Способ диагностики гломерулонефрита Советский патент 1992 года по МПК G01N33/53 

Изобретение относится к области медицины, точнее нефрологии, и предназначено для диагностики латентных форм гломерулонефрита, а также для выявления генеза заболевания.

Целью изобретения является ранняя диагностика за счет выявления латентных форм и повышение специфичности способа. Цель достигается тем, что исследуют в крови антитела к вирусам респираторной группы (групп А, В, аденовирусы), 0-стреп- толизину, а также определяется HBsAg. По наличию повышения титров антител к одному из этих показателей или более диагностируют гломерулонефрит. Учитываются только положительные результаты исследования,

Способ осуществляется следующим образом.

Определение антистрептолизина-0 в сыворотках больных и оценку реакции проводили согласно инструкции Ленинградского НИИ вакцин и сывороток. Сыворотки

больных после предварительного прогревания при 56°С в течение 30 мин титровали на фосфатном буфере (рН 6,5 - 6,7). Стрептоли- зин добавляли в объеме 0,3 мл и после термостации в течение 15 мин при 37°С вносили 5% эритроциты человека. Реакцию учитывали после термостации при 37°С в течение часа; за достоверные результаты принимали полное отсутствие гемолиза /+/, учитывая титры антител от 313 интернац. единиц и выше, Проводили обязательные контроли эритроцитов и 0-стрептолизина.

Определение антител к вирусам гриппа А и В, аденовирусам проводили в РСК

Реакцию проводили в полистироловых панелях в объеме ингредиентов 0,2 мл.

После прогревания сывороток для удаления комплемента их титровали на фосфатном буфере (рН - 7,2).

После 1 фазы реакции панели выдерживали 1 ч в термостате при 1 - 37°С, после чего вносили гемолитическую систему. Учисл

С

« х|

со го

тывали реакции пи задержке гемолиза (на ++ и более).

Определз1- /,; HBsAg в сыворотках больных проводили качественным методом в РИГА со стандартным иммунодиагностику- мом с использованием микротитратора То- качи в v-панелях. Сыворотки больных в объеме 0,025 мл исследовали параллельно с иммуиодиагностикумом на HBsAg. и с контрольным препар ЗТснй - эритроциты кур, обработанное иммуноглобулинами нормальных ослиных сывороток.

Учет реакции проводили через 30 мин после термостатирования при +37°С по наличию агглютинации в опытной пробе на ++ и более и при отсутствии агглютинации в контроле.

При гломерулонефрите отмечалось наличие антител к вирусам гриппа А, В и (или) аденовирусам, и (или) 0-стрептолизину, и (или) определялся HBsAg в крови.

Сопоставление результатов способа с последующим морфдбиоптическим исследованием ткани почки выявило совпадение с данными морфологического исследова- ния, использованными в качестве критерия его достоверности (3). Следовательно, заявленный способ обладает новизной и существенными отличиями.

В качестве примеров приводим следую- щие клинические наблюдения.

П р и м е р 1. Больной И., 17 лет, и/б 28629. Поступил в клинику для обследования. Жалоб не предъяв-ял. Из анамнеза известно, что два года назад после ангины выявлены изменения Б анализах мочи - следовая протеинурия, микрогематурия. Лечения не проводилось. Месяц назад после охлаждения вновь выявлена протеинурия 0,033 г/л, эритроциты до 25 в п/зр. Направ- лен в стационар с целью уточнения диагноза и выбора лечения.

При обследовании в клинике в общем и биохимическом анализе крови изменений нет.

Анализ мочи: белок 0,066 г/л, лейкоциты 1 - 3 в п/зр., эритроциты 10 - 12 в п/зр. Посев мочи роста флоры не дал. По данным рентгенологического исследования мочевой системы патологических изменений не выявлено. Функциональные показатели обеих почек в пределах нормы.

Больному проведено серологическое исследование крови. Выявлены антитела к 0-стрептолизину в титре (625 ед.) и заподоз- рен диагноз гломерулонефрита. При морфологическом исследовании ткани почки выявлен сегментарный очаговый мезанги- ально-пролиферативный гломерулонеф- рит. Пациенту назначено лечение,

П р и м е р 2, Больной В., 43 года, и/б 17614, поступил в клинику с жалобами на небольшие поясничные боли ноющего характера, быструю утомляемость, периодические подъемы артериального давления до 140/100 мм рт.ст. Из анамнеза известно, что больной часто болел простудными заболеваниями (грипп, пневмония, ангина). Десять лет назад после ОРВИ впервые были выявлены изменения в моче (микрогематурия до 100 в п/зр., белок 0,165 г/л). В дальнейшем, на фоне простудных заболеваний отмечалась протеинурия от следов до 0,66 г/л. Получал фитотерапию. В течение последнего года стали отмечаться периодические подъемы артериального давления. Два месяца назад после перенесенного ОРВИ выявлена протеинурия до 0,33 г/л, микрогематурия. Направлен для обследования в специализированное отделение.

