Способ дифференциальной диагностики вирусного гепатита и подпеченочной желтухи Советский патент 1987 года по МПК G01N33/48 

Изобретение относится к медицине, в частности к гепатологии, и может быть использовано для дифференциальной диагностики вирусного гепатита и подпеченочной желтухи.

Цель изобретения - повышение точности способа за счет определения активности фосфолипазы А в сыворотке крови.

Способ осуществляют следующим образом.

1,0 мл сыворотки инкубируют в течение 15 мин при 60° С в водяном термостате. К 0,5 мл инкубированной ci воротки добавляют 0,5 мл 1%-ного раствора трипсина и вьщерживают 1 ч при 0°С. К 0,5 мл инкубированной смеси добавляют 1 мл рабочего раствора субстрата и вьщерживают в течение 1 ч в термостате при . Затем добавляют 0,5 мл 0,06 М раствора хлористого кальция (для прекращения реакции) и титруют 0,1 н, раствором NaOH в присутствии фенолфталеина.

Холостой опыт. К 0,5 мл сыворотки добавляют 1 мл рабочего раствора субстрата и 0,5 мл 0,06 М раствора хлористого кальция. Титруют как и опыт (0,1 н. NaOH) до появления бледно-розового окрашивания. Реактивы (фосфолипидную массу) готовят сле- дуннцим образом. На 1 г яичного желтк добавляют 10 мл раствора хлороформ - метанола (2:1). Сосуд с раствором ставят на магнитную мешалку на 30 мин Затем верхний слой удаляют, а нижний слой сушат в токе газового азота. Рабочий раствор субстрата готовят во время опыта. К 7 мг фосфолипидной массы прибавляют 3 мл 0,5 М трис- -NaCl-буфера (рН 8,0), который затем смешивают с 9 мл раствора натриевой соли дезоксихолевой кислоты.

Расчет производят по формуле:

О - ХО

X 2 X1 ед.фосфолипазы А в

опыт, ХО - хоХО

1 мл сьшоротки (о - лостой опыт).

Изобретение иллюстрируется следующими примерами.

Пример 1. Больная А., 38 лет, поступила на стационарное лечение с жалобами на слабость, отсутствие аппетита, тошноту, тупые боли в эпи- гастральной области, умеренный кож- ньй зуд, желтушность. Начало заболевания острое, с повышением темпера

5

5

туры, тошноты, слабости и дискомфорта в зпигастральной области; через 2 дня после начала заболевания потемнела моча, обесцветился кал, через 4дня появилась желтушность склер и кожи. После появления желтухи самочувствие улучшилось, в анамнезе контакт с желтушными больньБми не отмечает. Объективно: желтушность кожи, склер и видимых слизистых. Живот мягкий, болезненный при пальпации эпигастриаль- ной и правой подреберной областей. Верхняя граница печени на уровне VI ребра, нижний край на 2-3-4 см ниже реберной дуги, плотноватой консистенции, округлый. Селезенка увеличена. Стул рег.улярньй, кал ахоличный, моча темная. Сознание ясное, сон не нарушен. Билирубин: общий 153,9 мкмоль/л,

прямой 102,6 мкмоль/л, непрямой

51,3 мкмоль/л. АсАТ 2,8 мкг/ч/л, АлАТ 4,8 мкг/ч(л, сулемовая проба 1,7 мп. HBS AR отрицательная реакция. На основании клиники,- анамнеза и лабораторных данньк у больной установлен вирусный гепатит А. С целью выяснения диагностической значимости предлагаемого метода в сыворотке крови была определена активность фосфолипазы А предлагаемым способом. Активность фермента была равна 2,0 ед. в разгаре желтушного периода. После проведения соответствующей терапии больная выписана без жалоб, в удовлетворительном состоянии, с нормальными размерами печени, нормализованным билирубиновьм обменом. Активность фосфолипазы А у больной при выписке значительно снизилась и бьша равна 1,56 ед.

П р и М е р 2. Больная У., 31 год, поступила на стационарное лечение с жалобами на вьфаженную общую слабость, отсутствие аппетита, желтушность кожи и склер, темную мочу. Начало заболевания постепенное, со слабости, потери аппетита. Через 7- 8 дней появилась желтзшность кожных покровов и склер, которая постепнно

нарастала. В анамнезе за 2 мес до начала болезни - стационарное лечение с многочисленными парентеральными манипуляциями, в том числе переливание плазмы. Объективно: больная вялая, имеется интенсивная желтушность кожи, видимых слизистых и склер. Печень - верхняя граница на уровне V ребра, нижний край на 4-8 см

0

5

0

5

5

to

20

25

ниже правой реберной дуги, плотнова- той консистенции, с округлым болезненным краем. Селезенка увеличена. Кал ахоличный, моча темная. Сознание ясное, сон прерывистый. Билирубин: общий 153,9 мкмоль/л, прямой 88,92 мкмоль/л, непрямой 64,98 мкмоль/л. АлАТ 2,4 мкг/ч/л, АсАТ 1,2 мкг/ч/л, сулемовая проба 1,9 мл. HBS Ag - положительная реакция. На основании клиники, анамнеза и лабораторных данных, а также, учитьшая повышение активности фосфолипазы А в сьшоротке крови до 1,5 ед., бьш установлен диагноз вирусный гепатит B(HBS Ag - положительный).

