Аппарат для изотахофореза на пленках Советский патент 1992 года по МПК G01N27/453 

Изобретение относится к конструкциям электрофбретических аппаратов, используемых для быстрого и аффективного разделения высокомолекулярных соединений на компоненты в соответствии с их подеижностями с применением в качестве носителя, например, пленок из ацетата целлюлозы, и может быть использовано в химии, биохимии и медицине.

Цель изобретения повышение разрешаю1щей способности и сокращение времени анализа,

На фиг. 1 показан предлагаемый аппарат, разрез; на фит. 2 - подвижная рамка с

расположенной на ней пленкой; на фиг. 3 аппарат аксонометрия.

Аппарат (фиг. 1) состоит из корпуса 1, разделенного перегородкой 2 на два отделения, в каждом из которых установлены злектроды 3. На боковых стенках внутри корпуса по обе стороны перегородки 2 выполнены направляющие 4, в которые вставлены перегородки 5 так что между ними и дном корпуса 1 образуются щели 6 для равномерйого распределения электрического поля по ширине корпуса 1 и предохранения раствора, находящегося во внешних секциях электродных отделений, от продуктов

электролиза, образующихся на электродах 3. Перегородки5 являются опорами для размещения на них рамки 7 с пленкой 8, сформированной специальным с карманами 9,10 и 11 для внесения буферного раствора, раствора амфолинов и разделяемого препарата соответственно.

Пленка 8 расположена на перемычках 12 рамки 7 (фиг. 2), причем перемычки 12 имеют в верхней части заостренные выступи t3, которыми они касаются пленки 8 для снижения площади контакта пленки 8с рампой 7 и предотвращения тем самым нарушения потока жидкости в пленке. С обеих сторон рамки 7 в нижней ее части выполнены выступы 14 и 15. На рамке 7 поверх пленкм 8 установлена фиксирующая пленку накладная пластина 16с рядом равномерно расположенных впадин 17, количество которых соответствует количеству подлежащих делению образцов.

: Корпус сверху закрыт крышкой 18, на которой фиксированно размещены перфоратор 19 с щариковым фи ксатором 20 и фор(лмроаатель 21 карманов, выполненный, , изматриц22 и подпружиненного пуансона 23. На крышке 18 выполнены продзльнмй паз 24 и два поперечных паза 25 для однозначного размещения рамкм 7с пленкой 8 при обработке йо.следией перед проведением злектрофореза.

Перфоратор 19 состоит из подпружиненного перфор фующего злемента 26, ус тановленного над пазом 27 матрицы 28 перфоратора 19. расположенной под.пленкой 8 на крышке 18.

На верхней поверхности матрицы 22 формирователя 21 выполнен треугольный в сечении паз 29. соответствующий по профилю выступу 30 пуансона.

Аппарат работает следующим образом.

Смочен ю буферным раствором пленку & размещают на перемычках 12 рамки 7, фиксируют пленку 8 накладной пластиной 16 и совмещают выступ 14 рамки 7 с продольным Пазом 24 крышки 18. При перемещении рамки 7 вдоль паза 24 4« ксатор 20 последовательно в .каждую из впадИн 17 накладной пластины IS. П0и этом происходит фиксация, которая является сигналом оператору для нажатия на перфорирующий элемент 26. Последний, входя в паз 27 матрицы 28, пробивает в пленке 8 продольное отверстие.

Рамку снова перемещают вдоль паза 24 да следующего щелчка фиксатора 20. Операцию повторяют до получения необходимого количества отверстий. Затем последующим перемещением совмещают рамку 7 с формирователем 21 карманов и

нажатием на подпружиненный пуансон 23 совмещают выступ 30 с пазом 29 матрицы 22. При зтом в пленке 8 образуется карман 10. Перемещая рамку 7 вдоль поперечного Паза 25 на необходимое расстояние, формируют аналогичным образом карман 11.;

После извлечения рамки 7 из формирователя 21 карманов ее поворачивают на 180° и устанавливают в формирователь 21 карманов, совмещая выступ 15 с поперечным пазом 25. Нажатием на подпружиненный пуансон 23 формируют карман 9.

В результате получается с одного конца пленки один по всей ширине рамки карман 9, с другого - несколько карманов 11 для нанесения исследуемых образцов, разделенных продольными отверстиями, и рядом с ними по всей ширине пленки карман 10 для раствора амфолинов.

Рамку 7 с пленкой 8 помещают в корпус

Iна перегородки 5 так, чтобы конец пленки с карманом 11 размещался вблизи катодного отделения. В э/1ектродные отделения заливают соответствующие буферные растворы, на концы пленки накладывают влажные фитили, например, из фильтровальной бумаги, опуская концы 8 растворы электродных отделений. В карманы 9, 10 и

IIммкропипеткой заливают необходимые растворы, камеру закрывают крышкой 18. а электроды 3 подключают к выходным клеммам источника питания (не показан).

