Способ дифференциальной диагностики диссеминированного туберкулеза и саркоидоза легких Советский патент 1992 года по МПК G01N33/53 

Изобретение относится к области медицины и может найти применение во фтизиатрии и пульмонологии для дифференциальной диагностики диссеминированного туберкулеза и саркоидоза лег- ких.

Известен способ дифференциальной диагностики туберкулеза и саркоидоза, заключающийся в проведении реакции бласт- ной трансформации лимфоцитов (РБТЛ) с туберкулином in vitro. Метод основан на активации пролиферативной способности сенсибилизированных лимфоцитов под действием специфического антигена. У больных туберкулезом количество бластообразующих клеток в присутствии туберкулина, как правило, значительно больше, чем у больных саркоидозом. Культивирование клеток проводят в течение 4дн.

Недостатками данного способа дифференциальной диагностики туберкулеза и саркоидоза легких являются: недостаточная

точность дифференциальной диагностики туберкулеза и саркоидоза легких; длительность постановки реакции; технологическая сложность осуществления методики.

Известен способ дифференциальной диагностики туберкулеза и саркоидоза легких, заключающийся в проведении реакции торможения миграции лейкоцитов (РТМЛ), которая основана на подавлении миграции лейкоцитов из капилляров под действием медиатора, синтезируемого сенсибилизированными лимфоцитами в присутствии специфического антигена. Реакция проходит 24 ч.

Недостатками данного способа являются: недостаточная точность дифференциальной диагностики туберкулеза и саркоидоза легких; длительность постановки реакции.

Данный способ является наиболее близким по технической сущности заявляемому изобретению и принят в качестве прототипа.

сл

с

Ч ч

00

8

Цель изобретение - повышение точности и сокращение времени дифференциальной диагностики диссеминированного туберкулеза и саркоидоза легких за счет определения адгезивной способности нейтро- фильных гранулоцитов в присутствии аутосыворотки,

Поставленная цель достигается тем, что в известном способе, заключающемся в определении функциональной активности лейкоцитов, согласно изобретению определяют адгезивную способность нейтрофиль- ных гранулоцитов в присутствии аутосыворотки больного и при повышении адгезивной способности клеток по сравне- нию с контролем без аутосыворотки диагностируют саркоидоз, а при отсутствии различий или снижении - диагностируют диссеминированный туберкулез легких.

Способ дифференциальной диагности- ки диссеминированного туберкулеза и саркоидоза легких осуществляется следующим образом.

Гепарипизмрованную кровь наслаивают на раствор фиколл-верографина с гра- диентом плотности 1,080. центоифугируют 30 мин при 1500 об/мин при+4°С. Снимают белую пленку нейтрофилов на осадке эритроцитов и разводят средой 199 до 1 мл. Количество нейтрофильных гранулоцитов (НГ) подсчитывают в камере Горяева, окрашивая клетки растворов генцианвиолета на уксусной кислоте. Полученную взвесь наслаивают на стекла с лункой (контроль). Для прилипания НГ стёкла инкубируют в термо- стате при +37°С 5 мин. Эритроциты и непри- липшие клетки отмывают фосфатным буфером. В лунку заливают 0,1 л 0,2% раствора ЭДТА (этилендиаминтетраацетат или трилон Б), содержащего 5% сыворотки круп- ного рогатого скота и ставят в холодильник на 20 мин. За это время все прилипшие клетки отстают от стекла, их количество подсчитывают в камере Горяева. Вычисляют процент прилипших клеток, что является по- казателем адгезивности. Для определения действия аутосы воротки на адгезивную способность НГв реакцию добавляют 0,2 мл мл декомплементированной (при 56°С 30 мин.) аутосыворотки (опыт). В контрольную пробу добавляют 0,02 мл среды 199. Показатель действия аутосыворотки вычисляют по формуле:

опыт

контроль

При достоверном повышении адгезивной способности НГв присутствии аутосыворотки (показатель реакции больше 1,0, в среднем - 1,7 ±0,2) диагностируют саркоидоз, а при отсутствии или снижении реакции

(показатель меньше или равен 1,0, в среднем - 0,9±0,1) - туберкулез легких.

Использование аналогичных отличительных существенных признаков в медицине для указанной выше цели заявителю неизвестно. Это дает основание сделать вывод, что предлагаемое изобретение обладает новизной, а обеспечение данными признаками указанного способа для достижения поставленной цели подтверждает их существенность.

Ниже приведены конкретные примеры выполнения способа.

П р и м е р 1. Больная Б., 26 лет, история болезни № 125, поступила в клинику КНИИ- ФиП с диссеминированным процессом в легких 05,01.88 г. Изменения в легких выявлены при рентгенообследовании.

