Способ антенатальной диагностики гипотрофии плода Советский патент 1982 года по МПК A61B10/00 G01N33/48 

(54) СПСЮОБ АНТЕНАТАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКИ ГИПОТРОФИИ ПЛОДА

1

Изобретение относится к медицине, а именно к перинатологии, и может быть использовано для диагностики гипотрофии плода.

Известен способ антенатальной диагностики гипотрофии плода путем определения концентрации фосфолипидов в биологическом материале 1 j .

Однако при использобанки известного способа не достигается полная безопасность, и диагностическая точность, его трудно осуществлять в ранние сроки беременности, что существенно ограничивает применение данного способа диагностики, особенно в амбулаторных условиях.

Целью изобретения является повышение точности и снижение травматичности способа диагностики гипотрофии плода.

Указанная цель достигается тем, что при осуществлении способа антенатальной диагностики гипотрофии плода путем определения концентрации фосфолипидов в биологическом материале определение концентрации фосфол1шидов проводят в мембранах эритроцитов венозной крови беременной женщины и по величине концентрации суммарных фосфолипидов и коэффициента фосфатидилхолин (сфингомиелин диагностируют внутриутробную гипотрофию плода.

Способ осуществляют следующим образом.

Утром натощак из кубитальной вены беременной женщины путем венепункции забирают кровь в объеме 2,0 мл и смещивают ее с 0,2 мл Б%-ного раствора цит рата натрия. Плазму отделяют от эритроцитов путем центрифугирования при 1500 об/мин в течение 10 мин. Плазму удаляют, а эритроциты промывают физиологическим раствором в объеме 10 мл, а затем гемолизируют дистиллированной водой. Из гемолизата эритроцитов готовят липидные экстракты по методу Блюра (0,2 мл гемопизата + 4,0 мл спирто-эфирной смеси в соотношении 3 : 1 с последутощей фильтрацией через бумажный фильтр. 3971 Липидные экстракты вьтаривают до сухог остатка и подвергают тонкосшойной хрома тографии на пластинах с силикагепем КСК в системе: хлороформ-метанол-25%аммиа вода в соотношении 30:9:1:0,4. После хроматографии для про$тления пятен фосфолипидов пластины опрыскш ают 2%-ным раствором фосфорно-молибдеиовой кислоты и помещают в термостат при температуре . Пятна фосфолипидов элюируют этиловым спиртом и окрашенные растворы фотометрируют на фотоэлектроколориметре при красном светофильтре. Расчет кониент рации фосфолипидов производят по калибро , войной кривой, построенной по лецитину (фосфатидилхолину) и расчетной формуле, К-2. где К концентрация фосфолипидов, иг/ на 1-млн эритроцитов; а - количество фосфолипидов, мкг, найденных по калибровочной кривой9 - число эритроцитов, млн в 1 мм; 10 -коэффициент для перерасчета, нг. Содержание фосфолипидов в мембранах эритроцитов у здоровых матерей, родивших здоровых . доношенных детей (М +м представлено в табл. Концентрация фос- Фракции фосфолипидов фолипидов,нг на 1 млн эритроцитов 197,19 + 4,74 Обшие фосфолипиды 22,65 ± 2,39 Сфингомиелин Фосфатидилхолин (лецитин).. 103,63 t 8,18 Коэффициент фосфат 4,57 идилхопин/сфюсгомиепин. Пример 1. П. А. П., 34 года. Ёеременвость протекала с нефрютатией Л степени, которая установлена в сроке 21 недели и в последующей стойко держалась, несмотря на лечение, вплоть до родов. На сроке в 25 недель с целью диагностнкЕ возможной гнпогрофни плода у беременной женщины в амбулаторных ус ловиях произведен забор крови t целью определенна коншнтрашш фосфолипидов в мембранах эритроцитов. Получены0.