СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРЕПАРАТА ЭВКАЛИМИН Российский патент 1995 года по МПК A61K35/78 

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности, касается получения лекарственных препаратов растительного происхождения и преимущественно может быть использовано для получения препарата эвкалимин, обладающего антимикробной и противовирусной активностью.

Известен способ получения эвкалимина, включающий экстракцию листьев или побегов эвкалипта прутовидного хлорсодержащего органическим растворителем, отгонку, обработку остатка водным раствором щелочи, осаждение технического продукта соляной кислотой, отделение осадка и сушку с последующим растворением в спирте и очисткой путем фильтрования через слой окиси алюминия 15% влажности в соотношении 1:7, промыванием трехкратным количеством этилового спирта, упариванием, осаждением целевого продукта соляной кислотой, отделением, промыванием, сушкой и измельчением осадка. Выход целевого продукта составляет около 2% от веса сырья.

Недостатком указанного способа является ограниченная сырьевая база, которая лимитирует удовлетворение потребности медицины в этом препарате, а также относительно невысокий выход целевого продукта.

Целью изобретения является разработка способа получения эвкалимина, позволяющего существенно расширить его сырьевую базу, увеличить выход и полностью удовлетворить потребность в нем при тех же природных ресурсах эвкалипта прутовидного, а также повысить выход целевого продукта.

Поставленная цель достигается тем, что в качестве сырья используются отходы производства эвкалиптового масла, а именно шрот, остающийся после отгонки эфирного масла с водяным паром из листьев и побегов эвкалипта прутовидного. Качество исходного сырья характеризуется содержанием фенолоальдегидов, которое должно быть не менее 2% Высушенный шрот измельчается, а влажный используется в цельном виде. Сырье подвергают экстракции спиртом, после отгонки растворителя кубовый остаток обрабатывают водой и хлористым метиленом с последующей экстракцией действующих веществ из хлористого метилена водным раствором щелочи, осаждением технического продукта соляной кислотой, отделением осадка, промыванием его, сушкой и очисткой спиртового раствора фильтрованием через окись алюминия 15% влажности (1:7), трехкратным промыванием спиртом и осаждением эвкалимина из упаренного фильтрата водным раствором соляной кислоты. Выход целевого продукта 2,5-3,5%
В случае использования высушенного измельченного шрота экстракцию сырья можно также проводить хлорсодержащим углеводородом с последующим проведением процесса указанным способом. Повышение выхода целевого продукта обуславливается тем, что при обработке сырья водяным паром в водный фильтрат переходят экстрактивные водорастворимые вещества при сохранении содержания эуглобалей вследствие их полной нерастворимости в воде. Биологическую активность эвкалимина обуславливает комплекс пpиpодных биологических активных веществ, содержащихся в листьях эвкалипта, качественно-количественный состав которого определяется сырьем и способом выделения целевого продукта из сырья. Однако возможность получения препарата эвкалимин из другого сырья (шрота) не представляется очевидной. Несмотря на то, что основные биологически активные компоненты препарата фенолоальдегиды нерастворимы в воде и не должны удаляться с водным конденсатом при извлечении эфирного масла, возможность их межмолекулярного взаимодействия со множеством компонентов листа эвкалипта и последующего перехода в воду нельзя исключить. Кроме того, обработка ткани листа эвкалипта водяным паром при 100^оС (при отгонке масла) может вызвать деструкцию фенолоальдегидов.

Сравнительные данные физико-химических характеристик и биологической активности эвкалимина, полученных из листьев и побегов эвкалипта прутовидного из шрота после отгонки эфирного масла (см.табл.1 и 2), показывают, что предлагаемый способ обеспечивает получение целевого продукта необходимого качественно-количественного состава и биологических свойств.

Соответствие заявляемого способа критерию "новизна" заключается в том, что в качестве сырья для получения препарата эвкалимин используют отходы производства эвкалиптового масла, а экстракцию сырья на головной стадии проводят спиртами С₁-С₃ в соотношении 1:7 для сухого сырья и 1:14 для влажного.

