Способ получения семян самонесовместимых форм петунии гибридной Советский патент 1991 года по МПК A01H1/02 

Изобретение относится к биологии, а именно к прикладной генетике, и может быть использовано в сельском хозяйстве, в плодоводстве и цветоводстве для получения инбредного потомства от самонеопыляю- щихся растений, в частности к петунии гибридной.

Целью изобретения является повышение выхода жизнеспособных семян материнского происхождения.

На фиг.1 представлена дозовая зависимость влияния у-облучения совместимого компонента пыльцесмеси на среднее количество жизнеспособных семян, образующееся при опылении одного цветка петунии гибридной; на фиг.2 -дозовая кривая роста пыльцевых трубок самонесовместимой и у-облученной совместимой пыльцы петунии гибридной в пестике растения петунии гибридной самонесовместимой после опыления.

Способ осуществляется следующим образом.

Для сбора пыльцы петунии гибридной срезают бутонизированные цветки непосредственно перед их раскрытием. Еще закрытые пыльники помещают на сутки в чашки Петри в условиях комнатной температуры и нормального давления. Из растрескавшихся пыльников производят вытру- шивание пыльцы путем быстрого ручного перемещения чашки i етри в разные стороны. Собранную пыльцу хранят при температуре -20°С в стеклянных плотных закрытых боксах. Для использования пыльцы ее перед началом эксперимента выдерживают в течение 1 с при комнатной температуре и 80%-ной влажности воздуха. Облучение -проводят у-радиацией в стеклянных боксах дозами 5000-6000 Гр в течение 4,5-5,5 ч при мощности дозы 0,3 Гр/с.

Облученную пыльцу смешивают в соотношении 1:1 со свежесобранной пыльцой самонесовместимых растений и сразу проводят опыление пестиков самонесовместимых растений приготовленной смесью. Облученную пыльцу собирают с растений,

(Л

С

о о

N)

&

ю

перекрестно совместимых с растениями из самонесовместимого клрна.

П р и м е р 1. Для сбора пыльцы петунии гибридной срезают бутонизированные цветки перед самым раскрытием. Пыльники помещают на сутки в чашки Петри при комнатной температуре на 24-28 ч после того, как их извлекли из цветков, Вытрушивание пыльцы из растрескавшихся пыльников проводят вручную путем резких перемещений чашек Петри. Собранную пыльцу помещают в стеклянные бюксы и облучали у-радиацией 60Со с мощностью дозы 0,3 Гр/с в дозе 2000 Гр в течение 1,8 ч. Облученную пыльцу смешивают с аналогично собранной пыльцой самонесовместимых растений в соотношении 1:1. Затем проводят опыление пестиков самонесовместимых растений полученной смесью.

Результаты опыления показали, что плоды образуются в 96% случаев после проведения опылений пыльцесмесями, При этом количество плодов с семенами составляло 68%, а в остальных плодах семян обнаружено не было. Среднее количество семян в плоде равнялось 9 ± 6. Всхожесть семян 66%. Отмечено большое количество разрушенных и пустых семян, а также семян с деградировавшим зародышем и эндоспермом (таблица и фиг.1).

Путем окраски срезанных, предвари - тельно опыленных пестиков с помощью флуоресцентного красителя анилинового голубого показано, что пыльцевые трубки совместимой пыльцы, облученной в дозе 2000 Гр за 1,8 ч, сохраняют способность дорастать до завязи и проникать в семяпочки (фиг.2). На фиг.2 также видно, что пыльцевые трубки самонесовместимой пыльцы при самостоятельном росте в пестике прекращают свое движение чуть ниже середины столбика пестика.

П р и м е р 2. Пыльцу петунии гибридной собирают из пыльников по методике, описанной в примере 1. Облучение совместимого компонента для пыльцесмеси проводят у-ра- диацией Со в дозе 4000 Гр в течение 3,6 ч при мощности дозы 0,3 Гр/с. После этого проводят опыление самонесовместимой петунии гибридной смесью из обученной совместимой и собственной самонесовместимой пыльцы в соотношении 1:1,

Результаты опыления показывают, что образования плодов происходят в 98% случаев. При этом в 72% случаев образуются семенные плоды, тогда как в остальных плодах семян обнаружено не было (таблица). Количество семян в плодах не превышало 29 и в среднем составляло 22 семян на плод.

В плодах отмечено наличие большого количества пустых семян без зародыша, а также разрушенных семян. Путем окраски срезанных опыленных пестиков с помощью краен-,

теля анилинового голубого пок-ззано, что пыльцевые трубки облученной совместимой пыльцы после применения дозы 4000 Гр в течение 3,6 ч сохраняют способность дорастать.до завязи и проникать в семяпочки

0 (фиг.1 и 2).