П р и м е р 3. Больная М., 30лет, поступила на стационарное лечение с жалобами на отсутсвие аппетита, слабость, тошноту и желтушность. Начало заболевания постепенное со слабости, рвоты пищей, отсутствие аппетита. Через 11 дней после начала болезни появилась желтушность кожи и склер. В анамнезе контакт с желтушными больными и парентеральные вмешательства не отмечала. Объективно: интенсивная желтушность кожи, склер и видимых слизистых. Живот мягкий, пальпация безболезненная. Печень - верхняя граница на уровне V ребра, нижний край - на 4-5-8 см ниже правой реберной дуги, тупой, безболез- ненньй. Консистенция печени плотноватая. Селезенка не увеличена. Моча темная, кал ахоличньй. Желтушность имела тенденцию к нарастанию. Билирубин: общий 246,24 мкмоль/л, прямой 212,04 мкмоль/л, непрямой 34,2 мкмоль/л. АлАТ 8,9 мкг/ч/л, АсАТ 4,5 мкг/ч/л, JQ сулемовая проба 1,6 мл. HBS Ag положительная реакция. В разгаре желтушного периода с целью диагностики была определена активность фосфолипазы А в сыворотке крови, которая равнялась 5,4 ед. На основании клинико-лабора- торных данных, а также, учитывая повышение активности фосфолипазы А, у больной был установлен вирусный гепатит B(HBS Ag - положительный).

П р и м е р 4. Больной О., 45 лет, поступил на стационарное лечение fc жалобами на острые боли приступообразного характера в правом подреJ5

25

45

50

30

берье, сопровождающиеся рвотой пищей,55 ностики вирусных гепатитов и подпе- горечью и сухостью во рту. Желтуш- ченочных желтух на основании предла- ность появилась через 2 дня после приступа. В анамнезе периодически

гаемого способа точнее известного не менее, чем на 15%.

o

0

5

Q

повторялись приступы болей с последующей желтухой. Объективно: желтушность кожи с землистым оттенком. Живот болезненный при пальпации в правом подреберье. Симптомы Ортнера, Кера и френикус - положительные. Печень выступает на 2-2 см ниже реберной дуги, полуплотной консистенции с острым чувствительным краем. Селезенка не пальпируется. Моча темная. Кал ахоличный. Сон беспокойньш. Билирубин: общий 73,1 мкмоль/л, прямой 52,1 мкмоль/л, непрямой 21,0 мкмоль/л. АлАТ 1,56 мкг/ч/л, АсАТ 0,95 мкг/ч/л,

5 сулемовая проба 1,7 мл. С целью диагностики была определена активность фо-сфолипазы А в сыворотке крови, которая равнялась 1,2 ед. На основании клинико-лабораторных данных у больного бьш установлен калькулезный холецистит, подпеченочная желттх.а. Диагноз подтвердился при эхографическом исследовании желчного пузыря, а также при оперативном вмешательстве.

Приме р 5, Больной К., 59 лет, поступил на стационарное лечение с жалобами на изжогу, горечь во рту, слабость, отсутствие аппетита, периодические боли в правом подреберье, постепенно нарастающую желтуху. В анамнезе за 2 г до заболевания пуль- монэктомия по поводу рака легкого. За 2 мес до настоящего заболевания - стационарное лечение. Объективно: ин5 тенсивная желтушность кожи, склер и видимых слизистых оболочек. Печень-верхняя граница на уровне V ребра,нижний край выступает из-под реберной дуги. на 3-5-8 см, плотноватой консистенции с острым, неровным, болезненным краем; Селезенка не пальпируется. Моча темная, кал ахоличный. Сон не нарушен. Билирубин: общий 54,20 мкмоль/л, пря- мой 31,63 мкмоль/л, непрямой 22,57

5 мкмоль/л. АлАТ 2,7 мкг/ч/л, АсАТ 1,5 мкг/ч/л, сулемовая проба 1,7 мл. С целью уточнения диагноза в сыворотке крови была определена активность фосфолипазы А, которая равнялась

0 1,06 ед. Клинически был установлен диагноз - рак легкого с метастазами в поджелудочную железу и печень. Диагноз был подтвержден при аутопсии. Проведение дифференциальной диаг0

ностики вирусных гепатитов и подпе ченочных желтух на основании предл

гаемого способа точнее известного не менее, чем на 15%.

Статистическая обработка получен- ньк данных при определении активности фосфолипазы А у 127 больных вирусными гепатитами, 18 больных под- печеночными желтухами и 20 здоровых лиц проводилась по методу Стъюдента и Фишера, результаты которой следующие.

Активность фосфолипазы А при: М j+ m вирусных гепатитах 2,,12 подпеченочных желтухах

норме

1,30+0,05 1,31+0,03

По сравнению с нормой при вирусных гепатитах ,001, при подпеченочРедактор Н.Киштулинец

Составитель В.Гудошников

Техред Л.Олейник Корректор С.Черни

771/46

Тираж 777Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР

по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб„, д. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, г.Ужгород, ул.Проектная, 4

ных желтухах ,5. При сравнении активности фермента при вирусных гепатитах и подпеченочных желтухах .0,001.

Формула изобретения

Способ дифференциальной диагностики вирусного гепатита и подпече

ночной желтухи путем исследования крови, отличающийся тем, что, с целью повышения точности способа, в сыворотке крови определяют активность фосфолипазы А и при з-на- чениях ее 1,5-5,4 ед. диагностируют вирусный гепатит, а при значениях 1,0-1,3 ед. - подпеченочную желтуху,

Изобретение относится к медицине, а именно к гепатологии, предназначено для дифференциальной диагностики вирусного гепатита и под- печеночной желтухи. Для этого в сыворотке крови определяют активность фосфолипазы А. Если активность фермента в пределах 1,5-5,4 ед, диагностируют вирусный гепатит, при 1,0-1,3 ед - подпеченочнуто желтуху. Проведение дифференциальной диагностики вирусных гепатитов и подпече- ночньк желтух предложенньм способом точнее, чем известным, не менее чем на 15%.