Проточная кювета для прижизненного анализа клеток под микроскопом Советский патент 1980 года по МПК C12K1/10 

1

Изобретение относится к технике , исследования биологических объектов под микроскопом,, а именно к устройствам для прижизненного анализа клеток в сравнении в условиях их куль- 5 тивирования.

Известна проточная кювета для анализа биологических объектов под микроскопом. Кювета представляет собой кольцевую камеру, которая помещается 10 на предметный столик микроскопа. В центре кюветы смонтированы два покровных стекла, разделенных кольцом из нержавекадей стали, через которое проходят штуцеры для подключения к ма- 15 гистрёши с клеточной суспензией l.

Однако такая кювета не обеспечивает изменения толщины препарата (среды с клетками) во время исследования прижизненных процессов разви- 20 тия клеток.

Известна кювета для исследования растворов под микроскопом с переменным зазором между стеклами. Кювета состоит из стального цилиндрического 25 корпуса, в центре которого вставлено стекло. Снизу в корпус через сальниковое устройство вставлен тубус с таким же стеклом на конце. Тубус передвигается в корпусе камеры па 30

резьбе при помощи маховичка, причем зазор между стеклами может меняться, что позволяет изменять толщину просматриваемого слоя жидкости 2 .

Недостаток указанной кюветы заключается в том, что она не отличается точностью, быстродействием и не обеспечивает стерильных условий для препарата.

Ближайшим техническим решением к изобретению является прюточная кювета для прижизненного ана.пиза клеток под микроскопом, включающая корпус с закрепленной в нем оправкой для покровного стекла, оправку пред(.«тного стекла, прикрепленную к корпусу при помощи гибкой мембраны с образованием меиоду корпусом и последней рабочей камеры, штуцеры для подвода и отвода исследуемой суспензии клеток, устройство для фиксации зазора между стеклами, содержащее вертикальные винты и механизм их перемещения

3.

Недостаток указанной кювети заключается в том, что введение четырех винтов во внутреннюю полость кюветы увеличивает поверхность нежелательного соприкосновения суспензии клеток с внутренней полостью кюветы, ухудшает стабильность и точность установки зазора, приводит к дополнительным погрешностям и ошибкам; механизм перемещения винтов не позволяет; производить смену объективов микроскопа во время нахождения кюветы на микроскопе ; настройка кюветы на заданную толщину, осуществляемая под угЛом по радиусу относительно винтов, вызывает перекос препаративных стекол в кювете, что снижает надежность работы кюветы, для настройки кюветы отсутствует отсчетное устройство.

Целью изобретения является обеспечение надежности работы, увеличение точности анализа и упрощение настройки на заданную величину зазора между стеклами.

Цель достигается тем, что предложенная кювета снабжена коНусообразHbtt.i стаканом, имеющим фланец с упором для вертикальных винтов, а оправка предметного стекла состоит из двух колец, расположенных одно в другом, причем внутреннее кольцо с предметным стеклом имеет регулировочные винты, расположенные в днище стакана для его юстировки и упрощения настройки на заданную величину зазора между стеклами, при этом винты размещены вне рабочей камеры и каждый механизм их перемещения содержит гайку-шестерню, насаженную на винт и имеющую резьбо.вое соединение с корпусом, и подвижную .шпонку, жестко связанную с винтом, а кювета снабжена шестерней с Ътсчетной шкалой, взаимодействующей с гайкамишестернями, и упорным кольцом с индексом-указателем, надетым на корпус .

На фиг.1 изображена проточная кю.вета, вид сверху; на фиг. 2 - разрез А.-А на фиг, 1.

Кювета (фиг.1,2) содержит корпус 1 с входным 2 и выходньц 3 штуцерами.

На корпусе установлены нагреватеный элемент 4, оправка 5 с покровны стеклом 6. Предметное стекло 7 в оправке 8, укрепленное регулировочным винтами 9 на конусообразном стакане 10, имеющем фланец с упорами 11 для винтов, подвешено к корпусу при помщи гибкой мембраны 12 (фиг.2). Межд корпусом и гибкой мембраной образуеся рабочая камера. На корпусе устанвлено устройство для фиксации зазор между стеклами, содержащее три верткальных винта 13. При этом винты 13 размещены вне рабочей камеры, а каждый механизм кх перемещения содержи гайку-шестерню 14, насаженную на указанный винт и имеющую резьбовое соединение с корпусом, подвижную шпонку 15, жестко связанную с винтом 13. При этом кювета снабжена .шестерней 16, которая взаимодействует с указанными выше гайкамит шестернями 14, и упорным кольцом

17 с индексом-указателем, надетым на корпус. На шестерне 16 расположена отсчетная шкала 18 (фиг.1,2).

Оправка 8 предметного стекла 7 состоит из двух колец 19 и 20, расположенных одна в другом, причем внутреннее кольцо 20 с предметным стеклом 7 имеет регулировочные винты 9, расположенные в днище стакана 10 для его юстировки и упрощения настройки

на заданную величину зазора между стеклами.

