СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АЗИДОТИМИДИНА Российский патент 1995 года по МПК C07H19/73 

Изобретение относится к органической химии, а именно к способам получения 3'-азидо-3'-деокситимидина, имеющего также наименование 1-(3'-азидо-2,3'-диокси-D-эритро-пентофуронозил)-тиамин азидотимидин (АЗТ).

В настоящее время АЗТ рассматривается как перспективный препарат для лечения СПИДа (выпускается под наименованием Зидовудин пат. США N 4921950. The Lancet. 1 (8481), p. 575-580. Mar. 15.1986. Eвр. патент N 0199451).

АЗТ получают в основном многостадийным химическим синтезом из производных D-ксилозы (пат. США N 491950) тимидина (пат. США N 5064946, Tetraheron Letters v. 28, N 44, р.5311-5312, 1987: J.Org. Chem. v.38, N 25, 1973, р. 4299-4304: J. Org. Chem. 28.936 (1963)).

Основные методы заключаются в клонировании гидроксильных групп, введении азидогруппы в 3 положение фуранозного кольца и снятии блокировки. При этом наибольшие сложности возникают в ходе процессов азидирования и выделения целевого продукта высокой чистоты.

Известно (пат. США N 4221950) получение АЗТ путем обработки 1-[2-диокси-3-0-метоксикарбонил-бетта-D-треопентафура-нозил] -тиамина азидом натрия в диметилформамиде в течение 4 ч при 85-90^оС экстракцией целевого продукта, его нагреванием в метаноле в бикарбонате натрия и выделением целевого продукта. Процесс идет с выходом около 70% Однако сложность получения исходного продукта (приблизительно 10 стадий) делает процесс нетехнологичным.

B (J. Org. Chem. 29.2076-2078, 1964) предлагается получать АЗТ из 1-(2'-диокси-3'-0-мезил-5'-0-тритил-бетта-D-ликсозил)- тимидина последовательной обработкой азидом лития в диметилформамиде (3 ч при 100^оС), а затем раствором бикарбоната натрия в эфире. Выход составляет около 60% т.пл. 106-112^оС. Недостатком является невысокий выход, получение продукта недостаточно высокой чистоты.

Прототипом изобретения является способ получения АЗТ из 5'-тритил-2,3'-ангидротимидина (J. Organic Chemistry, v.38, N 25, 1973, р.4299-4305). Продукт обрабатывают азидом натрия в смеси диметилформамида с водой, экстрагируют хлороформом, а затем нагревают в 80% уксусной кислоте на паровой бане в течение двух часов и перекристаллизовывают. Выход продукта около 30% температура плавления 115-120^оС. Недостатком метода является низкий выход и недостаточная чистота продукта, что затрудняет его использование в фармакологии (согласно ГФ Х1, вып.1, стр.16, температура плавления должна составлять 120-123^оС).

Цель создание простой технологии, позволяющей в промышленных масштабах получать продукт с высокой чистотой и достаточным выходом.

Было найдено, что задача может быть успешно решена в результате проведения процесса из 5'-0-бензоил-2,3'-ангидроксилтимидина (БАТ), причем процесс азидирования осуществляют раствором хлористого аммония и хлористого лития в диметилформамиде при 98-102^оС до полного исчезновения БАТ, после чего удаляют защитную группировку нагреванием в смеси диэтиламина с метанолом. Оптимальные результаты получаются при массовом соотношении БАТ:азид натрия: хлористый литий:хлористый аммоний 1:1-1,1:0,25-0,3:0,3:0,35 и использовании смеси диэтиламина с метанолом в объемном соотношении 1:1.

Отличием заявляемого способа от известных аналогов является проведение процесса азидирования с новым, более активным азидирующим началом, а именно активированным азидом лития, образующимся непосредственно в условиях реакции при взаимодействии азида натрия и хлористого лития. Введение в реакционную смесь в это время хлористого аммония связывает образующийся LiOH, обеспечивая постоянное поддержание активированного азида лития в количествах, необходимых для протекания процесса. Использование активного азидирующего агента стало возможным благодаря использованию бензоильной защитной группы, которую дополнительно стабилизирует в условиях реакции избыток хлористого аммония. Эта же защитная группа в сочетании с использованием на последней стадии диэтиламина образует комплекс легковыделяемый из реакционной смеси (в отличии от прототипа и аналогов), что и обусловливает высокую чистоту конечного продукта. Таким образом, совокупность существенных признаков заявляемого изобретения обеспечивает в его рамках достижение нового положительного эффекта, а именно существенное увеличение чистоты продукта, что свидетельствует о соответствии критерию "технический уровень".

