Способ фотометрирования объектов, находящихся в оптически активной среде,содержащей контрастные включения Советский патент 1980 года по МПК G01J3/06 G01J1/04 

- I

Способ относится к одновремсиному опре делению оптических свойств объекта и коЛнчествз koHTpacTHbix включений в оптически, активной среде над ним и может быть применен в биологии, медицине, ядерной физике.

Известен способ определения числа контрастных включений в активной среде, например зерен в эмульсии, заключающийся в визуаль- ном подсчете этих зерен, их растворешш, oKjpaшиваний объекта, например клетки, и определении оптической плотности объекта с помощью фотометра 11.

Однако этот способ имеет низкую точность и характеризуется трудоемкостью проводтмых операций.

Наиболее близким по технической сущжзсти к предложенному является известный способ фотометрирования объектов, находящихся в оптически активной среде, содержащей контрастные включения, заключающийся в том, 9ТО указанную смесь освещают параллельным пучком света и сканируют полученное просветное Изображение с помощью зонДа и фотоприемника, связанного с системой регистрации. В этом

способе последовательно определяется, оптическая плотность объекта совместно с расположенными та, toiM контрастными включениями путем фотояктрнрования в двух длинах 1валн, оптическая плотность контрастных включений фотометрированием в третьей длине волны, где сам объект прозрачен, и размер объекта, который оценивается по размеру зонда-диафртгмы, в которую о1бьект вписывается. Затем по полученным данным вычисляется оптическал плотность самого объекта при предположении равномерности распределения вещества объекта под контрастными включениями и вне их. (2.

Однако характерными для этого способа являются длительность производимых операций, а также большая ошибка в определении разме{U объекта сложной формы.

Цель изобретения - упрощение процесса измерений, а также повышение точности определения чнсяа контрастных включений и оптической плотности объектов, например, клеток, находащихся в оптически активной среде.

Это достигается Тем, что используется одно толковый истоЧ1тк излучения, а сканирование ведется одновременно двумя кондентрическими р ондами разного размера, затем сканограммы совмещаются таким образом, чтобы их перссечеш1е происходило на пиках, соответствующих контрастным включениям, находящимся в объекте или в среде над . Полученный разное кый сигнал одновременно используется для Подсчета контраст1шх включений и Ш1й исключения сигналов от контрастных включений лрн определения оптической плотности объекта. Предложенный cnocofil точнее известных, . т как нС требует (шределения площади объекта к ускоряет время измерений, поскольку все Ьперации производятся за один цикл сканирования. На чертеже представлено соймещенне скавограмм для получения Tpe6ye.ibtx параметров Сканограмма 1 от зкйща Mtutoroi размера itmMCbiBaet объект и включения в нем, а скано грамма 2 от зонда большего размера описывае только сам объект. Кривая 3 прпстшзляет собой сигнал для Подсчета коцгрйсшых включений и исключения участков oSiekta, занятых контрастными включениями, при определении оптнадской плдпгости.. Обработка резуяиат ведется следующим Ы}разом Сканограмма 2 пй1днима ется выше сканограм мы 1 так, что пересечение обеих CKiaiHorpaMM происходит на ПИКАХ, соответствующих контpacTHbiM включениям в объекте. Количество контрастных включений подсчитьгааётся счегтком по числу пересечений, а фотометрнровзнме самого объект произвбдвтся в tex местах ска нограммы 1, гйе нет пиков от контрастных включений. На фиг. I эти места отмечены точками. При фотометрнрова1Ю{И вь1числяется л6гарифм отношений амплитуды падающего Ф,, я прошедшего Ф световъ потоков. Пример реализации изобретения. Препарат с объектам и кош| астнымн вклю чениями в нем, например, радиоавтограф регенерирующей печени мьшш, окрашенной по Фел гену, устанавливается на предметнс столике оттического микроскопа, бканироваине объекта осуществляется пёремешешгем предметного столика микроскопа. П юизводатсЯ 1Фухз6ндовое сканирование объекта. Изображение объекта с контрастнымо включениями s (км проектируется в. плоскость кольцевого зеркала. Последнее разделяет световой потсж Яа два: один проходит через небольщое отверстие в центре, отраздается от зеркальной поверхности. Фотоэлектронные умно штели, регист|Я1руют оба светдвъге потока. Две сканограммь поступакгт ira длскриЯЯлатор, причем сканограмму от большого зонда поднимается выше сканограммы от малого зонда так, что пересечение обеих сканограмм происходило на пиках соответствующих контрастным включениям в объекте. Выделение с помощью дискриминатора импульсы, соответствующие контрастным включениям, подсчитывают счётчиком ЕСА-3. Для определения оптической плотности объекта используется интегрирующий вольтметр Ф 5007, на вход которого поступает скавограмма от малдго зонда, а выделенные с помощью дискриминатора импульсы, соответствующие контрастным включениям закрывают вход вольтметра на время, равное длительности этих импульсов. Оптическая плотность определяется как отношение полУченногр значения на интегрирующем вольтметре к количеству отсчетдв амплитуды, полученное с поМощью второгд счетчика ЕСА-3. Формула Изобретения Способ фотометрйрования,объектов, находящихся в оптически активной среде, содержз- щей контрастные включения, заключающийся в том, Что указанную смесь освещают параллельным пучком света и.сканируют полученное просветдое изображение с помощью зонда и фотоприемника, связанного с системой регистращш, о т л и ч а ю щ и и с я тем, что, с целью повь1щения точности определения числа контрастных включений и оптической плотности объекта, а также упрощения процесса измерений, используют одноволновьтй источник излучеш1Я, а сканирование ведут одновременно двумя кониентрическнмн зондами разного размера, затем сканограммь совмещают таким образом, чтобы их пер(гсечениё происходило на пиках, соответствующих контрастньтм включениям, находящимся в объекте или в среде над ним, полученный разностный сигнал одновременно испольэ5тот для подсчета контрастнь1х включений и исключения сигналов от контрастных включений при определении оптической плотности объекта. Источники информации, .принятые во внимание при экспертизе i. Авторское . аидетельство СССР № 257067, кл. G 02 В 2.1/00, 1968. 2. Папаян Г. В. и др. Одновременное определение вещества и интенсивности метки на окращеншх автографах .Цитология, 15, 9, с. 1184-1190, 1973 (прототип).