Камера для одновременных микро-СКОпичЕСКиХ и элЕКТРОфизиОлОгичЕСКиХиССлЕдОВАНий пРЕпАРАТОВ жиВыХ ТКАНЕйи КлЕТОК Советский патент 1981 года по МПК C12M1/00 

. . 1 . ij .o

При использовании известной камеры для работы под большими увеличениями микроскопа обнаруживается также ряд конструктивных ее недостатков и неудобств в эксплуатации. Покровное стекло, служащее дном камеры, тонкое и хрупкое. Оно часто давится снизу при контакте с металлическими частями столика микроскопа или сверху при незначительной перефокусировке большого объектива. Смена препарата во время работы требует извлечения из-под микроскопа всей камеры, что нарушает трудоемкую настройку системы протока, внешние электрические контакты и т. д. Кроме того, наличие ферромагнитных намагниченных материалов в конструкции камеры влияет на электрические свойства препарата и искажает измеряемые параметры.

Цель изобретения - расширение функциональных возможностей камеры за счет дифф.е ендиальной диагностики морфоэлектрофизйологического состояния всех компонентов нервного проведения: мякотного волокна, пресинаптических терминалеи и постсинапса.

Указанная цель достигается тем, что камера снабжена дополнительными, по крайней мере двумя, макроэлектродами, при этом последние выполнены двухствольными и размещены по окружности отверстия на шаровидных опорах, выполненных из пластичного, вязкого и теплостойкого вещества, а приспособление для крепления препарата представляет собой размещенную на дне камеры плоскую рамку с укрепленными перпендикулярно ее горизонтальной поверхности фиксаторами и имеет направляющие для введения внешнего электрода, входное отверстие канала отсоса расположено выше выходного отверстия канала подачи, при этом оба канала снабжены фитилями. Кроме того, рамка выполнена из органического стекла, а фиксаторы из вольфрама.

На фиг. 1 изображен общий вид камеры; на фиг. 2 - общий вид приспособления для крепления препарата; на фиг. 3 - разрез А-А фиг. 2.

Камера имеет стеклянное тонкое дно 1 и ножки-упоры 2. Стекло с помощью амортизирующей прослойки 3 из полимеризующейся пасты типа КЛ-16Т-30 прикреплено к корпусу 4 из оргстекла с отверстием конической формы, образующим вместе с дном 1 емкость камеры для физиологического раствора. Края камеры выполнены пологими. Приспособление 5 для крепления препарата выполнено в виде кольца из оргстекла, в нем по окружности укреплены фиксаторы 6, представляющие собой вольфрамовые штырьки с заостренными концами, часть из которых загнута в виде крючков. В прорезях корпуса 4 размещены каналы подачи 7 и отсоса 8 физиологического раствора, выполненные Из инъекционных игл, снабжены фитилями 9, опущейными в емкость камеры. Фитили могут быть выполнены из фильтровальной бумаги или хлопчатобумажной нитки. Выходное отверстие канала отсоса 8 размещено выше выходного отверстия канала подачи 7 для обеспечения определенного уровня (глубины) раствора в резервуаре. По окружности камеры закреплен кольцевой индиффирентный электрод 10 из платины или хлорированного серебра. Приспособление 5 для крепления препарата крепится к диу 1 емкости с помощью комочка вязкой пластичной массы.

Двухствольные коаксиальные всасывающие макроэлектроды 11 размещены (опираются в точке) с возможностью перемещения на шаровых опорах 12 из вязкой

пластичной массы диаметром 4-8 мм. Масса сохраняет свои свойства и форму при температуре нагревания осветителя.

Проводники от всех электродов сходятся на специальной пластине из оргстекла (на

чертежах не показаны), которая крепится над основной пластиной корпуса 4 с целью гидроизоляции контактов от емкости камеры. Пластина служит платой, внутрь которой заделываются розетки для пяти-

семи разъемов.

Камера работает следующим образом. Препарат закрепляют на приспособлении 5 для крепления препарата под вспомогательным бинокулярным микроскопом (типа

МБС), который может быть отдельным или закреплен вблизи основного инвертированного микроскопа и сфокусирован на его столик. Вначале при средних увеличениях препарат ориентируют в рамке. Затем под

объективом 4 его закрепляют на штырьках и крючках фиксатора 6. После этого приспособление 5 для крепления препарата переворачивают и укладывают в резервуаре камеры так, чтобы препарат оказался

внизу и прилегал к дну камеры.

Включают проточную систему. Изменяя высоту стояния входного отверстия отсасывающей иглы, регулируют уровень жидкости в камере. Смоченные фитили 9 касаются поверхности жидкости. Перемещают кончики подвижных всасывающих двуствольных коаксиальных макроэлектродов 11 (контролируя через лупу) к нужным нервным волокнам. Электроды через колодку камеры подключают к стимулятору и анализирующей электронной аппаратуре.

Затем камеру вместе со столиком микроскопа перемещают, чтобы центрировать необходимый участок объекта (нейрона) в фокусе микроскопа. Далее в камеру подводят внешний стеклянный микроэлектрод (на чертежах не показан), который был заранее центрирован в фокус микроскопа и

отведен с помощью микроманипулятора на