СПОСОБ ОКРАШИВАНИЯ МАЗКОВ КРОВИ Российский патент 1995 года по МПК G01N1/30 

Изобретение относится к области медицины и может быть использовано при анализе крови.

Известен способ окрашивания мазков крови, в котором фиксированные метиловым спиртом мазки крови окрашивают по Романовскому смесью азура и эозина в течение 20 мин.

Наиболее близким является способ окрашивания мазков крови, при котором высушенные на стенках мазки крови фиксируют термической обработкой при 160-180^оС в течение 9-11 мин, а затем окрашивают по Романовскому азур-эозином в течение 20 мин.

Однако производство азура токсично, сам он токсичен и экологически опасен.

Окраска азур-эозином никогда не дает "объемную" картину ядра леток крови, а только плоскую, что считается единственно возможным. Готовый краситель: смесь азур-эозина по Романовскому, растворенная в смеси глицерина и метилового спирта, огнеопасна. Кроме того, окрашивание мазков крови по Романовскому требует довольно длительного времени (20 мин).

Целью изобретения является создание технологии окраски мазков крови с использованием нетоксичных, экологически безопасных и пожаробезопасных смесей красителей, получение объемной картины ядер лейкоцитов и сокращение времени анализа.

Это достигается предлагаемым способом окрашивания мазков крови, включающим термическую фиксацию при 160-180^оС и обработку красителями, мазки окрашивают 0,2%-ным водным раствором эозина в течение110-130 с, споласкивают водой и затем окрашивают 0,2%-ным водным раствором диазагемицианинового бензтиазолового в течение 50-70 с.

Диазагемицианиновый бензтиазоловый является нетоксичным водорастворимым красителем, который применяют в текстильной промышленности для окрашивания тканей из полиакриловых волокон.

П р и м е р 1. Мазок крови человека высушивают на воздухе, фиксируют высокой температурой при 169^оС в течение 9 мин. Остывшие мазки окрашивают 0,2%-ным водным раствором эозина 110 с, споласкивают водой, а затем окрашивают 0,2%-ным водным раствором диазагемицианинового бензтиазолового 50 с. Эритроциты окрашиваются в красный цвет, ядра нейтрофилов в фиолетовый, зернистость эозинофилов в оранжево-красный; ядра лимфоцитов и моноцитов окрашиваются в светло-фиолетовый цвет, видна объемность ядра, цитоплазма лимфоцитов и моноцитов светло-синяя.

П р и м е р 2. Высушенные мазки крови выдерживают 11 мин при 171^оС. Остывшие мазки окрашивают 70 с, 0,2%-ным водным раствором эозина, ополаскивают водой, затем окрашивают 130 с 0,2%-ным водным раствором диазагемицианинового бензтиазолового. Эритроциты розовые, ядра нейтрофилов фиолетовые, цитоплазма голубоватая, гранулы светло-вишневого цвета. Ядра моноцитов и лимфоцитов светло-фиолетовые, объемные, цитоплазма сиреневая. Тромбоциты светло-синие.

Как видно из примеров, удается получить объемную картину ядер лейкоцитов, что может дать дополнительную диагностическую информацию. Сокращается время окраски мазков крови до 3 мин вместо 20 мин, что экономит время медперсонала. Удается отказаться от применения красителя азура, производство которого токсично, а применение экологически опасно. Удается избежать добавления в краситель токсичного метилового спирта.

Использование: в медицине, в частности в лабораторной диагностике. Сущность изобретения: мазки крови термически фиксируют при 160-180°С, окрашивают 0,25-ным водным раствором эозина 110-130 с, споласкивают водой, а затем окрашивают 0,2% -ным водным раствором диазагемицианинового бензтиазолового 50-70 с. Способ позволяет сократить время анализа, получить объемную картину ядер лейкоцитов и исключить токсичность красителя.

СПОСОБ ОКРАШИВАНИЯ МАЗКОВ КРОВИ, включающий термическую фиксацию при 160 180^oС и обработку красителями, отличающийся тем, что мазки окрашивают 0,2% -ным раствором эозина 110 130 с, споласкивают водой, а затем окрашивают 0,2% -ным раствором диазагемицианинового бензтиазолового 50 70 с.