Разделяемые компоненты анализируе мого образца благодаря электроосмосу, создаваемому потоком раствора из кармана 9 у анодного отделения, концентрируются из всего объема раствора, внесенного в харман 11 образца, в узкую стартовую зону на границе кармана, распределяясь в зтой зоне, благодаря переместившимся в эту зону из кармана 10 амфолинам, в строго определенной последовательности в соответствии с их подвижностями. После концентрирования компоненты разделяемого образца под деййтеием электрофореза начинают перемещаться в порах пленки в сторону анода со скоростями, соответствующими их зарядам, и а результате распределятся отдельными зонами на горизонтальной части пленки между карманами 9 и 11. Известными методами пленку красят и отмывают от избытка красителя, проявляя тем самым результаты электрофоретического разделения.

Предлагаемый аппарат позволяет осуществлять всеметодики электрофореза, в том числе и изотахофорез на пленке - новый выcoкoэффeктив fый метод, обеспечивающмй анализ белковых компонентов, содержащихся в биологических жидкостях в следовых количествах, что чрезвычайно

важно для ран ней диагностики многих форм онкологических заболеваний, при выявлении тяжелых наследственных заболеваний плода человека, для контроля за эффективностью лечения и т. д.

Выполнение на крышку аппарата устройства для обработки пленки, состоящего из перфоратора и формирователя карманов, позволяет быстро придать пленке необходимую форму, уменьшает кoличectвo ручных операций. При этом исключается возможность загрязнения пленки и искажения тем самым результатов анализа.

Все операции обработки пленки проводятся непосредственно на рамке. Наличие паза на крышке обеспечивает однозначность установки рамки и исключает возможность ошибок оператора, стандарт14зирует условия электрофореза. Преимуществом аппарата является также снабжение перфоратора фиксатором. При этом располагаемая на рамке накладная пластина, снабженная впадинами, исключает возможность перемещения пленки в процессе обработки и служит устройством подачи сигнала для нажима на перфорирующий элемент. Количество впадин накладной пластины выбирается равным количеству одновременно знаяизируемых образцов.

Удобство в эксплуатации аппарата обусловлено тем. что формироватея ь карманов установлен за перфоратором в направлении перемещения рамки с пленкой. При этом матрица и пуансон формирователя установлены так, что при продвижении рамки с пленкой вдоль паза зона перфорированной пленки размещается между матрицей и пуансоном и простым нажатием на пуансон формирователя в пленке образуются карманы одной и той же формы и размеров, что позволяет получать воспроизводимые результаты анализа.

Формула изобретения

1.Аппарат для изотахофореза .на пленках, содержащий корпус с крышкой, разделенный на два электродных отделения перегородкой, рамку для носителя, установленную в корпусе, и перфоратор для .образования прорезей в носителе, отличающийся тем, что, с целью повышения разрешающей способности и сокращения времени анализа, аппарат снабжен формирователем карманов на носителе, установленном последовательно с перфоратором на крышке корпуса, н;а которой выполнены направляющие пазы для продольного и поперечного перемещения paiMKH относительно горизонтальной плоскости крышки.

2.Аппарат по п. 1, о т л и ч а ю щ и и с я тем, что рамка снабжена поперечными перемычками, имеющими остроконечные выступы, и накладной сменной пластиной с рядом равноотстоящих углублений.

3.Аппарат по п. 1, о т л и ч а ю щ и и с я тем, что формирователь выполнен в виде матрицы и пуансона, имеющих взаимодополняющую форму.

Изобретение относится к конструкциям электрофоретических аппаратов, используемых для быстрого и аффективного разделе- ния высоко- и низкомолекулярных соединений на компоненты в соответствиис их подвижностями с применением в качестве носителя пленок, например, из ацетата целлюлозы, и может быть использовано в химии, биохимии и медицине. Цель изобрё-- тения - повышение разрешающей способности И сокращение времени анализа. Аппарат состоит из корпуса с крышкой, разделенного на два электродных отделения перегородкой, по обе стороны которой расположены опоры для пленки, имеющей зону для размещения исследуемых образгдов. Аппарат снабжен перфоратором с фиксатором и формирователем карманов пленки, например, в виде пуансона с матрицей, которые установлены последовательно на крышке корпуса, а также рамкой, имеющей возможность продольного и поперечного перемещения относительно плоскости указанной крышки и снабженной накладной пластиной с рядом равномерно расположенных впадин, причем указанные опоры выполнены в рамке и имеют ряд выступов. 2 з.п. ф-лы,3мл.

S ;y gV yVvvyv% vyxKXXy ух yyjnorywutjtxxxxxxxioc

4 6 13 /7 / J 3 2 11

сриг4