоянная протеин турия (3,. Г) 8 25%) Суточная-экскреция форменных элементов крови с мочой в пределах нормы По пробе Зимницкого максимальная относительная плотность 1028, минимальная - 1015, никтурия дуоденальное зондирование без особенностей. На ЭКГ обнаружена легкая синусовая аритмия (72 уд/мин), повышение электрической активности миокарда левого желудочка На ФКГ отмечается снижение амплитуды 1 тона, систолический шум очень малой амплитуды, который носит функциональный характер. На рентгенограмме легких обнаружены очаговые тени, в особенности спра ва, с инфильтративными оттенками Справа нерезко выражены явления выпота На контрастной урограмме некоторое стазиро вание шейки правой почки, отмечаются до бавочные сосуды спраоа на уровне верхнего и среднего полюсов По дпшым эндоско пиии картина поверхностного гастродуо денитаПрисонографическом

исследовании почек с обеих сторон паренхима отечная рыхлая диффузно изменена Исследование биоптата из слизистой толстой кишки выявило диффузную лимфоги- стиоцитарную инфильтрацию при дополнительных окрасках на амилоид (кон- ко-рот, генциан-виолет) определяются фибриллярные нити красного цвета вокруг сосудов и в базальных мембранах слизистой, характерные для амилоида

У ребенка диагностирована периодическая болезнь смешанная форма, осложнения амилоидоз почек (нефротическая стадия), хронический поверхностный гэст- родуоденит. С целью выяснения диагностической значимости предлагаемого метода в сыворотке крот была определена активность фосфолипазы А Активность фермента была 2 ед пне приступа, 2 24 во время приступа что соответствует тяжелой степени воспалительно о процесса

Пример 4 Больной Г В , 10 лет, обследовался в

Мальчик от первой беременности, первых родов Масса при рождении 3200 г В три года перенес инфекционный гепатит часто болеег ОРЗ Наследственность отягощена младший брат страдает периодической болезнью Заболевание началось в 6-месячном возрасте с приступов болей в животе и повышения температуры до 38 С Приступы забопевания чаще возникают в связи с простудой эмоциональным стрес сом Спустя 7 лет от начала пболевания

при( оединилась артропатия а через 8 лет торакалгия Приступам всегда сопутствовали явления дис пепсин тошнота рвота ме теоризм задрржка гтула За несколько

часов до начала приступа всегда проявлялась нейровегетативная аура возбуждение капризность Длительность приступов в среднем 1 день, частота приступов 1 2 раза в месяц в год 12 раз

Состояние при приеме средней тяжести кожные покровы бледные с серовато- землистым оттенком Зев спокойный, в легких отклонений нет границы сердца в пределах нормы, тона несколько приглушены Живот вне приступа мягкий печень пальпируется на 2 см ниже реберной дуги Во время приступа пальпация животз невозможна из-за резких болей и выраженного дефанса мышц Мочеиспускание во время

приступа учащено

Лабораторные данные со стороны гемограммы НВ 130 г/л эр 389 1012/л лейк -9,310Q/fl неитрофилез 71%, СОЭ во время приступа 35 мм/ч вне приступа - 11

мм/ч отмечалась диспротеинемия гипо альбуминэмия a (ti гиперглобулинэмия наличие СПР(-н), ск 230 ед опт пл попротеиды - 45 ед ост азот - 17 ммоль/л креатинин М,2 ммоль/л Со стороны мочи

общий анализ мочи в пределах нормы по пробе Зимницкого - максимальная отн плотн 1027, минимальная - 1015 никтурия. Урохолецистография отмечается гипермоторная функция желчного пузыря

Слева почка несколько ротирована справа пиэлоэктэзия, стазирование верхних полюсов с двух сторон Мочеточники и мочевой пузырь в норме

Эзофагогастродуоденоскопия картина

поверхностного гастрита, дуоденита

У ребенка диагностирована периодическая болезнь смешанная форма Осложнения поверхностный гастродуоденит. дискинезия ж/в путей по гипермоторному

5 типу

На основании указанных выше функциональных и клинико-лабораторных данных состояние больного - средней тяжести Однако активность фосфолипазы А в сыворот0 ке крови составляла 1,84 что свидетельствует о тяжелой степени воспалительного процесса В последующем было установлено, что у больного периодическая болезнь была осложнена амилоидозом

5Таким образом при использовании

только способа-прототипа невозможно правильно определить сгепеньтяжести процесса а определение фосфолипазы А позволило уточнить (исправить) величину

активности процесса (степень тяжести заболевания).

