СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СВОБОДНОГО И ОБЩЕГО ХОЛЕСТЕРИНА В СЫВОРОТКЕ КРОВИ Советский патент 1969 года по МПК G01N33/90 

Из1вестны способы определения свободеого и общего холестерина в сыворотке крави, основанные «а реакции холестерина с хлориым железо1М в присутствии «онцентри.рованныл серной и уксусной кислот. Указанные апособы недостаточно точны, нредусматривают раздельное определение овободното и о-бщего холе1стерина и требуют для своего осуществления сравнительно большого количества сыворотки крови.

Предлагаемый способ отличается от известных тем, что свободный и общий холестерин определяют последовательно в одной пробе путем определения свобод ного холестерина при 20°С и последующего .нат.ре1вания приблизительно до 100°С оставшейся в лробирже после определения свободного холестерина смеси сыворотки с реактивом, охлаждения ее до комнатной температуры и определения общего холестерина фотоэлектроколориметрическим способом.

Реа. хлорного железа готовят смешением трех частей 0,1%-го раствора хлорного железа в ледяной ук1сус-ной кислоте с двумя частями КОЕцентрированной серной кислоты.

Для осуществления анализа по предлагаемому способу в пробирку помещают 3 мл реактива хлорното желбза и 0,03 мл свежей негемолизированной сыворотки крови, перемешивают и оставляют на 1 час при комнатной

температу.ре. Затем окраску раствора сравнивают :на фотоэлектроколори.метре с контрольной пробой, в качестве которой используют реа.ктив хлорного железа без холестерина. Определение оптической плотности ведут со светофильтром, имеющим мак|симум лропуокаиия при 560 ммк. Затем пробирку с пробой прогревают на кипящей водяной бане, охлаждают до комнатной температуры и вновь измеряют оптическую плотность раствора, определяя таким образом концентрацию общего холестерина.

П.редмет изобретения

1. Способ определения сво1бодного и общего холестерина в сыворотке крови, основанный на реакции холестерина с хлорным железам в смеси с концеитрированными серной и уксус0ной кислотами, отличающийся тем, что, с целью повышения точности исследования, сокращения времени анализа и минимального расхода сыворотки крови, свободный и общий холестерин определяют последовательно в одной пробе путем определения свободного холестерина при 20°С и последующего нагревания приблизительно до 100°С оставщейся в пробирке после определения свободного холестерина смеси сыворотки с реактивом, охлаж3деления общего -холестерина фотоэлектрическим способом. 2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что определение свободного и общего холестерина 4 производят с реактивом хлорного железа, содержащим три части ОДо/о-го раствора хлорного железа в ледяной уксушой кислоте и две части ковцентрированной серной кислоты.