Способ прогнозирования характера течения саркоидоза Советский патент 1992 года по МПК G01N33/48 

Изобретение i-тносится к медицине и может найти применение во фтизиатрии для прогнозирования течения саркоидоза, что имеет значение при определении необ- ходимос ти и характера терапии больных.

Известен способ прогнозирования характера течения саркоидоза, заключа.ю- щийся в определении концентрации иммуноглобулина А в сыворотке крови. У больных с прогрессирующим течением болевания уровень иммуноглобулина А значительно повышается по сраЁнению со здоровыми лицами и больными с регрессией патологического процесса.

Недостатками данного способа являются:

-недостаточная точность прогйозй Г- вания характера те ения саркоидоза;

-технологическая сложность осущебт 4 ления методики;

-длительность постановки реакции,. Известен способ прогнозирования характера течения саркоидоза, заключающийся в определении копичества В-лимфоцитов

в периферической крови (в реакции ЕАС- РОК), У больных с прогрессирующим течением саркоидоза количество В-лимфоцитов не изменяется, тогда как у больных с регрессией патологического процесса количество В-лимфоцитов достоверно увеличивается.

Недостатками данного способа являются:

- недостаточная точность прогнозирования характера течения саркоидоза;

-технологическая сложность осуществления методики.

Известен способ прогнозирования характера течения саркоидоза, заключающийся в проведении реакции бластной трансформации лимфоцитов (РБТЛ). Способ основан на активации пролиферативной способности лимфоцитов. У больных сарко- й дозом эта функция лимфоцитов значительно ниже нормальных величин. Однако у больных с прогрессирующим течением саркоидоза бласттрансформация лимфоиитов достоверно ниже (31,6 ±2,4%), чем у вольных с регрессией патологического процесса

СЛ

С

XI 00

СдЭ

о

(41,5± 2,2%, ,01) (см. в кн.: Е Ф.Черну- шенко, Л.С.Когосова Иммунология и иммунопатология заболеваний легких - К : Здоров я, 1981,-с. 66-94).

Этот способ является наиболее близ- ким к предлагаемому по технической сущности и принят в качестве прототипа.

Недостатками способа, выбранного в качестве прототипа, являются:

-недостаточная точность прогнозиро- вания характера течения саркоидоза;

-технологическая сложность осуществления способа;

-длительность постановки реакции (4 суток).

Цель изобретения - повышение точности способа и сокращение времени исследования.

Поставленная цель достигается тем, что в известном способе, заключающемся в ис- следовании функции лейкоцитов, согласно изобретению, определяют адгезивную способность лейкоцитов, рассчитывают отношение абсолютного числа прилипших клеток к абсолютному числу клеток взвеси и при значении полученного показателя 7,1 ±0,8% прогнозируют прогрессирующее течение, а при значении 3,7 ±1,0% - регрессивное течение саркоидоза.

Способ прогнозирования характера те- чения саркоидоза осуществляется следующим образом. Гепаринизированную кровь (2 мл) центрифугируют при 1500 об/мин в течение 10 мин, Снимают белую пленку лейкоцитов и разводят до 1 мл средой 199. Подсчитывают количество лейкоцитов (нейтрофилов и моноцитов) в этой взвеси в камере Горяева, окрашивая клетки раствором генцианвио- лета (1%) на уксусной кислоте. 0,1 мл этой взвеси наслаивают на стекло с лункой и инкубируем в термостате при +37°С в течение 5 мин. Эритроциты и неприлипшие клетки отмывают фосфатным буфером. В лунку заливают 0,1 мл 0,2%-ного раствора ЭДТА, содержащего 5% сыворотки крупного рогатого скота и ставят в холодильник (+4°С) на 15-20 мин. За это время все прилипшие ранее клетки отлипают от стекла и их количество подсчитывают в камере Горя- ева. Показатель адгезивной способности лейкоцитов вычисляют по формуле:

абс. число прилипших клеток ,лп 0/

X-- - IUU /о .

абс. число клеток во взвеси

У впервые выявленных больных с последующей регрессией заболевания показатели адгезивной способности снижаются

0

5

0 5

0

5 0 5 0

5

(3,7± 1,0%) по сравнению со здоровыми лицами (8,5f1,4%). У больных с последующим прогрессированием заболевания этот показатель не будет отличаться от нормальных величин (7,1 ±0,8%).

Ниже приведены конкретные примеры выполнения способа.

