Способ дезинтексикации организма в эксперименте Советский патент 1975 года по МПК A61K17/00 G01N33/16 

1

Изобретение относится к медицине, а точнее к разработке методов лечения острой и хронической печеночной недостаточности.

Известен способ дезинтоксикации организма животного от продуктов распада путем внутрисосудистого введения крови и кровозаменителей.

С целью более полного выведения продуктов распада белков, жиров и углеводов в качестве детоксицирующих веществ вводят гомологичпые и гетерологичные гепатоциты.

Способ осуществляют следующим образом.

Получают клеточную взвесь печени крысы. Для этого отмывают печень крысы от крови раствором Хенкса путем коиюлирования (в полой и портальной вене). Внутрь сосудов вводят ферментный раствор (200 мг гиалуронидазы на 100 мл раствора Хенкса). Затем печень в течение Ш мин инкубируют в ферментном растворе при 37°С. Для этого печепь помещают в 40 мл ферментного раствора и при постоянном перемещивании пропускают через среду воздуха. После этого снимают или повреждают капсулу печени путем нанесения надрезов с последующей инкубацией в течение 20 мин. Печень вручную измельчают и вновь инкубируют в течение 10 мин.

Полученную взвесь нропускают через нейлоновый фильтр, и добавляют к фильтрату

равное количество раствора Хенкса, а затем взвесь иеченочных клеток центрифугируют.

Суснеизию клеток хранят в растворе Хенкса, растворе среды 199.

Подсчитывают клетки среды с помощью камеры Горяева. Количество печеночных клеток в 1 мл суспензированного раствора достигало 20 млн. Для нроверки жизнеспособности клетки

применяют морфологический метод и световую микроскопию. Каплю суспензии изолированных гепатоцитов сразу после получения смещивают с раствором трипанового синего и микроскопируют. При этом клетки выглядят

хорощо сохранивщимися, клеточные мембраны и ядра четко дифференцированы. Цитоплазма не прокращивается. Для определения жизнеспособности используют также биохимические методы.

Получеиную клеточиую взвесь используют при лечепии печеночной недостаточности у животных с созданной моделью заболевания. При сосудистом методе введения оптимальными дозами являются 1,0 мл, 0,5 мл и

0,25 мл на 100 г веса крысы (при концентрации клеточной взвеси 20 млн. в 1 мл); нри внутрибрющинном и внутриплевральиом методах введения - дозы 1,5 мл, 1,0 мл, 0,5 мл и 0,25 мл на 100 г веса крысы. А при подкожном введении рекомендуют применять 2,0 мл,

1,5 мл, 1,0 мл и 0,25 мл клеточной взвес i на 100 г веса животного.

Печеночную недостаточность создают п гтем перевязки печеночной артерии или путел сужения портальной вены. При этом у пе шой группы клиническая картина развиваете: по типу острой печеночной недостаточности, а у второй группы - по типу хронической г гченочной недостаточности.

Исследование моделп острой печеночно недостаточности провели на 140 крысах пс четырем группам. При этом первой группе осуществляли внутрисосудистое введение кле точной взвеси; второй группе - внутрибрю IKHное введение клеточной взвеси; третьей г lynпе - внутриплевральпое введение клето ной взвеси; а четвертой группе - впутрисос; дистое введение разрушенной клеточной взв ;си.

При лечении моделей заболевания у жи ;отных с острой печеночной недостаточностью оптимальными дозами являются 0,5 мл и 0,25 мл. Исследование модели печеночной недо таточности провели на 50 крысах по двум г{ уппам: первой группе осуществляли внутрис( судистое введение клеточной взвеси, а второй группе - Бнутрибрющинное введение клеточной взвеси.

Оптимальной дозой клеточной взвеси при лечении модели печеночной недостаточности является доза 1 мл клеточной взвеси на 100 г веса животного.

Наиболее рациональными методами введения клеточной взвеси являются впутрисосудистое и внутрибрющинпое.

Терапевтические дозы клеточной взвеси при

острых заболеваниях составляют 0,5 мл на

100 г веса животного, при концентрации

20 млн клеток в 1 мл; при хронических заболеваниях - 1,0 мл взвеси.

Предмет изобретения

Способ дезинтоксикации организма в эксперименте путем введения в организм детоксицирующих веществ, отличающийся тем, что, с целью более полного выведения продуктов распада белков, жиров и углеводов, в качестве детоксицирующих веществ вводят гомологичные и гетерологичные гепатоциты.