П р и м е р 1. 50,0 г измельченного сырья (высушенный шрот листа эвкалипта прутовидного после отгонки эфирного масла в промышленных условиях) помещают в стеклянную колбу, заливают 350 мл этилового спирта (1:7) и проводят экстракцию в течение 3 ч при комнатной температуре при периодическом помешивании (≈3 раза в 1 ч). Первый экстракт сливают, заливают сырье спиртом в объеме слитого экстракта и экстрагируют, как в первом случае. Третью экстракцию проводят аналогично в течение 2 ч и третий экстракт (≈280 мл) подают на свежую порцию сырья (50,0 г), добавляя необходимое до соотношения 1:7 количество спирта. Первую и вторую экстракции проводят, как описано выше. Объединенные первое и второе извлечения (≈560 мл) упаривают в вакууме до ≈2,0% исходного объема (≈12 мл) и обрабатывают кубовый остаток шестикратным объемом смеси воды и хлористого метилена (1:1) в делительной воронке. Хлористометиленовый экстракт сливают, а обработку водного слоя проводят еще 2 раза (25 и 12 мл). Объединенные хлористометиленовые извлечения трижды обрабатывают 2%-ным водным раствором щелочи (2х38 мл, 19 мл). Соотношение объемов водно-щелочной и органической фаз 0,5:1; 0,5:1 и 0,25:1. Объединенные щелочные извлечения подкисляют 15%-ной соляной кислотой до полного выпадения осадка (рН 1), Осадок отфильтровывают, промывают дистиллированной водой до нейтральной реакции и сушат при 80^оС. Высушенный технический продукт растворяют в этиловом спирте 1:50, и полученный раствор пропускают через слой окиси алюминия 15% влажности. Соотношение масс очищаемого технического продукта и сорбента 1: 7 (21 г). Окись алюминия трижды промывают этиловым спиртом и спиртовой элюат упаривают в вакууме до 7-8% исходного объема. Кубовый остаток приливают при перемешивании к 9-кратному объему 0,1% соляной кислоты. Выпавший осадок эвкалимина отфильтровывают, промывают дистиллированной водой до нейтральной реакции и сушат при 60^оС. Получают 1,8-1,9 г эвкалимина (3,6-3,8% ) с содержанием действующих веществ, фенолоальдегидов ≈45% (норма не ниже 40%), что составляет 70-75% выхода от их содержания в сырье. Полученный эвкалимин идентичен по биологической активности препарату, полученному по способу-прототипу.

Биологическую активность эвкалимина определяют методом диффузии в агар на чашках Петри; в качестве тест-культуры используют суспензию спор Bacillus subtllis 6633 вариант 2 (Государственная Фармакопея СССР ХI изд. вып.2, 1990, с.210-213). Активность эвкалимина выражается в единицах действия (ЕД). Метод биологической стандартизации эвкалимина предназначен для количественной оценки антимикробной активности эвкалимина и используется для биологического контроля первых промышленных партий субстанции эвкалимина наряду с химическим методом контроля.