Пример 5. Больной П.Г., 14 лет неоднократно обследовался в РДКБ г.Еревана (1984, 1986, 1988, 1989 гг.). Мальчик от первой беременности, первых родов. Масса ребенка при рождении 2700 г. Перинатальный анамнез без особенностей, В анамнезе отмечены эпидемический паротит, корь, тонзилэктомия по поводу хронического тон- зиллита.

В родословной случаев ПБ не обнаружено. Заболевание началось в 3-летнем возрасте с приступов болей в животе и повышения температуры до 39,5°С, Приступы заболевания чаще возникают в связи с приемом пищи, простуды. За несколько часов, иногда за сутки до начала приступа проявлялась нейровегетатйвная аура: общая слабость, недомогание. Дли- тельность приступов обычно составляет 2-3 дня, в течение месяца они проявлялись от 1 до 3 раз, в год - до 12.

При приеме состояние средней тяжести, кожные покровы бледные, сухие. Зев спокойный. В легких отклонений нет. На верхушке сердца нежный систолический шум. Живот мягкий, пальпация безболезненная, печень выступает из-под реберной дуги на 2 см. Во время приступа пальпация невозможна из-за резких болей и выраженного дефанса мышц. Анализы: Нв - 126 ед. Эр 3,71 1012/л, Л - 9,9 109/л, сегм. 69%, лимф. 28%, мои. 2%, СОЭ - 22 мм/ч, общий белок - 80 г/л, ост. азот 21,4 ммоль/л, / -липопротеиды - 55 ед. трансаминазы: ACT - 0,5 ммоль/л, АЛТ 0,75 ммоль/л, СРП (+++), СК 300 ед, опт. плотн.; анализ мочи Аддис- са-Каковского-Л-18-104, Эр 30-Ю4, проба

Зимницкого - склонность к никтурии. Уро- холецистография: моторика желчного пузыря не нарушена. Пилоэктазия справа, а слева - стазирование чашечек средних по люсов. Мочеточник и мочевой пузырь в норме. Эзогастродуоденоскопия: картина поверхностного гастрита, дуоденита, дуоде- ногастрального рефлюкса (ДГР).

У ребенка диагностирована периодическая болезнь, абдоминальная форма. Осложнение: поверхностный гастродуоденит, ДГР.

Итак, на основании приведенных данных состояние больного средней тяжести, активность фосфолипазы А в сыворотке крови - 2,0, что указывает на тяжелую степень заболевания и высокую степень активности воспалительного процесса, что и подтверждает в дальнейшем осложнение заболевания амилоидозом,

Обобщая все изложенное, можно заключить, что введение нового показателя (фосфолипазы А) позволяет уточнить степень активности воспалительного процесса и степень тяжести заболевания.

Формула изобретения Способ определения активности воспалительного процесса при периодической болезни у детей, включающий медико-биологическое обследование и биохимический анализ крови, отличающийся тем, что, с целью повышения точности способа, в сыворотке крови дополнительно измеряют активность фосфолипазы А и при ее значении 1,25, 1,55 и 1,84-2,0 усл. ед. вне приступа определяют соответственно легкую, среднюю и тяжелую степени активности воспалительного процесса.

Таблица 1

Изобретение относится к медицине, а именно к способам определения активности воспалительного процесса при периодической болезни у детей. Целью изобретения является повышение точности способа. Цель достигается тем, что у детей дополнительно в сыворотке крови определяют активность фосфолипазы А и при значении активности фермента (в ед. фосфолипазной активности) 1,25-1,40, 1,4-1,55, 1,80-1,90 вне приступа определяют соответственно легкую, среднюю и тяжелую степени воспалительного процесса при периодической болезни у детей. 1 фиг., 2 табл.

Изменение активности фосфолнпазы А в сыворотке крови при различных формах периодической болезни у детей вне приступа (М i м)

1,2t 0,02 1,31-0,1 1,,08 1,45tO,07 1,90tO,08 6 n 9 n 6

1 П и ц л 2. Л) 1 in not т i ф ) inп,1 i Л п t i mi ро I I t i p ыи при пери i;nice кои

flll KMIUI % ДР-П Н JO И ПОГЧ ПрОГ UI4H l 1ГЧ 1И I ( Ј if)

Здороные

лечения

1,12 0,0;

1,7A( 0,1 Г, 0,001

n 17

n 1 1

p и м е ч я ii и е. Р - по српппенишMI :n, in-itMin i с коптрочем;

- no cpunipiuiio111 Jif 4t н,(я с даннпми nor TIP кот po ы;

P, - no ( pamifMijironi mi-i ir го ЛРЧОЬПН г ininpmFM.

V II

1$ 2.0a

Ъ

i

1,5

1,0

0.5

0.

o 1ын 1Й

IOC ПР ЛРЧРНИЯ

1 , i 0,0/

. - )1

n - 1 1