Способ определения естественной резистентности организма Советский патент 1992 года по МПК G01N33/48 

Изобретение относится к медицине, преимущественно к педиатрии, и найдет использование для определения естественной резистентности организма новорожденных детей.

Известен способ определения состояния естественной резистентности организма, С целью дифференциации уровня реактивности организма у бол ьных хроническим пиелонефритом в качестве неспецифического стимулятора используют пирогенал в дозе 10-15 мпд, определяют размер максимальной эритемы и при 0 ее до 15 мм определяют высокую резистентность, при 15-30 мм - нормальную, а при болееЗОмм - пониженную резистентность.

Данный способ нельзя применять для определения степени резистенгности детского организма, т.к пирогемал не рекомендуют использовать у детей в связи с обилием осложнений Кроме того, его нельзя применять у новорожденных дегей. т.к. им проводить нагрузочные пробы противо

показано в связи с большой вероятностью срыва адаптации.

Целью изобретения является снижение травматичности способа.

Для этого в пуповинной крови определяют содержание фибронектина и миоглобина, рассчитывают соотношение первого показателя ко второму и при величине его значения 8, и менее диагностируют пониженную естественную резистентность организма.

Определение содержания фибронектина проводят методом ракетного иммуноэ- лектрофореза на пластинках с 1% гелем агарозы толщиной 1,5-1,7 мм, содержащим специфическую сыворотку, Условия имму- ноэлектрофореза: градиент потенциала 8 В/см, продолжительность фореза 12 ч в трис-глицин-барбиталовом буфере рН 8,8 ионной силой 0,02, После диффузии пластинку окрашивают 0,5% раствором амидо- черного 10 Б в смеси этанол:ледяная уксусная кислота: вода в соотношении

XI

00

шД

о о ел

4,5:4,5 1. Количественную оценку проводят измерением площади преципитационных пиков с помощью масштабной линейки.

Определение миоглобина проводят с помощью иммунохимического эритроци- тарного диагностикума, выпускаемого НПК при НИИ медицинской радиологии АМН СССР. В 12 лунок полистироловой пластинки вносят по 0,1 мл физиологического раствора. В 1-ую лунку добавляют 0,1 мл сыворотки и проводятъе двухкратное разведение (1:2, 1:4, 1:8 и т.д.) в последующих лунках. Затем вносят в каждую лунку 0,05 мл 1% взвесй эритроцитов, сенсибилизированных антителами к миоглобину. Пластинку осторожно встряхивают. Параллельно проводят контрольное определение со стандартным раствором миоглобина. Нали- ,чие агглютинации определяют через 30 мин по равномерному распределению эритроцитов по дну лунки

Сопоставление соотношения фибронектина и миоглобина в пуповинной крови с клинически м состоянием ребенка первого года жизни и данными лабораторного обследования позволило установить, что уменьшение вышеуказанного коэффициента до 8,0j; 103 и ниже свидетельствует о пониженной1 естественной резистентности организма новорожденного. Это Лбдтверж- дается катамнестическими наблюдениями 72 детей. Все дети, у которых при рождении выявлена пониженная естественная рези- Стентность, в течение первого года жизни перенесли несколько раз ОРВИ, у ряда из них наблюдались малые формы гнойно-воспалительной инфекции, дисбактериоз, дис- ферментоз, диатез, у большинства из них отмечены неврологические нарушения, вероятно, вследствие перенесенной внутриутробной гипоксии.

Результаты исследований приведены в таблице.

Из таблицы следует, что имеются статистически достоверные отличия между показателями I и II групп. Причем соотношение фибронектина и миоглобина в сопоставляемых группах находится в неперекрещивающихся диагностических интервалах.

П р и м е р 1. Ребенок Р-о родился 22.04.88 г. у женщины с индуцированной овуляцией, страдающей гипофункцией яичников, массой 3000 г. Оценен по шкале Ап- гар 9-10 баллов. При рождении соматический и неврологический статус соответствовал возрасту.

Содержание фибронектина в пуповинной крови - 162 мкг/мл.

Содержание миоглобина -20 нг/мл

Соотношение фибронектина и миоглобина в крови пуповины - 8,.

Общий анализ крови от 26.04.88 г.: Нв - 175 г/л, Эр. - 5,5 10|2/л, Ц.п. - 0,9, Лк - 9,4л хЮ9/л, Э - 3, П - 1, С - 45, Лф - 48, М - 23, . СОЭ-4мм/ч,

Из родильного дома выписан на 7 сутки в удовлетворительном состоянии.