П р и м е р 2. Из 100 г неизмельченного листа эвкалипта проводят отгонку эфирного масла с водным паром. По окончании отгонки сырье с водяным конденсатом охлаждают, конденсат сливают, лист подсушивают на воздухе до исчезновения слоя воды с его поверхности ( ≈0,5 ч). Влажное сырье помещают в стеклянную колбу и заливают этиловым спиртом 14:1 по отношению к весу исходного сырья. Проводят экстракцию при комнатной температуре при периодическом перемешивании (≈6 раз в 1 ч) 3 ч. Процесс повторяют еще дважды в аналогичных условиях, каждый раз заливая сырье спиртом в объеме, равном объему слитого экстракта. Объединенные извлечения упаривают до 0,4-0,5% исходного объема и далее процесс проводят, как указано в примере 1. Получают 6,6 г технического продукта, который растворяют в спирте 1:50 (330 мл) и пропускают через слой окиси алюминия 15% влажности с соотношением масс технического продукта и сорбента 1: 7 (42,6 г). По окончании фильтрации сорбент промывают трехкратным объемом спирта (990 мл) и далее поступают, как описано в примере 1. Получают 3,0 г эвкалимина с содержанием фенолоальдегидов 47%
П р и м е р 3. 50,0 г измельченного сырья (высушенный шрот листа эвкалипта прутовидного после отгонки эфирного масла в промышленных условиях) помещают в стеклянную колбу, заливают 350 мл метилового спирта (1:7) и экстрагируют трижды при комнатной температуре при периодическом помешивании (≈3 раза в 1 ч) 1-я и 2-я экстракции по 3 ч, 3-я 2 ч. Количество экстрагента для 2-й и 3-й экстракций определяется объемом предыдущего экстракта (по 270 мл). Объединенные экстракты (1-3) упаривают до ≈1,5% (12 мл). Далее поступают, как описано в примере 1. Получают 3,5 г технического продукта, который растворяют в этиловом спирте 1: 50 (175 мл), и полученный раствор пропускают через слой окиси алюминия 15% влажности с соотношением масс технического продукта и сорбента 1:7 (24,5 г). По окончании фильтрации сорбент промывают трехкратным объемом спирта (525 мл) и далее поступают, как описано в примере 1. Получают 1,92 г эвкалимина (3,84%) с содержанием фенолоальдегидов 44,8%
П р и м е р 4. 50,0 г измельченного сырья (высушенный шрот листа эвкалипта прутовидного после промышленного получения эфирного масла) экстрагируют в стеклянной колбе 350 мл изопропилового спирта (1:7) при комнатной температуре в течение 3 ч при перемешивании (≈3 раза в 1 ч). Объем экстрагента для второй экстракции равен объему 1-го экстракта (290 ил), для третьей объему 2-го экстракта (280 мл). Время 2-й и 3-й экстракции соответственно 3 и 2 ч. Объединенные экстракты упаривают до ≈1,5% (12 мл). Далее поступают, как описано в примере 1. Получают 2,4 г технического продукта, который растворяют в этиловом спирте 1: 50 (120 мл), и полученный раствор пропускают через слой окиси алюминия 15% влажности. Соотношение масс технического продукта и сорбента 1:7. Далее поступают, как описано в примере 1. Получают 1,6 г эвкалимина (3,2%) с содержанием фенолоальдегидов 46,8%
П р и м е р 5. 50,0 г измельченного сырья (высушенный шрот листа эвкалипта прутовидного после промышленной отгонки эфирного масла) помещают в стеклянную колбу, заливают хлористым метиленом 1:7 (350 мл) и экстрагируют 3 ч при комнатной температуре и перемешивании (≈3 раза в 1 ч). После слива 1-го экстракта (270 мл) процесс повторяют дважды, заливая экстрагент в объеме предыдущего экстракта (270 и 270 мл). Время 2-й экстракции 3 ч, 3-й 2 ч. Объединенные хлористометиленовые извлечения упаривают до ≈9% исходного объема. Далее проводят обработку 2%-ным водным раствором щелочи и подкисление раствором соляной кислоты, как указано в примере 1. Получают 2,8 г технического продукта, который растворяют в спирте 1:50 (140 мл) и пропускают через слой окиси алюминия 15% влажности, обрабатывают продукт, как описано в примере 1. Получают 1,5 г эвкалимина (3,0%) с содержанием действующих веществ 44,0%
П р и м е р 6. 50,0 г измельченного сырья (высушенный шрот листа эвкалипта прутовидного после промышленной отгонки эфирного масла) помещают в стеклянную колбу, заливают хлороформом 1:7 (350 мл) и экстрагируют 3 ч при комнатной температуре и перемешивании (3-4 раза в 1 ч). После слива 1-го экстракта (270 мл) процесс повторяют 2 раза, заливая экстрагент в количестве, равном объему предшествующего слива (270 и 290 мл), экстрагируя 2-й раз 3 ч, 3-й раз 2 ч. Объединенные хлороформные извлечения упаривают до 8,5% исходного объема (70 мл), обрабатывают 2%-ным водным раствором щелочи по 35, 35 и 18 мл (соотношение объемов водно-щелочной и органической фаз 0,5:1; 0,5:1 и 0,25:1). Далее щелочные извлечения подкисляют 15% соляной кислотой до полного выпадения осадка (рН 1), который обрабатывают, как указано в примере 1. Получают 2,6 г технического продукта, который растворяют в спирте 1:50 (130 мл) и пропускают через слой окиси алюминия 15% влажности. Элюат обрабатывают, как описано в примере 1. Получают 1,45 г эвкалимина (2,9%) с содержанием действующих веществ 45,1%
П р и м е р 7. 50,0 г измельченного сырья (высушенный шрот листа эвкалипта прутовидного после промышленной отгонки эфирного масла) заливают в колбе дихлорэтаном 1:7 (350 мл), экстрагируют 3 ч при комнатной температуре и перемешивании (3 раза в 1 ч), После слива 1-го экстракта (280 мл) процесс повторяют дважды, заливая экстрагент в объеме, равном объему предыдущего слива (280 и 270 мл соответственно). Время 2-й и 3-й экстракций соответственно 3 и 2 ч. Объединенные извлечения упаривают до 8,5% исходного объема (70 мл), обрабатывают 2%-ным водным раствором щелочи 35, 35 и 18 мл (соотношение объемов водно-щелочной и органической фазы 0,5:1; 0,5:1 и 0,25:1). Щелочные извлечения подкисляют 15% соляной кислотой до полного выпадения осадка (рН 1), который обрабатывают, как описано в примере 1. Вес технического продукта 2,15 г. Раствор технического продукта 1:50 в спирте (108 мл) пропускают через 15 г окиси алюминия 15% влажности (1:7). Элюат обрабатывают, как описано в примере 1. Получают 1,15 г эвкалимина с содержанием действующих веществ 45,2% Выход эвкалимина от веса сырья 2,3%
Использование предлагаемого способа в промышленном производстве препарата эвкалимин позволяет значительно расширить его сырьевую базу и улучшить технологичность процесса за счет замены низкокипящих хлорсодержащих растворителей на спирты. Это имеет особое значение при размещении производства в южных районах, где температура воздуха может приближаться к температуре кипения растворителя. Кроме того, замена растворителя позволяет повысить выход целевого продукта с 2,3-2,9% до 3,1-3,8%
Использование данного способа в сравнении с известными обеспечивает повышение выхода целевого продукта с 2,0% до 3,0-3,8% повышение эффективности использования природных ресурсов эвкалипта прутовидного за счет использования отходов производства (шрот) эвкалиптового масла, а также полное удовлетворение потребности в эвкалимине при тех же природных ресурсах эвкалипта.