П р и м е р 1. В сухой аппарат загружают 25,0 л диметилформамида (10,0 л товарного и 15,0 л отгонов). Через разгрузочный люк вручную, очень осторожно, при размешивании загружают 2,0 кг азида натрия и 0,56 кг хлористого лития с массовой долей влаги не более 5,0% В полученную азидирующую смесь в диметилформамиде, охлажденную до 106-104^оС, загружают 0,66 кг хлористого аммония и 2,0 кг (1,934 кг 100%) ангидротимидина. Реакционную массу нагревают до 105-106^оС и при этой температуре и при размешивании выдерживают в течение 4,5 ч. За ходом реакции следят с помощью тонкослойной хроматографии.

Затем реакционную массу нагревают до 109-110^оС и выдерживают при этой температуре в течение 3 ч. При 111-114^оС проводят выдержку в течение 1 ч 30 мин. Реакцию считают законченной, если на тонкослойной хроматограмме практически отсутствуют или присутствуют слабые следы ангидротимидина. По окончании реакции реакционную массу охлаждают до 60^оС, фильтруют от осадка на друк-фильтре и промывают 2,0 л товарным диметилформамидом. Кубовый осадок охлаждают до 30-36^оС (температура бани) и растворяют в 14 л смеси диэтиламина и метанола (1: 1) и направляют на дебензоилирование. В течение всего процесса, в зависимости от скорости реакции (контроль по тонкослойной хроматографии) в реакционную массу из сборника загружают приблизительно 3,0 л диэтиламина (1,0 л каждые 2 ч). Реакцию считают законченной при полном отсутствии в реакционной массе 5-0-бензоил-3-азидотимидина (контроль тонкослойной хроматографией на пластинах). Затем реакционную массу охлаждают в вакууме 50-70 мм рт.ст. (6,65-9,31 кПа), отгоняют смесь диэтиламина и метанола. Оставшийся в роторном испарителе кубовый остаток, содержащий азидотимидин, с помощью вакуума выгружают на кристаллизацию. Кристаллизацию проводят в течение 10-12 ч при размешивании и при 20-25^оС. Выпавший осадок азидотимидина фильтруют на воронке Бюхнера, заправленной двумя слоями фильтровальной бумаги, отжимают и промывают 0,2 л охлажденной до 5-8^оС дистиллированной воды. Отжимают полученный азидотимидин и сушат в вакуумном шкафу при температуре 40-45^оС и вакууме 25-30 мм рт.ст. в течение 3-4 ч. Получают 0,950 кг азидотимидина с массовой долей основного вещества не ниже 97% и массовой долей воды не выше 1,5%
П р и м е р 2. В условиях примера 1 проводили опыты по изучению условий азидирования на выход азидотимидина. Результаты приведены в таблице.

Изобретение внедрено на производственной установке фирмы УРАЛ-АС в промышленных масштабах. Полученные результаты показали, что при использовании предложенной технологии получается высокочистый азидотимидин с т.пл. не ниже 122^оС, т. е. превышающий аналогичные характеристики препаратов фирмы "Wellcome Foundation", а также препаратов зидовудин и ретровир.

Использование: препарат для лечения СПИДа. Сущность изобретения: продукт 1 - 3′ азидо 2,3′ диокси D-эритро-пентофуранозил)-тиамин, выход 50%. Содержание основного вещества 97%. Реагент 1: 5′ О-бензоил 2,3′ ангидрокситимидин. Реагент 2: азид натрия в присутствии хлористого лития и хлористого аммония при соотношении всех реагентов 1 : 1 - 1,1 : 0,25 - 0,3 : 0,3 : 0,35 соответственно при 98 - 102°С, с последующей обработкой метанолом и диэтиламином в соотношении 1 : 1. 2 з.п. ф-лы, 1 табл.

1. СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АЗИДОТИМИДИНА азидированием 5′-замещенного-2,3′-ангидрокситимидина с помощью азида натрия с последующим снятием защитных групп обработкой деблокирующим агентом основного характера при повышенной температуре, отличающийся тем, что в качестве 5′-замещенного-2,3′ -ангидрокситимидина используют 5′-О-бензоил-2,3′ -ангидрокситимидин, азидирование проводят в N,N′ -диметилформамиде в присутствии хлористого лития и хлористого аммония при температуре 98-102^oС, а в качестве деблокирующего агента используют смесь диэтиламина с метанолом. 2. Способ по п.1, отличающийся тем, что азидирование проводят при массовом соотношении реагентов 5′-О-бензоил -2,3′-ангидрокситимидин: азид натрия: хлористый литий, хлористый аммоний 1:(1-1,1):(0,25-0,3):0,35. 3. Способ по п. 1, отличающийся тем, что деблокирующий агент содержит метанол и диэтиламин в соотношении 1:1.