Кювета работает следующим образом. Через входной штуцер 2 в рабочую камеру кюветы под избыточным давлениf ем поступает исследуемая культуральная жидкость. Под воздействием давления гибкая мембрана 12 прогибается, пред.метное стекло 7 в оправке 8 с конусообразным стаканом 10 и упорами 11 для винтов опускается вниз.При

этом между стеклами устанавливается максимальный зазор и создаются благоприятные условия для смены исследуемой культуральной жидкости, которая вытекает через выходной штуцер 3.

5 Для прижизненного анализа клеток под микроскопом препаратные стекла сближают до получения минимальных зазоров (1-2 мкм) следующим образом. Создают в рабочей камере кюветы разQ режение (например, при помощи пальчикового насоса, на чертеже не показан), и покровные стекла сближают до тех пор, пока упоры 11 пе соприкоснутся с вертикальным винтом 13. Установка

J требуемого зазора осуществляется путем поворота шестерни 16 относительно упорного кольца 17 на величину, указываемую на отсчетной шкале 18. При этом вращение от шестерни 16 передается на гайку-шестерню 14, ко торая передает движение вертикальным винтам 13. Подвижные шпонки 15, жестко связанные с вертикальными винтами 13, преобразуют вращательное движение гайки-шестерни 14 в поступате5 лыюе перемещение вертикальных винтов 13. Поступательное перемещение происходит благодаря разности величин шагов резьбовых пар гайки-шестерни 14 и вертикальных винтов 13.

O Одновременное перемещение трех винтов 13 при помощи шестерни 16 обеспечивает при установке зазора параллельное перемещение предметного стекла 7 относительно покровного стекла 6. Предварительная установка параллельности препаративных стекол осуществляется путем перемещения оправки 8 предметного стекла 7 при помощи регулировочных винтов 9. Снабжение кюветы конусообразным

0 стаканом, имеющим фланец с упораиии для винтов, и выполнение оправки предметного стекла из двух колец, расположенных одно в другом (причем внутреннее кольцо с предментым стеклом имеет peгyлиpoвoчнLзe винты.

расположенные в днище стакана для его юстировки и упрощения настройкина заданную величину зазора между стеклом, при этом винты размещены вне рабочей кс1меры и каждый механиз их перемещения содержит гайку-шестеню, посаженную на винт и имеющую резьбовое соединение с корпусом,подвижную шпонку, жестко связанную с винтом) , а также снабжение кюветы шестерней с отсчетной шкалой, взаимодействующей с гайка1 1и-шестернями, и упорным кольцом.с индексом-указателем, надетымна корпус, обеспечивает следующие преимущества:

стабильность установки зазора при длительном использовании кюветы в биологическом эксперименте;

уменьшение опасности зарастания поверхности препаративных стекол;

увеличение времени проведения биологических экспериментов;

улучшение равномерности распределения клеток в поле зрения микроскопа;

упрощение настройки кюветы на заданную толщину;

возможность смены объективов микроскопа.

Таким образом, применение кюветы увеличивает точность и надежность прижизненного анализа клеток.

Формула изобретения

Проточная кювета для прижизненного анализа клеток под микроскопом включающая корпус с закрепленной в нем оправкой для покровного стекла, оправку предметного стекла, прикре.пленную к корпусу при помощи гибкой

мембраны с образованием между корпусом и последней рабочей камеры, штуцеры для подвода и отвода исследуемой суспензии клеток, устройство для фиксации зазора между стеклами, содержащее вертикальные винты и механизм их перемещения, отличающаяся тем, что, с целью обеспечения надежности работы, увеличения точности анализа и упрощения настройки на заданную величину зазора между стекла10

ми, кювета снабжена конусообразным стаканом, имеющим фланец с упорами для вертикальных винтов, а оправка предметного стекла состоит из двух колец, расположенных одно в другом,

15 причем внутреннее кольцо с предметным стеклом имеет регулировочные винты, расположенньй в днище стакана для его юстировки, при этом вертикальные винты размещены вне рабочей

0 камеры и каходый механизм их перемещения содержит гайку-шестерню, посаженную на винт и имеющую резьбовое соединение с корпусом, подвижную шпонку, жестко связанную с винтом, а кювета снабжена шестерней с отсчетной шкалой, взаимодействующей с гайками-шестернями, и упорным кольцом с индексом-указателем, надетым на корпус.

0 Источники информации,

принятые во внимание при экспертизе

1.Авторское свидетельство СССР 248900, кл. С 12 К 9/СН), 1967.

2.Авторское свидетельство СССР 5 I 101397, кл. G 02 В 21/34, 1953.

3.Кошевой Ю.В., Лежнев Э.И.,Макарова О.П. Прижизненная морфометрия

- клеток. М., Наука, 1977, с.95-99.

/ . ... I.,

и t , .

771157

Ч- 15 0 A -A 5 W I I 7 1 / ,5 Ч иг. г n