Изобретение относится к медицине, а именно к химико-фармацевтической промышленности, и касается способа получения противомикробного и противовирусного средства эвкалимин. Сущность способа заключается в экстракции шрота эвкалипта прутовидного, полученного после отгонки эфирного масла C₁-C₃-спиртами или хлорсодержащими углеводородами в соотношении 1 : 7 для сухого шрота или C₁-C₃-спиртами в соотношении 1 : 14 для влажного сырья. Далее экстракт упаривают, обрабатывают гидроксидом натрия, осаждают соляной кислотой при pH 1,0, фильтруют, промывают осадок, высушивают, очищают на окиси алюминия, элюцируют спиртом, упаривают и повторно осаждают соляной кислотой, промывают и сушат. Технический результат предложения заключается в использовании обработанного сырья, при этом качество препарата не снижается.

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРЕПАРАТА ЭВКАЛИМИН путем экстракции листьев эвкалипта прутовидного (E.viminalis Labill) органическим растворителем, упаривания экстракта, обработки упаренного экстракта гидроксидом натрия, осаждения соляной кислотой при рН 1,0, фильтрации, промывки осадка и его высушивания, очистки на окиси алюминия при 10 17% насыщения ее водой в соотношении полупродукт сорбент 1 7, элюции целевого продукта спиртом, упаривания, повторного осаждения соляной кислотой, фильтрации, промывки и сушки осадка, отличающийся тем, что в качестве сырья используют шрот после отгонки эфирного масла, а экстракцию сухого сырья проводят С₁ С₃-спиртами или хлорсодержащими углеводородами в соотношении сырье растворитель 1 7 или С₁ С₃ спиртами в соотношении 1 14 для влажного сырья.