Изобретение относится к анализу белковых смесей, а именно к приборам для вертикального электрофореза белков в ге- левых пластинах.
Целью изобретения является более рав- номерное и полное фракционирование белков и повышение тем самым разрешающей способности и качества электрофореграм- мы.
На фиг. 1 изображен предлагаемый при- бор, продольный разрез; на фиг. 2 - то же, в разобранном виде, в аксонометрии; на фиг. 3 - ячейки с рамкой.
Прибор содержит камеру 1 с крышкой 2, два электрода 3 и А и размещенные в камере 1 ячейки 5 для геля, образованные двумя плоскопараллельными вертикальными стеклами 6 и 7 и прямоугольной рамкой 8. Стекла G и 7 укреплены в рамке 8 попарно на ее торцах с образованием двух полостей для буфера: внутренней 9 между стеклами 6 и рамкой 8 и внешней 10 между внешними стеклами 7 ячеек 5 и стенкой камеры 1. Каждая из ячеек 5 сообщена в своей верхней части с внутренней полостью 9, а в нижней с внешней полостью 10. Один из электродов 3 размещен во внутренней полости 9 и выполнен в виде прямоугольной пластины с вырезом, а другой электрод 4 состоит из двух П-образных пластин, размещенных во внешней полости 10 для буфера. Электроды 3 и А укреплены в крышке 2 и снабжены клеммами 11.
Рамка 8 с ячейками 5 снабжена герметизирующей пластиной 12 с винтами 13, служащей днищем ячеек 5 при их подготовке и заполнении гелем, и гребенками 14 для формирования лунок в геле для образцов белков.
Прибор работает следующим образом.
Перед началом проведения электрофе- за белков формируют гелевые пластины в ячейках 5. Для этого укрепляют пары стекол О и 7 на горцах рамки 8, а к нижней части последней винтами 13 крепят пластину 12, служащую днищем ячеек 5. Затем между стеклами б и 7 заливают раствор геля, вставляют в ячейки 5 гребенки 14 для формирования лунок и дают гелю полимеризоваться. После полимеризации геля гребенки 14 вынимают и удаляют пластину 12.
Подготовленные таким образом ячейки 5 с рамкой 8 помещают в камеру 1, в полости 9 и 10 заливают буфер. Внутренняя полость 9 заполняется буфером до уровня, достаточного для сообщения его с гелем в ячейках 5. В образованные лунки в геле в каждую из ячеек 5 под буфер наслаивают растворы образцов белковых смесей и закрывают камеру 1 крышкой 2 с электродами 3 и 4, к клеммам 11 подводят электрический ток. Электрический ток, проходя через буфер во внутренней полости 9, гелевые пластины в ячейках 5 и внешнюю полость 10, приводит к фракционированию белков в геле за счет их различной электрофоретической подвижности. По истечении определенного времени процесс электрофореза заканчивается, пластины геля с электрофореграммой извлекаются из ячеек 5, проявляются и сушатся для дальнейшей оценки и анализа.
Конструктивные особенности предложенного прибора дают возможность проводить электрофорез белков при стабильных условиях протекания электрического тока через буфер и гель с белками за счет постоянства уровня буфера в полостях 9 и 10 и его сообщения в них по принципу сообщающихся сосудов. Размещение электродов 3 и 4 во внутренней полости 9 и внешней полости 10 создает замкнутую электрическую цепь, ток в которой протекает без значительных колебаний напряжения по площади и длине ге- левых пластин за счет сообщения буферных полостей и гелевых пластин с белками по всему их рабочему объему. Это приводит к равномерному движению белковых фракций в геле, начиная со стартовой линии и до конца процесса, что способствует более полному фракционированию образцов и повышению разрешающей способности элек- трофореграммы.
Формула изобретения Прибор для электрофореза белков в геле, содержащий камеру с крышкой, fia электрода и размещенные в камере ячей.си для геля, образованные двумя плоскопараллельными вертикальными стеклами и общей прямоугольной рамкой, отличающийся тем, что, с целью более равномерного и полного фракционирования белков и повышения тем самым разрешающей способности и качества электрофореграммы, стекла ячеек укреплены в рамке попарно на ее торцах с образованием двух полостей для буфера: внутренней между стеклами и рамкой и внешней между внешними стеклами ячеек и стенкой камеры, при этом каждая из ячеек сообщена в своей верхней части с внутренней полостью и в нижней с внешней полостью, причем электроды укреплены в крышке и один из них размещен во внутренней полости и выполнен в виде прямоугольной пластины с вырезом, а другой состоит из двух П-образных пластин, размещенных во внешней полости для буфера.
//
Фиг.2
Фиг.З
12
f3
Изобретение относится к анализу белковых смесей, а имен но к приборам для вертикального электрофореза белков в гелевых пластинах. Цель изобретения - более равномерное и полное фракционирование белков и повышение тем самым разрешающей способности и качества электрофореза. Прибор содержит камеру 1 с крышкой 2. в которой укреплены электроды 3 и 4. В камере 1 размещены ячейки с гелем, образованные двумя плоскопараллельными стеклами 6 и 7, укрепленными попарно на торцах прямоугольной рамки 8 с образованием внутри нее полости 9 для буфера. Между ячейками и стенкой камеры/ 1 образована внешняя полость 10 для буфера. Указанные полости 9 и 10 сообщаются через ячейки по принципу сообщающихся сосудов. Предложенный прибор позволяет поддерживать стабильные условия электрофореза в течение всего времени фракционирования белков от стартовой линии до окончания, что дает качественную и четкую электрофореграмму. 3 ил. г сл с Уробень Syipepa it о со ю 00 о о
Авторы
Даты
1991-10-07—Публикация
1989-02-28—Подача