При осмотре состояние больного удовлетворительное. Объективно со стороны внутренних органов без особенности, При обследовании в клинике в анализе крови ускорение СОЭ до 20 мм/ч. В биохимических анализах отклонений не обнаружено. По данным рентгенологического и ультразвукового исследования почек изменений не выявлено. Функция почек сохранена. В анализе мочи белок-следы, эритроциты 6 - 8 в п/зр.

Проводился дифференциальный диагноз между гипертонической болезнью и гло- мерулонефритом.

Проведенное серологическое обследование выявило антитела к аденовирусам Коксаки В в высоких титрах. Установлен ди- агноз гломерулонефрита. При нефро- биопсии этот диагноз подтвержден: морфологически выявлен мембранозно- пролиферативный гломерулонефрит с признаками морфологического обострения, Назначено лечение.

ПримерЗ. Больная Р,,28лет, и/63823, поступила в клинику с жалобами на общую слабость. В анамнезе частые ангины, ОРВИ. Три года назад на фоне ОРВИ выявлена микрогематурия и следовая протеинурия. Не лечилась. Год назад - нефропатия беременности, Направлена для обследования. При осмотре состояние удовлетворительное, со стороны внутренних органов без особенности. В анализе мочи белок 0,099 г/л, эритроциты 10 - 15 в п/зр. Функциональные пробы почек сохранены,

При серологическом исследовании крови выявлен HBs антиген, антитела к вирусу гриппа А (1:160), высокий титр 0- стрептолизина (1250 ед,). Морфологическое исследование подтвердило диагноз мезангиально-пролиферативного гломерулонеф- рита. Выявлен отложение HBsAg в ткани почек. Назначена комплексная терапия.

Таким образом, приведенные примеры демонстрируют, как применение способа диагностики позволяет определить гломе- рулярный характер и генез заболевания. Как следует из приведенных примеров, имеет место полное совпадение результатов способа с данными морфологического исс- ледования почечной ткани, использованными в качестве критерия его достоверности.

Существенными отличительными признаками заявленного способа являются дополнительное определение в крови Am к вирусам респираторной группы, 0-стрептолизину, определение HBsAg и по выявлению титра Am и наличию HBsAg диагностирование гломерулонефрита.

Перечисленные приемы ранее с целью диагностики гломерулонефрита не использовались.

Выбор указанных показателей обусловлен их специфичностью в отличие от других иммунологических показателей. Например, антитела к морфологическим элементам почечной ткани при гломерулонефрите могут встречаться и при других заболеваниях,

Использование предлагаемого способа диагностики имеет по сравнению с при- меняем ы ми ранее преимущества: неинвазивность исследования, возможность исследования в динамике, определение генеза заболевания и с учетом его выбор методов лечения и профилактики.

В отличие от способа - прототипа заявленный способ диагностики позволяет выявить скрытые латентные формы гломерулонефрита, что было затруднительно при применении способа-прототипа, кроме того является более специфичным.

Все больные с латентной формой гломерулонефрита характеризовались наличием протеинурии и сероконверсией (предшествующая вирусная или бактериальная инфекция, подтвержденная серологически) в 75% случаев. Показатели (сероконверсия + про- теинурия) достоверно отличались от контрольной группы и группы больных пиелонефритом и гипертонической болезнью.

Содержание/ 2-микроглобулина в крови больных гипертонической болезнью и гло- мерулонефритом отличалось от контроля, но достоверно не различалось между группами.

Сопоставление результатов определе- ния/32-микроглобулинэ в крови и моче с морфологическими данными, использованными в качестве критерия его достоверности, выявило совпадение диагноза гломерулонефрита лишь в 25% случаев.

Применение способа, разработанного авторами, позволяет диагностировать гло- мерулонефрит на 4 - 5 лет раньше, еще до стадии хронической почечной недостаточности, что позволяет своевременно применить лечение.

Формула изобретения Способ диагностики гломерулонефрита путем иммунологического исследования крови, отличающийся тем, что, с целью ранней диагностики за счет выявления латентных форм гломерулонефрита и повышения специфичности способа, в исследуемой крови определяют присутствие антигена HBsAg и повышенное по сравнению с нормой содержание антител к вирусам респираторной группы и 0-стрептолизину и при наличии одного и более из исследуемых показателей диагностируют гломерулонеф- рит,

Изобретение относится к области медицины, преимущественно к нефрологии, и может быть использовано для диагностики гломерулонефрита. Целью изобретения является ранняя диагностика и повышение специфичности способа. Эта цель достигается тем, что в случае наличия мочевого синдрома неясного генеза дополнительно исследуются в крови HBsAg, антитела к вирусам респираторной группы и 0-стрепто- лизину и при наличии одного из этих показателей или более диагностируют гло- мерулонефрит. Данный способ позволяет выявить латентные формы гломерулонефрита, обладает специфичностью, неинвази- вен, может быть использован в динамике, определяет генез заболевания и с учетом его выбор терапии,