КОНСЕРВИРУЮЩИЙ НЕАКТИВНЫЙ РАЗБАВИТЕЛЬ ДЛЯ ЖИВЫХ КЛЕТОК ЖИВОТНОГО ПРОИСХОЖДЕНИЯ Советский патент 1967 года по МПК C12N5/02 

Изобретение относится к консервирующим неактивным разбавителям для живых клеток животного происхождения, например, спермы, зародышевой плазмы, клеток костного мозга, в особенности оно относится к консервирующим неактивным разбавителям, которые можно замораживать.

Р1звсстные консервирующие разбавители для живых клеток животного происхождения включают многоатомные спирты (эритрий. адоний, сорбит, маннитт, инозит), моно- i дисахара (глюкоза, сахароза).

Кроме высокой стоимости известные разбавители не гарантируют полной сохранности живых клеток при хранении.

Предлагаемый разбавитель в значительной мере лищен этих недостатков. Это достигается за счет того, что в состав разбавителя, помимо экстракта сухих яичных желтков, предварительно высущенных распылением, вводят в качестве углеводов полисахариды, в частности, частично гидролизованные продукты природных крахмалов растительного происхождения.

Наиболее приемлемый состав разбавителя: водный экстракт высушенных распылением яичных желтков - от 25 до 100 частей, полисахариды -от 0,5 до 15 частей. В состав разбавителя могут быть введены моно- и дисахара из расчета не больше 2 частей.

В состав разбавителя вводят буферную жидкость из расчета создания рП разбавителя от 6,0 до 7,5 и его осмотического давления от 225 до 350 миллиосмолов.

Консервирующий неактивный разбавитель, поддающийся замораживанию, может быть смешан с живыми клетками и использован общепринятыми способами. Лучше использовать заготовленный разбавитель в виде. Однако жидкая часть разбавителя может быть высушена распылением или при температуре ниже . Перед употреблением сухой экстракт разбавляют водой.

При длительном хранении к разбавителю добавляют от 5 до 10% глицерина (по объему). Глицерин можно добавлять до пли после смешения ячивых клеток с приготовленным разбавителем.

Пиже даны пpи iepныe составы консервирующего неактивного разбавителя для бычьей спермы.

Пример 1. Лимоннокислый цатрий 54 г Вода2 л

Высушенные распылением яичные

желтки100 г

Пример 2. Щелочная соль лимонной кислоты27 г Вода1 л Сухие яичные желтки 50 г Высушенная кукурузная патока5 г Пример 3. Буфер, рН 6-7,5, осматическое давление от 250 до 300 миллиосмолов

ВодаI л

Сухие яичные желтки25-100 г

Полисахариды:

без добавочного сахара

или спирта2-15 г

с добавочным сахаром0,5-15 г

Виноградный и (или)

фруктовый сахарО- 2 г

Предлагаемый разбавитель обеспечивает сохранность в жизнеспособном состоянии бычьей спермы, например, на 1-2 дня дольше, чем стандартный разбавитель цитрат (желтки при хранении при комнатной температуре и при температуре -j-5°C).

После замораживания до температуры жидкого азота иодвил :ность высококачественной бычьей спермы составляет 55%, против ЗОо/о на стандартном разбавителе и низкокачественной бычьей спермы 35о/о против 5% на стандартном разбавителе.

Предмет изобретения

1. Конссрвируюший неактивный разбавитель для живых клеток животного происхождения, включающий жидкий экстракт сухих яичных желтков, буферную жидкость и углеводы, отличающийся тем, что, с целью более

полной сохранности живых клеток при хранении, в качестве углеводов взята смесь полисахаридов, например, частично гидролизованные конечные продукты природных крахмалов растительного происхождения.

2. Разбавитель по п. 1, отличающийся тем, что содержание водного экстракта сухих яичных желтков принято от 25 до 100 частей, полисахаридов от 0,5 до 15 частей.

3.Разбавитель по пп. 1 и 2, отличающийся тем, что яичные желтки высушены распылением.

4.Разбавитель по пп. 1-3, отличающийся тем, что, в его состав добавлены моно- и дисахара из расчета не свыше 2 частей.

5. Разбавитель по пп. 1-4, отличающийся тем, что буфер взят из расчета создания рН разбавителя от 6,0 до 7,5 и его осмотического давления от 225 до 350 миллиосмолов.