В течение года находился на диспансер- 0 ном наблюдении. Осмотрен ЛОР-врачом, окулистом, невропатологом, эндокринологом - патологии не выявлено.

Общий анализ крови от 20.04.89 г.: Эр. -4,3 1012/л., Нв-124 г/л, Ц.п.-0,9,Лк-8,Ох 5 Л09/л, Э - 2, П - 1, С - 34, Лф - 59, М - 4, , СОЭ - 7 мм/ч. Билирубин крови от 20.04.89 г.: общий - 15 мМ/л, прямой - 3 мМ/л, непрямой - 12 мМ/л. Общий белок сыворот- ки крови - 82 г/л. СРВ - отрицательно. 0 Общий анализ мочи: белок - отсутствует, Лк - 1-2, Эр - 0-0-1, эпителий плоский - 0-1, солей нет. Протеолитическая активность мочи- 1.7 мед/мл

Активность трипсина кала-150 ед., ди- 5 астазы кала - 100 ед , энтерокиназы кала - 70 ед.

Таким образом, выявленная при рождении нормальная естественная резистент- ность организма подтвердилась 0 обследованием и наблюдением за развитием ребенка в течение первого года жизни. Пример 2. Ребенок К-я родился 28.04.88 г. у женщины с индуцированной овуляцией, страдавшей галактореей-амено- 5 реей, массой 3250 г., оценен по шкале Апгар 7-8 баллов.

При рождении отмечался акроцианоз. Соматический статус - без изменений. С первых суток жизчи обнаружилась невроло- 0 гическая симптоматика в виде мелкоразмашистого тремора, гиперрефлексии, вздрагиваний, спонтанного рефлекса Моро, ригидности затылочных мышц.

Содержание фибронектина в сыворотке 5 крови пуповины-315 мкг/мл.

Содержание миоглобина - 40 нг/мл. Соотношение фибронектина и миоглобина в крови пуповины - 7, ъ.

Общий анализ крови от 03.05.88 г.1 Нв - 0 195 г/л, Эр. - 6,0 1012/л., Ц.п. - 0,9, СОЭ 2 мм/ч . . Лк - 9,и109/л„ Э - 1. П - 1, С - 33. ЛФ-52.М-13

Выписан на 11 сутки в удовлетворительном состоянии.

5 Повторно ребенок обследован в возрасте 6 месяцев. За это время он дважды перенес ОРВИ в 2 и 4 мес, экссудативно-катаральный диатез При обследовании выявлена тимоме- галия, функциональная кардиопатия, поражение ЦНС в виде гипертензионного

синдрома, дисферментоз (активность трипсина кала - 16,7 ед., диастазы кала - более 200 ед , энтерокиназы кала - 12 ед).

Последующее диспансерное наблюдение показало, что ребенок переболел ОРВИ еще 2 раза в 7 и 12 месяцев. В течение всего периода наблюдения отмечались явления дисбактериоза и дисферментоза, последствия поражения ЦНС, функциональная кар- диопатия.

Таким образом, снижение естественной резистентности организма, выявленное при рождении, подтвердилось дальнейшим наблюдением за развитием и состоянием здоровья ребенка.

Предложенный способ позволяет произвести определение естественной резистентности организма у новорожденных без лекарственной нагрузки на организм ребенка, с достаточной простотой используемых диагностических тестов и возможностью

широкого использования его в любом стационаре

Формула изобретения Способ определения естественной резистентности у детей, отличаю щийся тем,

что, с целью снижения травматичности способа при обследовании новорожденных, иссле- дование ведут в пуповинной крови. определяют уровень фибронектина и миогло- бина, рассчитывают соотношение первого

показателя к второму и при его значении 8,0 jt103 и менее определяют пониженную естественную резистентность у новорожденных.

Изобретение относится к области медицины, преимущественно к педиатрии, и найдет использование для определения естественной резистивности организма новорожденных детей. Цель: устранение лекарственной нагрузки. Сущность: в пуповинной крови определяют концентрации фибронектина и миоглобина любым известным методом и производят расчет их соотношения. Уменьшение вышеуказанного коэффициента до 8,0-103 и ниже свидетельствует о пониженной естественной резистентности организма новорожденного. Положительный эффект: способ позволяет своевременно определить состояние пониженной резистентности и предотвратить возникновение патологических состояний у детей. 1 табл.

Соотношение содержания фибронектина и миоглобина (в иг/мл) в крови пуповины

Примечание I группа-26 детей, у которых при рождении диагностирована нормальная естественная резистентность; П-группа -46 детей, у которых при рождении определена пониженная естественная резистентность