Данные обследования при поступлении: общий анализ крови - лейкоциты - 7,6х хЮ /л. э-8, Ю-1, п-6, с-60, лимфоциты - 20, м-5, СОЭ - 29 мм/час. Общий анализ мочи без особенностей. Проба Манту - отрицательная. Рентгенография (06.01.88 г.)- значительно усилен легочный рисунок с узелками по ходу тканей. Корни легких расширены, уплотнены.

Иммунологическое исследование выполнено согласно методике, предлагаемой в изобретении:

-определение адгезивной способности НГ в контроле (4,5%).

-определение адгезивной способности НГв присутствии аутосыворотки (11,5%).

Адгезивная способность клеток в присутствии аутосыворотки повысилась в 2,3 раза. Реакция НГ периферической крови данного больного на аутосыворотку при определении адгезивной способности этих клеток позволяет диагностировать саркоидоз легких.

П р и м е р 2. Больной Б., 47 лет, история болезни № 536. поступил в клинику КНИ- ИФП с диссеминированным процессом в легких 29.12.87 г. Изменения в легких выявлены при профосмотре.

Данные обследования при поступлении: общий анализ крови -лейкоциты - 7.1х хЮ /л, э-4, п-6, с-59, лимфоциты - 26, м-5, СОЭ - 11 мм/ч. Общий анализ мочи без особенностей. Проба Манту отрицательная. Рентгенография - билатерально в легких мелкоячеистая деформация, усиление легочного рисунка, мелкоочаговые изменения. Корни легких расширены с элементами фиброзной деформации.

Иммунологическое исследование выполнено согласно методике, предлагаемой в изобретении:

-определение адгезивной способности НГ в контроле 14,5%

-определение адгезивной способности НГ в присутствии аутосыворотки (опыт) 8%.

Адгезивная способность НГ в присутствии аутосыворотки снизилась и показатель реакции составил 0,5. Поскольку аутосыво- ротка данного больного не стимулирует адгезивную способность НГ. это позволило диагностировать диссеминированный туберкулез легких.

Всего обследовано 43 больных впервые выявленным диссеминированным туберкулезом и 58 больных саркоидозом легких, находящихся на лечении в КНИИФиП.

Приводим таблицу, которая дает сопоставительную характеристику метода прототипа и заявляемого изобретения.

Из таблицы следует РТМЛ не отличает- ся у больных туберкулезом, саркоидозом и здоровых лиц, поэтому не может служить дифференциально-диагностическим тестом; используя определение реакции адгезии НГ периферической крови на аутосы воротку, согласно изобретению, выявлено, что у больных диссеминированным туберкулезом адгезивная способность НГ в присутствии аутосыворотки не изменяется или же снижается (в среднем это соста- вило 0,9±0,1), что является диагностическим признаком в определении туберкулезного процесса, при определении реакции адгезии НГ крови на аутосыворотку больных саркоидозом. согласно изобрете- нию, установлено значительное повышение адгезионной способности этих клеток в присутствии аутосыворотки (в среднем это составило 1,7± 0.2), что является диагностическим признаком саркоидоза.

Способ дифференциальной диагностики диссеминированного туберкулеза и саркоидоза легких находит применение у лиц с характерной клинико-рентгенологической картиной, отрицательными туберкулиновыми пробами и отсутствием бактериовыделе- ния, когда не известно, с какой патологией мы имеем дело, какой терапевтический подход нужен данному пациенту.

Данный способ позволяет повысить точность дифференциальной диагностики туберкулеза и саркоидоэа легких и сократить время диагностики с 2 сут до 2 ч. Учитывая простоту и доступность методики, способ дифференциальной диагностики диссеминированого туберкулеза и саркоидоза легких может найти применение в практическом здравоохранении. Его использование возможно в иммунологических лабораториях учреждений фтизиопульмо- нологического профиля.

Формула изобретения

Способ дифференциальной диагностики диссеминированного туберкулеза и саркоидоза легких, заключающийся в определении функциональной активности лейкоцитов, отличающийся тем, что, с целью повышения точности и сокращения времени проведения способа, определяют адгезивную способность нейтрофильных гранулоцитов в присутствии аутосыворотки больного и при повышении адгезивной способности клеток по сравнению с контролем без-зутосывороки диагностируют сарком- доз а при отсутствии различий или снижении - диссеминированный туберкулез легких.

Изобретение относится к медицине и может найти применение во фтизиатрии, и пульмонологии для дифференциальной диагностики диссеминированного туберкулеза и саркоидоза легких. Цель изобретения - повышение точности и сокращение времени способа за счет определения адгезионной способности нейтрофильных гранулоцитов в присутствии аутосыворотки. В новом способе определяют и сопоставляют адгезивную способность нейтрофильных гранулоцитов в присутствии аутосыворотки и без нее и при достоверном повышении реакции в присутствии аутосыворотки диагностируют саркоидоз, а при отсутствии или снижении реакции - дис- семинированный туберкулез легких. 1 табл.