Устройство для извлечения ооцитов из изолированного яичника Советский патент 1992 года по МПК A61D19/02 

Изобретение относится к области сельскохозяйственной биологии и животноводству и может быть использовано для извлечения ооцитов из изолированных яичников в лабораторных условиях с целью культивирования, оплодотворения и использования их для последующей трансплантации.

Значимость этих исследований обусловлена необходимостью использования ог- ромного резерва зародышевых клеток (ооцигов) от выдающихся по продуктивным показателям коров. За весь период хозяйственного использования от таких животных получают не более 7-8 потомков, в то время как в яичниках каждого животного содержится порядка 200 тысяч зародышевых клеток и этот ценный генетический резерв теряется со сдачей животного на мясокомбинат. В настоящее время во многих лабораториях мира ведутся эксперименты по

использованию этого резерва с целью получения достаточно большого количества зародышей, а от пересадки последних самкам-реципиентам добиться многократного увеличения количества потомков от ценных в генетическом плане коров Реализация этой проблемы требует разработки и усовершенствования новых методических приемов, в том числе и по вопросу извлечения ооцитов из изолированных яичников

Известны два устройства для извлечения ооцитов из изолированных яичников Одно из них представляет собой блок параллельно вставленных бритвенных лезвий, которым надрезают поверхность яичника затем многоразовым обмакиванием яичника с надрезами в чашке Петри со средой смывают ооциты из разрезанных фолликулов. Данное устройство позволяет сравнительно быстро производить извлечение ооцитов. Недостатком его является то, что

-ч ел о

5

о

одновременно с ооцитами смывается из надрезов и тканевая жидкость, содержащая ряд продуктов распада, которые негативно влияют на качество извлеченных ооцитов

Другое устройство представляет собой шприц с насаженной инъекционной иглой. Извлечение ооцитов с помощью этого устройства производится следующим образом. В шприц набирают около 5 мл среды, конец иглы вводят через строму яичника в полость фолликула и b-b кратным приемом отсос-заполнение-отсос достигают извлечения ооцита из фолликула. Данное устройство позволяет производить эту процедуру более асептично и исключает возможность попадания тканевой жидкости в среду с извлеченными ооцитами. Недостатками устройства являются длительная процедура извлечения из-за необходимости многократной аспирации, возможность разрыва стенки фолликула при подаче жидкости в его полость и сравнительно низкий показатель извлечения ооцитов.

Целью изобретения является ускорение процесса извлечения ооцитов из изолиро ванного яичника без нарушения правил асептики, обеспечение высокого уровня извлечения ооцитов и исключение возможности попадания в вымывную среду тканевой жидкости.

Поставленная цель достигается устройством, включающим шприц-с насадкой для прокола стенки фолликула, отличительным признаком которого является наличие двух параллельно спаренных игл одинаковой длины, жестко фиксированных к переходнику, игла меньшего диаметра предназначена для подачи среды в фолликул, а игла большего диаметра служит для отвода жидкости из фолликула в приемник.

Новым в устройстве является насадка с двумя параллельно расположенными иглами. Иглы с тупого конца жестко фиксированы к переходнику, а посередине их длины установлен дополнительный фиксатор, который обеспечивает необходимый зазор между иглами. Канал иглы меньшего диаметра через переходник сообщается с каналом шприца. Параллельное расположение игл создает вихревой поток промывной жидкости в полости фолликула, который обрывает ооцит от фиксирующей его ножки. Большее внутреннее сечение отводящей иглы ограничивает увеличение давления промывной жидкости в полости фолликула и предохраняет стенку фолликула от разрыва

Апробация предлагаемого устройства в эксперименте более чем на 500 фолликулах

-

с диаметром от 2 мм и более показала предельно возможную эффективность (100% извлекаемости ооцитов).

На чертеже показано предлагаемое устройство.

Устройство состоит из переходника 1, к которому жестко фиксированы иглы 2 и 3 одинаковой длины. Иглы 2 и 3 посередине их длины жестко фиксированы фиксатором

4. обеспечивающим устойчивое положение игл и необходимый зазор между ними Игла 2, наружный диаметр кбторой равен 0.3 мм, сообщается с каналом шприца 5 и служит для подачи среды в полость фолликула Игла

Зс наружным диаметром 0,5 мм через гибкий катетер б, служит для отвода промывной жидкости 7 из полости фолликула в приемник 8. Расстояние между внешними краями игл 2 и 3 составляет 1.5 мм. что позволяет

извлекать ооциты из фолликулов, имеющих диаметр не менее 2,0 мм.

25

Устройство функционирует следующим образом

Перед использованием его стерилизуют кипячением в разобранном виде, а после стерилизации и сборки внутренние каналы устройства промывают стерильной средой.

0 В шприц 5 емкостью 10 м набирают среду 7 и насаживают на наконечник шприца переходник 1 с параллельно спаренными иглами 2 и 3. На тыльный конец отводящей иглы 3 подсоединяют приемник 8 посредством

5 гибкого катетера б Берут изолированный яичник и фиксируют его в удобном для манипуляции положении. Собранным устройством производят прокол стромы яичника касательно к дну фолликула. После входа

0 острых концов игл 2 и 3 в полость фолликула легким нажатием на шток шприца 5 подают в фолликул среду 7 через канал иглы 2. Объем среды, достаточный для смыва ооцита из фолликула, составляет 2 мл и подается в

5 один прием. Под воздействием возникающего давления жидкость из полости фолликула через канал отводящей иглы 3 и гибкого катетера б поступает в приемник 8, при этом в самой полости фолликула в период подачи

0 среды возникает вихревая циркуляция жидкости, под воздействием которой ооцит легко срывается с фиксирующей его ножки. Благодаря большему сечению внутреннего канала отводящей иглы 3 относительно иглы

5 2 исключается риск разрыва стенки фолликула при подаче среды в его полость. В таком порядке производят промывание других поверхностных фолликулов, причем одной заправки шприца средой достаточно для обработки 5 фолликулов Насадку с параигольной системой можно подсоединить к шприцу через стандартный трехходовой краник, что позволит производить заправку шприца средой без предварительного снятия насадки. Простота конструкции устройства способствует быстрому приобретению навыка по извлечению ооцитов, а время, затрачиваемое на обработку одного яичника, не превышает таковое при использрва- нии устройства для надрезов поверхности яичника.

0

Формула изобретения Устройство для извлечения ооцитов из изолированного яичника, включающее шприц с насадкой для прокола стенки фолли кула, отличающееся тем, что, с целью повышения эффективности эксплуатации нл- садка состоит из двух параллельно спаренных игл одинаковой длины, при этом игла, предназначенная для подачи среды в фолликул, имеет диаметр, меньший, чем игла для отвода жидкости из полости фолликула.

Устройство относится к сельскохозяйственной биологии и животноводству, используется для размножения животных. Устройство состоит из переходника, к которому жестко прикреплены иглы 2 и 3 одина ковой длины. Иглы 2 и 3 посередине их дли ны жестко фиксированы фиксатором 4 обеспечивающим устойчивое положение игл и необходимый зазор между ними Игла 2, наружный диаметр которой равен 0.3 мм сообщается с каналом шприца 5 и служит для подачи среды в полость фолликула Игла 3 с наружным диаметром 0,5 мм через гибкий катетер 6 служит дня отвода промывной жидкости 7 из полости фолликула в приемник 8. Расстояние между внешними краями игл 2 и 3 составляет 1,5 мм. что позволяет извлекать ооциты из фолликулов имеющих диаметр не менее 2.0 мм. 1 ил.