СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ЗАБОЛЕВАНИЙ ТКАНЕЙ ПАРОДОНТА Российский патент 1996 года по МПК G01N33/68 

Изобретение относится к медицине, а именно к терапевтической стоматологии.

Известен способ диагностики заболеваний пародонта, заключающийся в определении содержания лизоцима в смешанной слюне по методике К. А. Каграмановой, З. В. Ермольевой.

Исследование проводят до завтрака. Смешанную нестимулированную слюну собирают в пробирку (путем сплевывания). Цельную нестимулированную слюну разводят физ. раствором в соотношении 1 10, умножая полученный результат на 10. Слюну по 0,1 мл вносят в стандартные лунки (10 мм в диаметре), вырезанные пробойником в толще агара. Пробы ставят в термостат и инкубируют при 37^oС 24 часа, после чего измеряют зоны лизиса Micrococcus lysodeikticus вокруг лунки и определяют концентрацию лизоцима по градуированным кривым (построенным по серии двукратных разведений в физ. растворе кристаллического лизоцима яичного белка: от 1,56 до 250 мкг/мл). Диаметр зон лизиса Micrococcus lysodeikticus находится в прямой зависимости от концентрации лизоцима в испытуемых жидкостях (Каграманова К. А. Ермольева З. В. Сравнительная характеристика методов определения активности лизоцима. Антибиотики, 1966, N 10, с. 917 919).

Однако этот способ имеет недостатки, т. к. концентрация лизоцима слюны на протяжении суток подвержена сильным колебаниям, не совпадающим во времени у разных людей и даже у одного человека в разные дни.

Количество лизоцима в слюне быстро меняется под влиянием обычных физиологических раздражений, нервно-психических воздействий, физической нагрузки. Кроме того, количество лизоцима зависит от времени года, от пола, у женщин от фазы менструального цикла (Плецитый Д. Ф. Биологическая роль лизоцима и его лечебное применение. Караганда, 1972, с.163 167; Федорцов К. К. Кузьмин С. Н. Козлова Н. Н. Першин Б.Б. Лабораторное дело. 1981. N 12, с.735 736).

Концентрация лизоцима по однократно отобранной пробе слюны не является объективным критерием величины. Для этого рекомендуется производить отбор 3 проб слюны в течение 10 мин каждая с 30-минутным интервалом от начала сбора (Ю. С. Варенко, В. Т. Шевченко, Л. П. Жовниренко. Лабораторное дело. 1987, N 5, с. 366 370).

Известен способ определения уровня R-белка в периферической венозной крови, используемый в клинике инфекционных болезней (Регуляторные R-белки при инфекционных и других заболеваниях. Сб. н. трудов НИИЭМ им. Н. Ф. Гамалеи АМН РФ. Москва. 1990).

Цель изобретения упрощение метода диагностики заболеваний тканей пародонта, повышение точности с минимальными затратами времени.

Указанная цель достигается путем определения R-белка в десневой крови.

Исследования проводили в 2-х группах больных: 1 группа с заболеваниями пародонта без фоновой патологии, 2 группа с фоновой патологией. Взятие материала осуществлялось следующим образом: 0,05 мл десневой крови (получена в результате кюретажа патологических зубо-десневых карманов) брали удлиненной пастеровской пипеткой в пробирку, где находилось 0,05 мл 0,9 р-ра NaCl с консервантом крови "Глюгицир" (1 объем р-ра "Глюгицир" + 3 объема 0,9 р-ра NaCl), 0,05 мл крови из пальца больного брали скарификационным пером и капилляром. Вносили в другую пробирку с р-ром "Глюгицира" 1 4, обе пробирки центрифугировали 10 мин при 2000 об/мин, отделяли надосадочную жидкость и использовали ее для определения R-белков. Осадок эритроцитов отбрасывали.

Далее исследуемые сыворотки добавляли к тест-системе (анти R-сыворотка + эритроциты 0/1/Rh/+/) и определяли титр R-белка.

Титром R-белка считают последнее разведение сыворотки крови, которое дает ингибицию тест-системы (р-ция торможения гемагглютинации между анти R-сывороткой и эритроцитами человека 0/1/ Rh/+/).

Пример. Больная Н. (история болезни N 6604) обратилась с жалобами на кровоточивость и болезненность десен, неприятный запах изо рта. При объективном осмотре полости рта отмечалась гиперемия, отечность папиллярной и маргинальной десны. При зондировании межзубные сосочки кровоточили. Определялся над- и поддесневой зубной камень и патологический карман до 4 мм.

Диагноз: обострение хронического генерализованного пародонтита средней степени тяжести.

Дополнительные методы исследования: экскаватором произвели кюретаж патологических зубо-десневых карманов в области . В результате чего была получена десневая кровь, которая удлиненной пипеткой вносилась в пробирку с глюгициром и физ. р-ром в соотношении 1 4. Из пальца периферическую кровь брали скарификационным пером и капилляром и вносили в другую пробирку с глюгициром и физ. р-ром в соотношении 1 4. Обе пробирки центрифугировали 10 мин при 2000 об/мин, отделяли надосадочную жидкость и использовали ее для определения R-белков в десневой и периферической крови.

Результаты исследований приведены в таблице.

Анализ данных:
1) В десневой крови больных с заболеваниями тканей пародонта в 100 обнаруживается повышенный уровень R-белка (норма 11,6 12,6).

2) Сопутствующая патология не влияет на уровень R-белка в десневой крови, т. к. в обеих группах больных средние показатели R-белка в десневой крови статистически достоверно превышают показатели R-белка из периферической крови.

3) Определение уровня R-белка в десневой крови можно использовать как иммунологический тест диагностики заболеваний пародонта.

Преимуществом предлагаемого метода является: объективность оценки, простота технического исполнения, минимальное количество исследуемого материала, возможность ранней диагностики, налаженное производство реактивов и их небольшая стоимость. ТТТ1

Изобретение относится к медицине, а именно к стоматологии. Сущность предложения состоит в том, что заболевание тканей пародонта диагносцируют по содержанию R-белка в десневой жидкости. Преимущество предложения - в улучшении функциональных результатов. 1 табл.

Способ диагностики заболеваний тканей пародонта, заключающийся в определении белка в биологической жидкости ротовой полости, отличающийся тем, что берут кровь из десны и определяют R-белок и при уровне больше 12,6 диагностируют патологию.