П р и м е р 3. Пыльцу петунии гибридной собирают из пыльников по методике, описанной в примере 1. Облучение совместимого компонента для пыльцесмеси проводят

5 дозой в 5000 Гр в течение 4,5 ч при мощности дозы 0,3 Гр/с. После этого проводят опыление пестиков растений самонесовместимого клона петунии гибридной пыльцес- месью из облученной совместимой и

0 самонесовместимой пыльцы в соотношении 1:1.

Отмечено появление плодов для вех опылений, При этом количество плодов с семенами составляет 96%. Остальные ха5 рактеризовались полным отсутствием семян или их остатками. Количество семян в плодах в среднем составляет 80 ± 17. Семена характеризуются высокой всхожестью. Отмечено уменьшение в плодах пустых и

0 разрушенных семян по сравнению с использованием дозы 4000 Гр за 3,6 ч. В результате всхожесть семян достигла 88% (таблица и фиг,1).

Путем проведения окраски срезанных

5 пестиков после их опыления облученной в дозе 5000 Гр за 4,5 ч совместимой пыльцой с помощью красителя анилинового голубого показано, что рост пыльцевых трубок продолжается до завязи (фиг.2),

0 П р и м е р 4. Пыльцу собирают из пыльника петунии гибридной по методике; описанной в примере 1. Совместимую пыльцу, собранную с перекрестно совместимых с опыляемым клоном растений, облучают до5 зой 6000 Гр в течение 5,5 ч при мощности дозы 0,3 Гр/с. После облучения проводят смешивание облученного компонента с с.а- монесовместимой пыльцой в соотношении 1:1 и полученной смесью опыляют самоне0 совместимые растения. Отмечено появление плодов для всех опылений. Количество семенных плодов достигает 96% от всего количества. Среднее количество семян в плодах равняется 85 ± 15 (таблица). Всхожесть семян достигла 90%. По методике с использованием флуоресцентного красителя анилинового голубого определено, что 5 рост пыльцевых трубок облученной совместимой пыльцы происходит до завязи.

П р и м е р 5. Сбор пыльцы осуществляют по методике, описанной .в примере 1. Совместимую пыльцу облучают в дозе 7000 Гр в течение 6,4 ч при мощности дозы у-ра- диации Со 0,3 Гр/с. После облучения проводят смешивание облученного компонента с самонесовместимой пыльцой в соотношении 1:1 и полученной смесью опыляют само- несовместимые растения.

Отмечено резкое уменьшение количества образовавшихся плодов в опылениях, причем количество плодов с семенами сократилось до 11. Количество семян в плоде составляет 3 ± 2. В то же время всхожесть семян осталась на уровне 87%, что указывает на низкое содержание в плодах неполне- ценных семян (таблица и фиг.1).

Использование предлагаемого способа позволит получить специалистам-селекционерам целый ряд преимуществ по сравнению с известным.

Это повышение выхода жизнеспособных семян материнского происхождения в

5-6 раз по сравнению с применением известного способа.

Уменьшение затрат на облучение у-радиацией за счет сокращения времени работы облучателя, и как следствие этого, сокращения времени работы обслуживающего персонала.

Уменьшение времени эксплуатации оборудования облучателя и подсобных помещений, т.е. снижение амортизационных расходов.

Формула изобретения

Способ получения семян самонесовместимых форм петунии гибридной, включающий опыление смесью собственной пыльцы и пыльцы совместимого компонента, предварительно обработанного у-излучением, в соотношении 1:1,отличающийся тем, что, с целью повышения выхода жизнеспособных семян материнского происхождения, совместимый компонент обрабатывают у -излучением в дозе 5000-6000 Гр при мощности дозы 0,3 Гр/с в течение 4,545,5 ч.

3456 Доза,Гр

8 9 №

Изобретение относится к биологии, а именно к прикладной генетике, и может быть использовано в сельском хозяйстве, в плодоводстве и цветоводстве для полунения инбрецного потомства от самонеопыляю- щихся растений, в частности у петунии гибридной. Цель изобретения - повышение выхода жизнеспособных семян материнского происхождения. При получении семян опыление проводят смесью собственной пыльцы и совместимого компонента, предварительно обработанного у-излучением, в соотношении 1:1. Совместимый компонент обрабатывают у-излучением в дозе 5000- 6000 Гр при мощности дозы 0,3 Гр/с в течение 4,5-5,5 ч. 2 ил.. 1 табл.

W

,

05

WT

I

с,н

Фиг.1