СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ НАРУШЕНИЯ ФУНКЦИОНАЛЬНОГО СОСТОЯНИЯ ЛЕГКИХ Российский патент 1994 года по МПК G01N33/52 

Изобретение относится к области медицины и касается способов определения нарушения функционального состояния легких.

Целью изобретения является повышение точности способа.

Способ осуществляется следующим образом.

У больных хроническими заболеваниями легких проводят сбор конденсата выдыхаемого воздуха с помощью стеклянного поглотительного сосуда, конструктивно сходного с поглотителем Зайцева. Для охлаждения сосуд вставляют в специально сконструированный металлический кожух, охлаждаемый фреоном посредством хладоагрегата обычного бытового холодильника. Температура охлаждения -4^оС. Сбор конденсата проводят с помощью резинового нагубника в течение 30 мин в утренние часы, натощак, в положении больного сидя, после тщательного полоскания полости рта теплой водой при обычном дыхании.

В собранном конденсате определяют активность церулоплазмина, концентрацию общих липидов, молочной, яблочной, пировиноградной и щавелевоуксусной кислот.

Для определения церулоплазмина в две пробирки вносят по 100 мкл конденсата выдыхаемого воздуха, 4 мл ацетатного буфера (0,4 М, рН - 5,5), 0,5 мл п-фенилендиамина солянокислого (0,5%). В пробирку, служащую контролем, добавляют 2 мл фтористого натрия (3%, ингибитор). Пробирки встряхивают, помещают на 1 ч в водяную баню (37^оС). По истечении времени в опытную пробирку добавляют 2 мл ингибитора, перемешивают, охлаждают 30 мин при 4^оС. Измеряют оптическую плотность при 530 нм. Активность церулоплазмина (АЦП) рассчитывают по формуле
АЦП=E ˙ 44,0 ˙ 0,0662 мкМ/л, где 44,0 - коэффициент пересчета по Ревину для конденсата; 0,0662 - коэффициент пересчета в ед. СИ.

Точность методики ± 5%.

Для определения общих липидов 500 мкл конденсата смешивают с 500 мкл концентрированной серной кислоты и инкубируют в водяной бане при 100^оС в течение 1 ч. Затем пробы охлаждают проточной водой, добавляют 2 мл фосфорно-ванилиновой смеси (9,6% раствора ванилина и концентрированная ортофосфорная кислота в соотношении 1 : 4), оставляют при комнатной температуре на 1 ч. Одновременно готовят контрольную пробу, содержащую вместо конденсата 10 мкл хлороформа, и стандартную пробу, содержащую 10 мкл раствора триолеина (6 0 г/л). Опытную и стандартную пробы спектрофотометрируют при 530 нм против контроля. Точность методики ± 8%.

Для определения концентрации кислоты берут 2,75 мл гидразинглицинового буфера (рН 9,5), 0,1 мл раствора НАД (10 мг в 1 мл Н₂О) и 0,25 мл конденсата (в контрольную пробу вносят 0,25 мл бидистил.Н₂О). Опытную пробу спектрофотометрируют при 340 нм против контрольной пробы, затем добавляют 0,02 мл суспензии ЛДГ и через 30 мин повторно замеряют на СФ-26. Концентрацию молочной кислоты в пробе рассчитывают по формуле
МК= ΔE = ΔE·1,99 ммоль/л, где ΔЕ - разница между экстинкцией опытной и контрольной проб до и после добавления ЛДГ;
4 - расчет на 1 мл конденсата;
3,1 - объем анализируемой пробы;
6,22 ˙ 10⁶ - коэффициент экстинкции НАД ˙ Н₂ Точность методики ± 8%.

Для определения концентрации пировиноградной кислоты в опытную пробирку вносят 2,0 мл фосфатного буфера (рН 7,4), 0,1 мл раствора НАД ˙ Н₂ (3 мг в 1 мл Н₂О) и 1,0 мл конденсата выдыхаемого воздуха. В контрольную пробу вместо конденсата вносят 1,0 бидистиллированной воды. Пробы спектрофотометрируют при 340 нм, затем в обе пробирки вносят по 0,02 мл суспензии ЛДГ и через 30 мин повторно замеряют оптическую плотность раствора. Окисление НАД Н₂ пропорционально концентрации пировиноградной кислоты. Концентрацию пировиноградной кислоты в пробе рассчитывают по формуле
ПВК=ΔE = ΔE·0,498 ммоль/л
Точность методики ± 8%.

