Устройство для электрофореза на вертикальной пластине геля Советский патент 1983 года по МПК G01N27/26 

Изобретение относится к лабораторной технике, в частности к устройствам для электрофореза на вертикальной пластине геля, и может быть использовано в биологии и медицине. .

Известны устройства для вертикального электрофореза, содержащие верхний к нижний сосуды для буферных растворов с электродами, вертикальную камеру для пластины геля, сообщающую,ся с упомянутыми сосудами, систему охлаждения геля Cl.

Наиболее близким к пpeдлaгaeмo Iy является устройство для электрофореза на вертикальной пластине геля/ содержащее верхний и нижний сосуды для буферного раствора,сообшающиеся-с указанными сосудами две вертикальные гелевые камеры, блок охлаждения камер. Нижний сосуд представляет прямоугольной формы ящик, внутри которого установлен прямоугольной формы сборный внутренний блок, состоящий из верхнего сосуда для буферного раствора,размешенного над блоком охлаждения геля и двух камер для геля со съемными наружными стенками. Нижняя часть гелевых камер герметизируется съемным затвором, предотвращающим утечку гелеобразуюшей жидкости. В сосудах для

буферных растворов расположены платиновые электр ода|. Стартовые лунки формируются в верхнем, крае пластин геля с помощью штампов в.виде гребня,пог

5 ружаемых в гелеобразуюЬтй раствор и удаляемых после полимеризации геляС2},

Недостатком известного устройства является то, что он позволяет работать только на полиакрнламидном геле

10 и не приспособлен для работы с гелями, . обладающими малой механической прочностью, например с крахмальным гелем, деформирующимся под действием гидростатического давления,,создаваемого 15 буферным раствором. Цель изобретения - расширение, функциональных возможностей устройства путем обеспечения работы на гелях с различной механической прочностью.

20 Цель достигается тем, что в устройстве для электрофореза на вертикальной пластине геля, содержащем верхний и нижний сосуды для буферного раствора, сообщающиеся с указанными

25 сосудёиии две вертикальные гелевые камеры, блок охлаждения камер, наружные стенки гелевых камер снабжены закрывающимся горизонтально расположенным щелевым отверстием,а верхний сосуд для