Пример 1. Больная Г., 34 г поступила в клинику КНИИФП с диагнозом - саркои- доз легких. Из анамнеза известно, что изменения в легких выявлены в декабре 1987 г. после обращения по поводу простуды. Больная жалуется на одышку, боли в грудной клетке, сухой кашель. Аускультативно - дыхание жесткое, хрипов нет. На рентгенограмме от 14.06.88 г. - диффузное усиление легочного рисунка, мелкосетчатая очаговая диссеминация легких. В корне правого легкого увеличены бронхопульмональные лимфоузлы, Общий анализ крови - лейкоциты - 8,1x10 э-3, ю-2, п-6, с-59, лф-28, м-2. Общий анализ мочи без особенностей.

Иммунологическое обследование выполнено согласно методике, предлагаемой в изобретении:

определение адгезивной способности лейкоцитов -10,5% (при норме - 8,5 ±1,4%).

Поскольку данный показатель достоверно не отличается от нормальных величин, что предполагает прогрессирование саркоидоза, больной Г. с первых дней пребывания в стационаре назначен метилпред- низолон.

Пример 2. Больной Д., 32 г., поступил в клинику КНИИФП с диагнозом - саркои- доз внутригрудных лимфоузлов и легких, активная фаза. Изменения в легких выявлены при профосмотре. Данные обследования при поступлении: общий анализ крови - лейкоциты - 5,3х109, э-5, п-5, с-72, лф-13, м-5, СОЭ-11 мм/ч. Общий анализ мочи без особенностей. Рентгенография - билатеральная мелкоочаговая диссеминация. Корни легких расширены за счет выраженного увеличения бронхопульмональных лимфоузлов.

Иммунологическое исследование выполнено согласно методике, предлагаемой в изобретении:

- адгезивная способность лейкоцитов составила 1,3%.

Резкое снижение показателя адгезии лейкоцитов свидетельствует о вероятной спонтанной регрессии заболевания, поэтому в данном случае можно воздержаться от назначения гормональных препаратов. При повторном обследовании больного через б месяцев данные клинического и рентгенологического обследования подтвердили

спонтанную регрессию патологического процесса.

Всего обследовано 64 больных впервые выявленным саркоидозом, из которых у 49 процесс прогрессировал, у 15 - была в по- следующем установлена регрессия заболевания. В качестве контрольной группы обследовано 30 практически здоровых лиц.

Приводим таблицу, которая дает сопоставительную характеристику метода про- тотипа и предлагаемого изобретения.

Способ прогнозирования характера течения саркоидоза находит применение у впервые выявленных больных данным забо- леванием при определении терапевтической тактики, поскольку саркоидоз характеризуется возможностью спонтанной регрессии патологического процесса. Данный способ позволяет определить необ- ходимость применения гормональных препаратов в случае прогрессирования заболевания или же не назначать их в случае спонтанной регрессии. Предлагаемый способ позволяет повысить точность и со- кратить время (с 4 суток до 1 ч) прогнозирования характера течения саркоидоза.

Применение для этих целей определения адгезивной способности лейкоцитов исключает длительный и трудоемкий этап культивирования клеток в РБТЛ, а также использование труднодоступных и дорогостоящих реактивов, используемых в способе прототипа. Учитывая простоту и доступность методики, способ прогнозирования характера течения саркоидоза может найти широкое применение в практическом здравоохранении. Его использование возможно в иммунологических лабораториях учреждений фтизиопульмонологического профиля.«

Формула изобретения Способ прогнозирования характера течения саркоидоза путем исследования функции лейкоцитов, отличающийся тем, что, с целью повышения точности способа и сокращения времени исследования, определяют адгезивную способность лейкоцитов, рассчитывают отношение абсолютного числа прилипших клеток к абсолютному числу клеток взвеси и при значении полученного показател 7,1 ±0,8% прогнозируют прогрессирующее те чение, а при значении 3,7± 1,0% - регрессии ное течение саркоидоза.

Использование: в области медицины и может найти применение во фтизиатрии для прогнозирования течения саркоидоза, что имеет значение при определении необходимости и характера терапии больных. Сущность изобретения: определяют адгезивную способность лейкоцитов, рассчитывают отношение абсолютного числа прилипших клеток к абсолютному числу клеток взбеси и при значении полученного показателя 7,1 ± 0,8% прогнозируют прогрессирующее течение, а при значении 3,7 ±1,0% - регрессирующее течение саркоидоза. Способ позволяет повысить точность и сократить время (с 4 суток до 1 часа) прогнозирования характера течения саркоидоза.

Примечание.р- достоверность различий с контрольной группой

3.У больных с последующим прогрессированием саркоидоза адгезивная способность лейкоцитов не изменяется.