Для определения концентрации яблочной кислоты опытную пробу, содержащую 2,5 мл гидрозинглицинового буфера (рН 9,5), 0,1 мл раствора НАД (10 мг в 1 мл Н₂О) и 0,5 мл конденсата, спектрофотометрируют при 340 нм против контроля, содержащего вместо конденсата 0,5 мл бидистил.Н₂О. Затем в обе пробирки добавляют по 0,02 мл суспензии МДГ и через 30 мин пробы повторно спектрофотометрируют. По количеству образовавшегося НАД ˙ Н₂ определяют концентрацию яблочной кислоты.

Концентрацию яблочной кислоты в пробе рассчитывают по формуле
ЯК=ΔE = ΔE·0,996 ммоль/л где 2 - расчет на 1 мл конденсата.

Точность методики ± 7%.

При определении концентрации щавелевоуксусной кислоты в пробирку вносят 2,5 мл фосфатного буфера (рН 7,8), 0,1 мл раствора НАД ˙ Н₂ (3,0 мг в 1 мл Н₂О) и 0,5 мл конденсата (контроль - 0,5 мл бидистил. воды). Замеряют оптическую плотность опытной пробы против контрольной при 340 нм, добавляют по 0,02 мл суспензии МДГ и через 30 мин повторно спектрофотометрируют. По степени убыли восстановленного НАД судят о концентрации щавелевоуксусной кислоты.

Концентрацию щавелевоуксусной кислоты в пробе рассчитывают по формуле
ЩУК=ΔЕ = ΔE·0,996 ммоль/л
Точность методики ± 8%.

На основании исходных данных содержания МК, ПВК, ЯК, и ЩУК определен интегральный показатель энергетического резерва легких (ПЭР легких), как величина соотношения суммы концентраций МК и ЯК к сумме концентраций ПВК и ЩУК.

ПЭР легких =
Предварительно для этого была установлена корреляционная зависимость изученных кислот. Определение МК и ЯК основано на дегидрировании ЛДГ и МДГ с образованием НАД ˙ Н₂. Однотипность процессов и высокий коэффициент корреляционной зависимости (r = + 0,62 у здоровых людей и r = + 0,93 у больных ХНЗЛ с ЛН I-II, II ст.) позволили использовать суммарную значимость данных показателей в числителе и аналогичную значимость в знаменателе для ПВК и ЩУК кислот, которые также находятся в сложной корреляционной зависимости, но более слабой (r = -0,22 у здоровых людей и r = =+0,36 при заболеваниях легких с выраженной легочной недостаточностью).

При значениях данных показателей в пределах: активности церулоплазмина до 0,130 мкМ/л и более концентрации общих липидов до 0,50 г/л и менее величины соотношения суммы концентраций МК и ЯК к сумме концентраций ПВК и ЩУК (показатель энергетического резерва) до 1,0 и менее, определяют нарушение функционального состояния легких в виде легочной недостаточности.

П р и м е р 1. Больная С. 47 лет. Профессия: портниха. Поступила для лечения. На основании клиникорентгенологического обследования и функциональных данных установлен предварительный диагноз: хронический бронхит с бронхоспастическим синдромом без признаков легочной недостаточности (ЛН 0 ст.) Хр. гастрит.

С целью уточнения диагноза больной дополнительно проведено лабораторное обследование по предлагаемому способу. Результаты: ЦП - 0,028 мкМ/л, ОЛ - 0,67 г/мл, ПЭР легких - 1,72. Заключение: лабораторные данные указывают на отсутствие нарушений функционального состояния легких и подтверждают предварительный диагноз.

П р и м е р 2. Больной Ц. 35 лет. Профессия: электросварщик. Поступил для решения вопроса о трудоспособности. На основании клинико-рентгенологических и функциональных данных установлен предварительный диагноз: хронический обструктивный бронхит, диффузный пневмосклероз, умеренная эмфизема легких, ЛН 0-1 ст. Хр. холецистит, легкая форма. Больной признан трудоспособным.

С целью уточнения диагноза и трудоспособности больному дополнительно проведено лабораторное обследование по предлагаемому способу. Результаты: ЦП - 0,046 мкМ/л, ОЛ - 0,67 г/мл, ПЭР легких - 1,40. Заключение: лабораторные данные указывают на отсутствие выраженных нарушений функции легких, что подтверждает предварительный диагноз и решение о трудоспособности.

П р и м е р 3. Больная К. Профессия: табельщица. Инвалид III группы. Поступила для решения вопроса о трудоспособности. На основании клинико-рентгенологических и функциональных данных установлен диагноз: бронхиальная астма инфекционно-аллергического генеза. Хр. бронхит с бронхоспастическим синдромом. Диффузный пневмосклероз. Умеренная эмфизема легких. ЛН I-II ст. Атеросклероз аорты. Кардиосклероз. Н 1 ст. Хр. гастрит.

