Способ определения уреазной активности почвы Советский патент 1974 года по МПК E21C49/00 G01N33/24 

1

Изобретение относится к изучению стенени естественного плодородия почв, в частности, из уреазной активности, т. е. способности к разложению ими мочевины с образованием углекислоты и аммиака.

Известны способы определения уреазной активности почвы, включающие колориметрирование с реактивом Иесслера, аммиака, образующегося в результате гидролиза и ингибирования путем нагревания.

Недостатком известных способов определения уреазной активности почв является использование в качестве контрольных образцов предварительно автоклавированных, при температуре 100-120°С, нроб почвы, что приводит к дополнительному образованию аммиака в контроле за счет гидролиза азотсодержащих соединений иочв, в результате чего увеличивается время проведения анализа.

С целью данного уменьщения времени проведения анализа ингибирование контрольиого до инкубации и опытного после инкубации образцов почвы производят 10%-ным раствором медного купороса при 15-25°С.

Это исключает дополнительное образование аммиачного азота, имевшее место при термическом гидролизе азотсодержащих соединений, которым может сопровождаться автоклавирование проб почвы.

Предлагаемый способ позволяет не только повысить надежность и точность результатов анализа, но и существенно сократить его общую продолжительность. Способ заключается в следующем.

Навеску почвы, почвенную вытяжку или гемогенат (100-200 мг) помещают на дно диффузпонного сосуда, добавляют буферный раствор (рН 7-7,5) п после тщате.мьного перемсщивания приливают 10%-иыи раствор мочевииы в 2,5-5-кратпом количестве против на вески почвы п толуол в количестве 10-20% от объема раствора мочевины. В контрольную пробу, помимо указанных

реагентов, после добавлен1 я буферного раствора приливают раствор ингибитора - 10%ный раствор CuSO4 с итоговой коицентрацией меди в пробе не менее 8,4-10- мл. Сосуды закрывают пробками со стеклянными палочками и помещают па один-два часа в термостат с температурой 37°С.

После извлечен я сосудов пз термостата открывают пробкп, приливают па дно опытного сосуда 10%-вый раствор CuSO4 в том же количестве, что и в контрольный сосуд. Содержимое тщательно перемешивают п ставят сосуды в горизонтальном положении перегородкой вниз в держатель ротора для активного перемешивания реагентов. Затем в передний

отсек сосуда добавляют реагент с рН 10-11, например насыщенный раствор КгСОз.

Стеклянную палочку смачивают 1н. серной кислотой, закрывают сосуды иробками и включают ротатор на один час при скорости вращения 70-100 об/мин.

После остановки ротатора аммиачный азот, фиксированный на стеклянной палочке, смывают реактивом Несслера, а окрашенный комплекс фотомеТируют для определения количества образовавшегося аммиака, характеризующего уреазную активность почвы. Содержание аммиачного азота определяют по калибровочному графику. Пересчет уреазной ак тивности почвы проводят па 1 г сухой почвы или ее органической массы.

Способ был широко испытан и по сравнению с другими известными способами определения уреазпой активности почв показал более правильные и точные результаты.

„

Предмет изооретения

Способ определения уреазной активности почвы, например торфяной, включающий колориметрирование с реактивом Несслера, аммиака, образующегося в результате гидролиза и ингибирования путемнагревания, отличающийся тем, что, с целью уменьшения времени проведения анализа, ингибирование контрольного до инкубации и опытного после Р1икубации образцов почвы производят 10%-ным раствором медного куиороса при 15-25Т..