30 буферного раствора снабжен съемным вкладышем, установленным с зазором относительно его боковых стенок. При этом горизонтальное щелевое отверстие при помощи прижимного приспособления закрыто планкой с уплотнителем и выступом, размеры которого соответствуют размерам указанного щелевого отверстия. Сущность предлагаемого изобретения состоит в том, что стабильность положения геля в гелевых камерах достигается с помощью гелевых мостиков П-образной фор1«йа между верхним сосудом для буферного раствора и полостью гелевой камеры, образующихся при заливке, и полимеризации гeлeoбpaзyющeг раствора в зазоре между вкладьпием и боковыми стенками указанного верхнег сосуда и полостью гелевой камеры. При таком выполнении гелевого мостика ввод проб осуществляется чере горизонтальное щелевое отверстие наружных стенок гелевых камер. Подобно расположение отверстия для ввода про кроме того, позволяет производить од новременный анализ разноименно заряженных частиц. На фиг. 1 изображено устройство для электрофореза на вертикальной пластине геля, общий вид; на фиг.2 - часть устройства, состоящая из верхнего сосуда для буферного раствора, гелевых камер и блока охлаждения камер, разрез; на фиг. 3 - то же, вид ,со стороны щелевых отверстий; на фиг. 4 - то же, вид сверху. Устройство состоит из нижнего .сосуда для буферного раствора 1, выполненного Е виде прямоугольной камеры, в которой на подставках 2 установлена внутренняя часть 3 устройства,состоящая из верхнего сосуда для буферного раствора 4 ( фиг. 2), гелевых камер 5 блока охлаждения камер б, боковые стенки 7 которого, выполненные из стекла, служат внутренними стенками гелевым камерам 5. Наружные стенки 8 гелевых камер могут быть выполнены как из стекла, так и из плексигласаi Они имеют горизонтальные щелевые отверстия 9 ( фиг. 3), закрытые во время работы планками 10 с уплотнителем ,11 с помощью прижимного приспособления 12 (фиг.3).В углублениях 13 и 14 (фиг.2) дна верхнего буферного сосуда 4и дна блок а охлаждения гелевых камер 6 с его наружной стороны разложены платиновые электроды. Дно гелевых камер 5герметизируется с помоыью прокладок 15 и поджимной пластины 16 с помощью, например,винтов 17.В торцовых стенках блока охлаждения 6 гелевых камер имеются штуцера 18 (фиг.З) для ввода и вывода хладагента и токопод.вод 19. Прокладка 20 (фиг. 4) задает толщину полостей гелевых камер 5. Наружные съемные стенки 8 гелевых камер для прочности снабжены планками 21 (фиг. 2), поджимаемыми с , например, винтов 22. Верхний сосуд для буферного раствора снабжён .съемным вкладышем 23, а его боковые стенки со стороны гелевых камер 5 имеют прямоугольный вырез - понижение 24 по ширине гелевых камер 5. Устройство работает следующим образом. В зависимости от способа формирования стартовых лунок в гелях (с помощью полимеризации или прорезания) горизонтальное щелевое отверстие 9 закрывается планкой 10, либо имеющей Титамп в виде гребешка, либо без .неге, при необходимости исследования материала в крахмальном агарозном или в однородном по пористости полиакриламидном гелях гелеобрызующая жидкость заливается в вертикальные гелевые камеры 5 до уровня верхней плоскости вкладыиа 23 и полимеризуется.Ёсли необходимо исследовать материал в полиакриламидном геле с различным градиентом пористости гелеобразующая жиджость заливается в вертикальные гелевые камеры 5 на 1,0.-1,5 см ниже уровня окна щелевого отверстия 9 с последующим наслоением воды на поверхность гелеойразующей жидкости. После полимеризации сепарирующего гешя гелеобразующая жидкость,формирующая концентрирующий гель, заливается до уровня верхней плоскости вкладыша 23 и полимеризуется. После окончания полимеризации геля вкладыш 23 удгшяется. Нанесение материала для анализа производится через щелевое отверстие 9. В сформированные стартовы з щели вносятся одинаковые по размерам кусочки бумаги,например типа ватман ЗММ, пропитанные исследуемым мате)эисшом. Для визуальной оценки электрофоретического процесса в стартовые Щэли помещают кусочки бумаги, смоченные индикаторным красителем. После закрытия щелевого отверстия 9 планкой 10 и прижимным устройством 12 внутреннюю часть 3 устройства помещают на подставки 2 нижнего сосуда 1 для буферного раствора. Заливают буферные растворы,к штуцерам 18 присоединяют ланги для подачи и отвода охлаждаюей жидкости, а токоподвод соединяют с источником питания (we показан). Режим фракционирования высокомолекулярных соединений зависит от бида используемого геля и характера исследуемого материсша. После окончания электрофоретического разделения отключают источник питания, прекращают подачу охлаждающей жидкости, выливают буферный раствор из верхнего со.суда и удаляют съемные стенки 8. Пластины геля вынимают и подвергают

дальнейшей обработке по известной методике .

иредлагаемый прибор обеспечивает электрофоретическое разделение высокомолекулярных соединений, например сывороточных белков и эрйтроцитарных ферментов, в таких гелях как крахмальный ,агарозный и полиакриламидный, и дает возможность одновременного разделения катионных и анионных компонентов исследуемого материала.

Предлагаемое устройство универсально и может найти ошрокое использование в биологии и медицине.

Формула изобретения.

1. Устройство для электрофореза на вертикё1льной пластине геля, содержгицее верхний и нижний сосуды для буферного раствора, сообщающиеся с указанными сосудами две вертикальные гелевые камеры, блок охлаждения камер, отличающееся тем.

что,с целью расширения функциональных возможностей устройства путем обеспечения работ на гелях с различной механической прочностью, наружные стенки гелевых камер в итолнены с

5 закрывакхцимся; хчзризонтально расположенным щелевым отверстием, а верхний 9осуд для буферного раствора снабжен съемным вкладышем, установленным с зазором относительно его боковых сте10 нок.

2.Устройство по П.1, о т л и ч а ю щ е .е с я тем, что горизонтальное щелевое отверстие при помощи прижимного приспособлениязакрыто план15 кой с уплотнителем и выступе, размеры которого соответствуют размерам указанного щелевого отверстия.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе 20 1. Маурер Г, Диск - электрофорез. М., мир, 1971, с. 50-51.

2. Патент США 3932265,кл.204,/299 1976.

//

/7