Для уточнения диагноза больной дополнительно проведено обследование по предлагаемому способу. Результаты: ЦП - 0,081 мкМ/л, ОЛ - 0,49 г/мл, ПЭР легких - 1,39. Заключение: на фоне выраженных вентиляционных нарушений (ЛН - I-II ст.) выявлены незначительные изменения показателей функционального состояния легких. Больной рекомендовано провести длительное лечение, после чего решать вопрос о трудоспособности.

П р и м е р 4. Больной П. 46 лет. Профессия: слесарь VI разряда. Не работает 8 лет. Инвалид II группы по общему заболеванию. Поступил для решения вопроса о группе инвалидности. На основании клинико-рентгенологического и функциональных данных установлен диагноз: бронхиальная астма инфекционно-аллергического генеза, средней тяжести. Хр. бронхит, диффузный пневмосклероз, выраженная эмфизема легких. МЛ 1 ст. Дистрофический кардиосклероз. Н 0 ст. Хр. гастрит, легкая форма. Показаний для инвалидности нет.

С целью уточнения диагноза и группы инвалидности больному проведено дополнительное обследование по предлагаемому способу. Получены следующие результаты: ЦП - 0,174 мкМ/л, ОЛ - 0,44 г/мл, ПЭР легких - 0,84.

Заключение: на фоне умеренных вентиляционных нарушений у больного выявлены значительные изменения функционального состояния легких (нереспираторной функции), что позволяет признать его инвалидом II группы, учитывая, что он длительное время не работал.

П р и м е р 5. Больной П. 46 лет. Профессия: тракторист. Поступил для решения вопроса о трудоспособности.

На основании клинико-рентгенологического и функционального обследования установлен диагноз: бронхиальная астма, средней тяжести. Хр. обструктивный бронхит. Диффузный пневмосклероз, плевропневмослероз. Умеренная эмфизема легких, ЛН II ст. Атеросклероз аорты, кардиосклероз с умеренными изменениями в миокарде, Н I ст. Язвенная болезнь желудка в стадии рубцевания. Хр. гастрит с упадком питания.

Для уточнения диагноза дополнительно проведено обследование по предлагаемому способу. Результаты: ЦП - 0,980 мкМ/л, ОЛ-0,13 г/мл, ПЭР легких - 0,44.

Заключение: на фоне выраженных вентиляционных нарушений определяются резкие изменения показателей функционального состояния легких. Больной нетрудоспособен.

Предложенным способом в клинических условиях обследована группа здоровых лиц (n = 54) и больных с легочной патологией, около 160 человек.

Данные приведены в таблице.

При решении вопросов диагностики и экспертизы трудоспособности результаты обследования сравнивали с показателями в таблице.

Предлагаемый способ оценки степени нарушения функционального состояния (метаболической и регуляторно-выделительной) легких в комплексе с клиническими данными и распираторными показателями позволяет наиболее адекватно оценить уровень компенсаторно-адаптационных возможностей легких при решении экспертных вопросов и проведении реабилитационных мероприятий.

Использование: способы определения функционального состояния легких. Цель: повышение точности способа. Сущность изобретения: в конденсате выдыхаемого воздуха, собранного за 30 мин, дополнительно определяют активность церулоплазмина, концентрацию общих липидов, молочной, пировиноградной, яблочной и щавелевоуксусной кислот. При увеличении активности церулоплазмина до 0,13 мкМ/л и более, снижении концентрации общих липидов до 0,5 г/л и менее и величине отношения суммы концентраций молочной и яблочной кислот к сумме концентрации пировиноградной и щавелевоуксусной кислот 1,0 и менее определяют нарушение функционального состояния легких в виде легочной недостаточности. Предлагаемый способ позволяет повысить точность определения функционального состояния легких. 1 табл.

СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ НАРУШЕНИЯ ФУНКЦИОНАЛЬНОГО СОСТОЯНИЯ ЛЕГКИХ путем клинико-лабораторного обследования, отличающийся тем, что, с целью повышения точности способа, дополнительно определяют в конденсате выдыхаемого воздуха активность церулоплазмина, концентрацию общих липидов, молочной, пировиноградной, яблочной и щавелево-уксусной кислот, рассчитывают отношение суммы концентраций молочной и яблочной кислот к сумме концентраций пировиноградной и щавелево-уксусной кислот и при увеличении активности церулоплазмина до 0,130 мкМ/л и более, снижении концентрации общих липидов до 0,5 г/л и менее и при значении отношения суммы указанных кислот 1 и менее определяют нарушение функционального состояния легких в виде легочной недостаточности.