Способ определения токсичности химического вещества Советский патент 1992 года по МПК A61B5/00 

Изобретение относится к медицине и может быть использовано при токсикологических и фармакологических исследованиях.

Известен способ определения токсичности, при котором после введения вещества в организм экспериментального животного определяют значения различных показателей. Один из них - показатель выносливости, который очень часто является лимитирующим при установлении порогов токсического действия вредных веществ. Для определения указанного показателя у мелких лабораторных животных применяют горизонтальный третбан, с помощью которого измеряют продолжительность бега животных по движущейся ленте.

Этот метод, несмотря на его чувствительность, не находит широкого применения из-за длительности процесса обучения (тренировки) животных бегу и высокого процента выбраковки животных вследствие отказа животных |бежать. Животные отказываются от бега в двух случаях - когда пугаются большой начальной скорости движения ленты или от нежелания бегать, т.е. симуляции. В обоих случаях животные прижимаются к задней стенке третбана, опираясь о нее, ограничиваются лишь перебиранием передних конечностей по движущейся ленте. Такие животные становятся непригодными для дальнейших экспериментов и подлежат выбраковке. Значительную часть среди забракованных составляют животные со слабым типом нервной системы, что является крайне нежелательным, поскольку такие животные наиболее чувствительны к воздействию ядов, и их выбраковка вносит большую погрешность в определение пороговых концентраций исследуемых веществ. А длительный процесс обучения животных бегу увеличивает трудоемкость проведения исследований.

Цель изобретения - ускорение при повышении точности за счет исключения рефлекторных остановок животного.

Способ осуществляют следующим образом.

Измеряют время бега животного по третбану до отказа после введения исследуемого вещества при постепенном увеличении скорости движения ленты третбана от 0 до максимальной, сравнивают полученные данные с физиологической нормой .

Осуществляют стимуляцию бега с помощью игл регулируемой в зависимости от толщины местного покрова животного длины, которые располагают на задней стенке третбана.

П р и м е р 1. Проведено исследование токсичности диплации дихлорида на четырех животных (белые крысы).

Двух животных обучали на третба- не при движении ленты с постоянной скоростью (40 м/мин), а остальных двух - с применением ускоренного движения ленты ( м/мин2) и дополнительной стимуляции иглами длиной 3 мм. На подготовку животных к эксперименту, т.е. выработку навыков бега по третбану, потребовалось в первом случае по 15 мин на 1 животное в тег чение 6 дн, во втором - по 15 мин в течение 3 дн. Затем двум контрольным животным вводили внутрибрюшинно по 1 мл физиологического раствора, а , двум - диплацин дихлорид в дозе k мг/кг веса животного. Длительность бега животных при постоянной скорости 0 м/мин составляла для контрольного животного 160 с, для опытного 152 с, при ускоренном движении ленты третбана ( м/мин2), длительность бега животных составляла у контрольного 128 с, у опытного 5Ь с

Результаты данного примера свидетельствуют о существенном различии показателя бега контрольных и опытных животных при применении способа с ускоренным движением ленты и дополнительной стимуляцией иглами. Отношение длительности бега контрольного и опытного животного составляет 2,3, а при использовании постоянной скорости и отсутствии игл 1,1. Это означает, что в данном конкретном случае точность нового способа повышается в 2 раза.

5

0

Положительный эффект подтверждается результатами экспериментального исследования по оценке влияния вещества, расслабляющего скелетную мускулатуру (диплацин дихлорид) на выносливость крыс. Использовали два способа оценки выносливости. По первому способу выносливость оценивали при постоянной скорости движения

5 ленты (15 м/мин) и с отсутствием на задней стенке третбана ориентирующих иголок. Во втором способе выносливость крыс оценивали при ускоренном движении ленты (от 0 до 50 м/мин) и с иголками (0,5-7 мм) на задней стенке. Эксперименты проведены на О белых беспородных крысах обоего пола массой 176,8+5,6 г. Каждую группу составляли 10 крыс. Диплацин дихлорид вводили внутрибрюшинно в дозе k мг/кг веса животного. Животным контрольных групп в том же объеме внутрибрюшинно вводили физиологический раствор. Через 15 мин после введения определяли показатель выносливости животных поочередно контрольных и опытных групп. В первом способе при использовании постоянной скорости и отсутствии ориентирующих

5 иголок на задней стенке достоверных различий показателя выносливости между опытными и контрольными животными не выявлено. Во втором способе при использовании ускоренного движео ния ленты и наличии ориентирующих иголок на задней, стенке различия оказались достоверными (,001). Применение предложенного способа позволило обнаружить, что диплацин дихлорид в дозе k мг/кг вызывает значительное в (4,5 раза) снижение выносливости животных. С помощью известного способа этот эффект не выявляется..

5

0

5

При сравнении точности измерений оценивали коэффициент вариации, который в первом способе оказался: в опытной группе 26,7%, в контрольной 23,1%{ во втором способе в опытной группе 18,1%-, в контрольной 14,1%. -. Таким образом, точность измерений показателя выносливости повысилась в 1,5-1,6 раза.

Продолжительность начальной стадии эксперимента - подготовки животных к бегу на выносливость - сокращается в 2 раза, так как при использовании способа с постоянной скоростью и отсутствии ориентирующих иголок она составила 6-7 дн, а во втором способе при использовании ускоренного движения ленты и наличии ориентирующих иголок 2-3 дн.

Влияние диплацин дихлорида на продолжительность бега крыс, определяемую известным и предлагаемым способами приведено в таблице.

Ф

о р м

ула изобр

10

1.Способ определения химического вещества путе времени бега животного до третбану после введения и го вещества и сравнения с ческой нормой, отлич с я тем, что, с целью ус повышения точности за сче ния рефлекторных останово го, нагрузку создают при увеличении скорости движе

15 от 0 до максимальной.

2.Способ по п. 1, от ющийся тем, что сти бег с помощью игл регулир

20 висимости от толщины мест ва животного длины, котор гают на задней стенке тре

25 Способ оценки выносливости I Контроль, с Опыт, с

Известный способ При движении ленты третбана с постоянной скоростью и отсутствии ориентирующих иголок71,2116,4 64,3117,1

Предложенный способ При ускоренном движении ленты третбана и наличии ориентирующих иголок 121,6417,1 2б,8±4,7 0,001

Ф

о р м

ула изобретения

1.Способ определения токсичности химического вещества путем измерения времени бега животного до отказа по третбану после введения исследуемого вещества и сравнения с физиологической нормой, отличаю щи и. - с я тем, что, с целью ускорения при повышения точности за счет исключения рефлекторных остановок животного, нагрузку создают при постепенном увеличении скорости движения ленты

от 0 до максимальной.

2.Способ по п. 1, отличающийся тем, что стимулируют бег с помощью игл регулируемой в зависимости от толщины местного покрова животного длины, которые располагают на задней стенке третбана.

Изобретение-относится к медицине и может быть использовано при токсикологических и фармакологических исследованиях. Цель изобретения - ускорение при повышении точности за счет исключения рефлекторных останог вок животного. Измеряют время бега животного по третбану до отказа при постепенном увеличении скорости движения ленты третбана от 0 до максимальной после введения исследуемого вещества и сравнивают результаты с физиологической нормой. Осуществляют стимуляцию бега с помощью игл регулируемой в зависимости от толщины местного покрова животного длины, которые располагают на задней стенке третбана. Ускоренное движение ленты третбана и стимуляция бега животного иглами регулируемой длины позволяют исключить при тестировании рефлекторные остановки животного, что приводит к ускорению и повышению точности способа. 1 табл. (Л