Способ диагностики рожистогоВОСпАлЕНия Советский патент 1981 года по МПК G01N33/48 

(54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ РОЖИСТОГО ВОСПАЛЕНИЯ

1

Изобретение относится к медицине и может бь1ть использовано для диагностики рожи с другими формами неспецифических воспалений кожи.

Известен способ диагностики рожистого воспаления путем микроскопического исследования срезов биоптата кожи 1.

Однако этот способ не обеспечивает дифференциальной диагностики рожистого воспаления от других форм неспецифического воспаления.

Цель изобретения - дифференциальная диагностика рожистого воспаления от других форм неспецифического воспаления.

Эта цель достигается тем, что срезы кожи перед микроскопированием обрабатывают меченым антииммуноглобулином G и при наличии свечения в базальном слое эпидермиса кожи диагносцируют рожистое воспаление, а при отсутствии свечения диагностируют неспецифическое воспаление.

Способ осуществляют следующим образом.

У больного под местной анестезией (например, хлористым этилом) берут биоптат кожи малого размера. Без фиксации в криостате при 30°С делаю т срезы толщиной 5 мкм, которые помешают на предметное стекло и подсушивают на воздухе 30 мин. Затем срезы промывают в изотоническом буферном растворе хлорида натрия (рН 7,27,4) и обрабатывают меченым (например, флюоресцентным красителем) антииммуноглобуленом G, полученным при иммунизации млекопитающего (например, .кролика). Обработку проводят при 18°-20°С в течение 45 мин в условиях влажной камеры.

fO Далее срезы снова промывают в изотоническом растворе хлорида натрия (рН 7,2-7,) и на них наносят Ю /о-ный раствор глицерина рН 7,2-7,4 и накрывают покровными стеклами. Препараты просматривают в микроскопе, например люминесцентном и при

tS выявлении связанного с базальным слоем эпидермиса иммуноглобулина G диагносцируют рожу. При его отсутствии ставят диагноз неспецифического воспаления.

Кроме флюоресцентной метки возможно использование антител к иммуноглобулену

20 G, меченных другими способами, например ферментами. Тогда препарат исследуют после специфической реакции, направленной на выявление метки, например, после гистохимической и исследование проводят в световом микроскопе.

Пример 1. Больной К-, 29 лет, поступил в приемник инфекционного отделения с подозрением на рожистое воспаление. Клинически дифференциальный диагноз был невозможет, возникло подозрение об инфильтрате.

В области эритемы участок кожи обрабатывают Б /О-НЫМ раствором йода, под местной анестезией хлористым этилом берут биоптат кожи размером 2x5. мм и накладывают асептическую повязку. Из биоптата без предварительной фиксации после его замораживания в криостате при 30°С готовят срезы кожи толщиной 5 мкм, которые помещают на предметное стекло и подсущивают на воздухе 30 мин. Затем срезы промывают в изотоническом растворе хлорида натрия (рН 7,2-7,4) и наносат ; 1 аЛих кроличий антииммуноглобулин G, меченный изотиоцианатом феноресцеинач-ЛС езы с сйвороткой инкубируют 45 мин вр влажной камере при 18-20°С. Safelv tix промывают в изотоническом растворе х;ЛУ:рида натрия рН.7,2-7,4, на срезы наносят 0,1 мл Ю /о-ного раствора глицерина рН 7,2-7,4 и накрывают покровными стеклами. Полученный препарат изучают под микроскопом в ультрафиолетовом свете. Свечение базального слоя эпидермиса отсутствует. Диагноз рожи снят. Больной направлен в хирургическое отделение с диагнозом инфильтрат.

Пример 2. Больной Н., 45 лет, клинически не удалось провести дифференциальный диагноз между рецидивом рожистого воспаления и обострением хронического тромбофлебита.

В области эритемы участок кожи обработан 5%-ным раствором йода и замораживают хлорэтилом, берут биоптат кожи размером 1x3 мм, накладывают асептическую повязку. Из биоптата без предварительной фиксации после его замораживания в криостате готовят срезы кожи толщиной

5 мкм,накладывают их на предметное стекло и подсушивают на воздухе 30 мин.

Срезы на предметном стекле промывают 5 мин в изотоническом растворе хлорида натрия (рН 7,2-7,4), сущат, наносят на

них кроличий антииммуноглобулен G, инкубируют во влажной камере при 18-20°С в течение 45 мин. Затем срезы дважды промывают в изотоническом растворе хлорида натрия,. рН 7,2-7,4, сушат и на них наносят 0,1 мл 10°/о-ного раствора глицерина рН 7,2-7,4, накрывают покровными стеклами.

Полученный препарат изучают под микро скопом в ультрафиолетовом свете. Выявлено свечение базального слоя кожи, что позволяет диагносцировать рецидивирующую рожу.

Предлагаемый способ позволяет быстро и точно провести дифференциальную диагностику рожистого воспаления от других форм неспецифического воспаления (в 99,

случаев) и назначить правильное лечение.

Формула изобретения

Способ диагностики рожистого воспаления путем микроскопического исследования срезов биоптата кожи, отличающийся тем, что, с целью дифференциальной диагностики рожистого воспаления от других форм неспецифического воспаления, срезы кожи перед микроскопированием обрабатывают меченым антииммуноглобулином G и при наличии свечения в базальном слое эпидермиса кожи диагносцируют рожистое воспаление, а при отсутствии свечения диагносцируют неспецифическое воспаление.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе 1. Гальперин Э. П.Рыскинд Р. Р. Рожа. М.,„МедицинаГ 1976, с. 28--31.