спедукпше результаты: содержание обпшх фосфодгштщов 156,5 нг/млн эритроиитов, сфингомиелнна 22,4 нг/млн эритроцитов, фосфатндилхолвба 8О,8 нг/млн эритроци.4 тов, коэффициент фосфатидилхопина/сфингомиелина 3,60. На основании этих показателей был поставлен диагноз гипотрофии плода. Роды произошли на сроке беременности 39 недель без особенностей. Родилась девочка, масса тела 27ОО, длина тела 52 см, оценка по шкале. Апгар 8 баллов. На основании клинических симптомов (уменьшение массы тела 20%, снижение коэффициента масса тела-роста до 53, уменьшение толшины подкожножирового слоя, дистрофических изменений кожи) поставлен диагноз : внутриутробная гипотрофия 5 степени. Пример 2. И.Л. А., 24 года. На сроке беременности 23 недели отмечалась угроза невынашивания беременности. На сроке 30 недель поставлен диагноз не(| ропатии I степени. На сроке беременности 34 недели проведено определение концентрации фосфолипидов в мембранах эритроцитов венозной крови беременной женшины. Получены следующие результаты : содержание общих фосфолипидов 158,4 нг/ /млн эритроцитов, сфингомиелина 22,8нг/ /млн эритроцитов, фосфатидилхоЯина 82,2 нг/млн эритроцитов, коэффициент фосфатидилхолин/сфингомиелин 3,59. На основании проведенных исследований поставлен диагноз внутриутробной гипотро(}яи плода. Роды на 39 неделе беременноети без особенностей. Родилась девочка, масса тела 26ОО, рост 5О см, оценка по шкале Апгар 8 баллов. На основании клинических данных уменьшение массы тела, снижение коэффициента масса теларост до 52, уменьшение толшины подкожно-жирового слоя, дистрофических изменений кожи) поставлен диагноз : внутриутробная гипотрофия ТГ степени. П р и м е р NO 3. В.Т. П., 25 лет, с 9 недели беременности и на протяжении всей первой половины беременности отмечался токсикоз. С 20 недели беременности - водянка, с 27 недели беременности и до родов - нефропатия степени. В срок беременности ЗО недель проведено определение концентрации фосфолипкдов в венозной крови (в мембранах эритроцитов). Получены следующие результаты: содержание общих фосфолипидов - 150 нг/млн эритроцитов, сфинго миелина 21,5нг/млв эритроштов, фосфат.шшлхолина 77,9 нг/млн эритроцитов, коэффициент фосфатндилхолин/сфингомиелин 3,62. На основании полученных результатов поставлен диагноз внутриутробной гипотрофии плода. Роды в срок 39 недель. протекали без патологии. Родилась девочка, масса тела 265О, рост 51 см, оценка по шкале Апгар - 8 баллов. На основа нии клинических симптомов поставлен диаг ноз : внутриутробная гипотрофия Ц степени Данным способом проведена диагностика внутриутробной гипотрофии плода у 80 беременных женшин, у которых на основании совокупности клинических данных предполагалось развитие гипотрофии плода У 78 из них на основании определения концентрации фосфолипидов в мембранах эритроцитов была диагностирована гипотрофия плода до рождения ребенка. После рождения, клинического осмотра и обследования диагноз внутриутробной гипотрофии подтвержден у 76 детей. Таким образом, использование предлагаемого способа для диагностики внутриутробной гипотрофии плода позволяет с пол-. ной безопасностью для плода и беременной . женщины в амбулаторных условиях диагностировать развивающуюся гипотрофию плода на ранних сроках беременности и в оптимальные сроки провести конкурс профилактической терапии. Формула изобретения Способ антенатальной диагностики гипотрофии плода путем определения концент рмции фосфолипидов в биологическом материале, отличающийся тем, что, с целью повышения точности и снижения травматичноети способа, определение концентрации фосфолипидов проводят в мембранах эритроцитов венозной крови беременной женщины, и по величине концентрации суммарных фосфолипвдов и коэффициента фосфатидилхолин/сфингомиелин диагностируют внутриутробную гипотрофию плода. Источники информации, принятые во внимание при экспертизе 1. Михайлова Н.П., Грундуль А. М., Волков В. С. Клиническое значение определения фосфолипидов в амниотической жидкости. - Акущерство и гинекология , 1978, № 9, с. 21- 24 (прототип).