Камера для микроскопических и электрофизиологических исследований клеток Советский патент 1983 года по МПК C12M1/00 

t

ы

ks9 F Изобретение относится к области б ологии и медицины, точнее к технике микроскопических и -электрофизиологических исследований реакций клеток на различные фармакологические или биологичеоки,; активные вещества. Известно устройство для микроскопических, и электрофизиологических исследований, содержащее камеру ,и микроэлектродыС J. , Известна камера для микроскопичес ких и электрофизиологических исследо ваний клеток, содержащая каналы для .подачи и отсоса питательной среди, сообщенные с приспособлением для подачи и отсоса питательной средыС2. Недостатком известного устройства является то, что некоторые его конструктивные особенности затрудняют, а в ряде случаев исключают прове дение лектрофизиологических исследо ваний препаратов клеток, выращенных в культуре тканей. Так, например, с noMOiUbH) фитилей нельзя достичь равно мерных по объему подачи и отсоса рас воров, кроме того, через них будут диффундировать фармакологические вещества, оказывая нежелательный эффект на исследуемые клетки, сводя на нет результаты эксперимента. Располо сение входного отверстия канала отcoca вьиие выходного отверстия к аи ала подачи ведет к нарушению чистоты подаваемых растворов и. следователь, но, снижает качество проводимых исследований вследствие того, что применяемые фармакологические вещества берконтрольно проникают в исследуемую среду. Цель- изобретения - повышение качества исследований и расширение границ эксперимента за счет сохраненкя стабильности уровня питател ;ной среды. Указанная цель достигается тем, что в камере для микроскопических и электрофизиологи еских исследоваНИИ клеток,содержащей канашы для подачи и отсоса питательной средУ, сообщенные с приспосрблением для подачи и отсоса питательной среды. приспособление для подачи и отсоса /питательной среды содержит два подающих: поршневых насоса одинаковой про изводительности, отсасывающий порш.невой насос и микровинт для обеспечения синхронности работы насосов, .каналы для подачи и отсоса питательной среды имеют одинаковые сечения, а каналы для подачи питательной сред расположены в мае канала для отсоса питательной среды. На чертеже изображена камера для микроскопических и электрофизиологических исследований, общий вид. . Камера 1. выполнена из плексиглаза :и содержит покровное стекло 2, патрубки 3,4 и 5, микровинт б, соединен ный с приводом 7 посредством редуктора 8 и муфт 9 и 10, разжимную гайку 11, переключатель смены растворов 12 с фиксаторами 13 и 14, поршневые насосы .15,16 и 17, соединенные с патрубками 3,4 и 5 посредством силиконовыхОтрубок 18,19.и 20. Поршень насоса 17 соединен с разжимной гайкой 11 через поводок 21, Устройство готовят к работе следующим образом. В камеру помещают подложку с прикрепившимися в ней в процессе поста клетками выращенными в культуре тка ней, затем камеру устанавливают.на нагревательном столике инвертированного микроскопа, снабженного фото регистратором. После этого подающий поршневой насос 15, сзиликоновую трубку 18, перфузируемую к.амеру, силиконовую трубку 20 отсасывающего поршневого насоса 17 заполняют необходимым раствором. Поршневой насос 16 и силит коновую трубку 19 заполняют раствором, содержащим вещества, воздействие которых на препарат изучают. Включают привод 7, который передает вращение микровинту б, приводящему в поступательное движение разжимную гайку 11, устанавливающуюся в любо:1 точке рабочей Области микровинта б. Под деиствием поршневого насоса 15 раствор поступает в перфузируемую камеру через патрубок 3, а через патрубок 5 раствор принудительно отсасывается из перфузируемой камеры пораневым насосом 17. Для смены рас ворбв включают фиксатор 14 переклю телем 16 и выключают фиксатор 13, освобождающий шток поршневого насоса 15, и наоборот. Патрубки 3 и 4 расположены Воше- патрубка 5, что предотвращает диффузию сменных растворов. Так как поршневые насосы 15 и 17 приводятся в действие посредством одного микровинта б, а сечения поршневых насосов 15, 16.и 17 равны, то уровень раствора/в перфузКРУемой камере остается постоянным. После включения протока питательной среды приступают к проведению эксперимента, в процессе которого может осуществляться одновременно фотографирование и изучение электрофизиологичсских свойств ; клеток с по-i мощью подведенного гидромеханическим манипулятором тонкого стеклянного Микроэлектрода и реакция клеток на действие биологически активных ве- . ществ, Уровень раствора в перфуэируемо.. камере должен оставаться постоянным вследствие того, что клетки очень малы и работать с ними возможно тольКО чрезвычайно больших увелич1в,ниях,а малейшие колебания уровня приводят к расфокусировке оптической системы кшкроскопа. и проведение исследований становится невозможным.

Предлагаемое устройство по сравнению с известн|Д 1 расширяет границы проводимых экспериментов, повЕФюет .качество исследований в биологии, фармакологии и медицине.

КАМЕРА ДЛЯ МИКРОСКОПИЧЕСЖИХ И ЭЖКТРОФИЗИОЛОГИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ iOIETOi, содержащая каналы для подачи и отсоса питательной , сообщённые С приспособлением для подачи и отсоса питательной среды, от л ич а ю щ аоя с я тем. что. с целью повышения качества исследований и расширения границ эксперимента за счет поддержания стабильного уровня питательной среды в камере, приспособление для подачи и отсоса питательной среды содержит два подакн101х поршневых насоса одинаковой производительности, отсасывающий поршневой насос и микровинт для обеспечения синхронности работы насосов, при этом каналы для подачи и отсоса питательной среды имеют одинаковые сечения, и каналы ,., для подачи питательной среды .располо-щ жены выше канала для отсоса питательг ;ной среды.