ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ, ИНДУЦИРУЮЩАЯ БИОСИНТЕЗ ГЛУТАТИОНА, АКТИВНОСТЬ ГЛУТАТИОНТРАНСФЕРАЗЫ И ОКАЗЫВАЮЩАЯ АНТИТОКСИЧЕСКОЕ, РАДИОПРОТЕКТОРНОЕ И АНТИГИПОКСИЧЕСКОЕ ДЕЙСТВИЕ, И СПОСОБЫ ЛЕЧЕНИЯ, ПРОФИЛАКТИКИ И ЗАЩИТЫ С ЕЕ ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ Российский патент 1997 года по МПК A61K31/195 

Изобретение относится к медицине, а точнее касается нового лекарственного препарата, индуцирующего биосинтез глутатиона, активность глутатионтрансферазы и оказывающего антитоксическое, радиопротекторное и антигипоксическое действие.

Известно, что резистентность живых организмов в значительной мере обеспечивается глутатион-коньюгирующей системой путем детоксикации ксенобиотиков, эндогенных токсических соединений, свободных радикалов, а также участия в окислительно-восстановительных процессах и поддержания пула SH-групп.

В настоящее время в связи с резким ухудшением экологической и радиологической обстановки особое значение приобретает поиск полностью безопасных фармацевтических препаратов на основе естественных метаболитов, позволяющих повысить резистентность организма посредством избирательной индукции биосинтеза глутатиона и взаимодействующего с ним ферментного комплекса. Однако лекарственные средства в медицинской практике отсутствуют. Предпринимаются попытки использования в практической медицине непосредственно глутатиона или его производных (Известия Академии Наук Латвийской ССР, 1984, N 12 /449/, Зинатне, Рига, с. 77-92; Фармакология и токсикология, 1972, т. 4, с. 473-474; JP 6 304404; JP 7118730 DE 1443335; DE 2329819). Однако данный трипептид не обладает индуцирующим действием на глутатион-коньюгирующую систему (American Journal of Physiology, 1992, N 2, v. 32, American Physiological Society, Bethesda, USA, p. 348-352), не всегда оказывает нужный эффект ввиду его плохого проникновения в ткани (Annual review of biochemistry, 1983, v. 52, Annual reviews Ins. Paloalto, California, USA, p. 711-760; International Journal of Biochmistry, 1980, N 4, v. 12, Pergamon Press, Oxford New York Paris Frankfurt, p. 545-551), применяется в высоких дозах и имеет значительную себестоимость, что исключает возможность его широкого применения в медицинской практике.

Заявляемая фармацевтическая композиция является новой и в литературе не описана.

В основу изобретения положена задача создания новой высокоэффективной, нетоксичной, не обладающей побочными эффектами композиции, избирательно индуцирующей биосинтез глутатиона, глутатион-коньюгирующей системы и оказывающей антитоксическое, радиопротекторное и антигипоксическое действие.

Задача решена тем, что заявляемая композиция, включающая действующее вещество и фармацевтический носитель или растворитель, согласно изобретению содержит в качестве действующего вещества смесь L-глутаминовой кислоты, глицина и одной из серосодержащих аминокислот: цистеина или цистина, или метионина, или их фармацевтически приемлемых солей в весовом соотношении 1:1:1.

Фармацевтическая композиция может быть использована в виде порошка, раствора или таблеток. Предпочтительно она применяется в виде порошка или таблеток сублингвально с содержанием действующего вещества в количестве 0,1-0,2 г каждого ингредиента или его фармацевтически приемлемой соли на одну терапевтическую дозу. Предпочтительно фармацевтическая композиция содержит в качестве фармацевтического носителя метилцеллюлозу, а в качестве растворителя воду.

Заявляемая фармацевтическая композиция обладает высокоэффективным индуцирующим биосинтез глутатиона и глутатионконьюгирующей системы действием, оказывает антитоксический, радиопротекторный и антигипоксический эффект и находит применение для профилактики и лечения хронического алкоголизма, алкогольной абстиненции, интоксикаций на производствах химической промышленности, различных форм химической, мышечной и гипоксической гипоксии, при вынашивании и рождении ребенка, ишемии миокарда, пневмониях, а также в качестве радиопротектора для лиц, находящихся на территориях с повышенным уровнем радиации, особенно для беременных женщин и их плода.

Изобретение поясняется чертежом, на котором показано действие заявляемой композиции, включающей цистеин или цистин и различных доз глутатиона, на выживаемость крыс после γ-облучения в летальной дозе 10 Гр.

Заявляемая композиция представляет собой смесь L-глутаминовой кислоты, глицина и одной из серосодержащих аминокислот: цистеина или цистина, или метионина. Указанные аминокислоты являются естественными метаболитами, содержащимися в растительных и животных тканях, и представляют собой порошкообразные вещества белого цвета без запаха (серосодержащие аминокислоты имеют специфический запах меркаптосоединений), хорошо растворимые в воде (L-глутаминовая кислота и метионин малорастворимы), в щелочных растворах, трудно растворимые в этиловом спирте и маслах.

Фармакологическое действие заявляемой композиции изучено в эксперименте на животных и в клинике на людях-добровольцах.

Индуцирующее биосинтез глутатиона и активность глутатион S-трансферазы действие заявляемой композиции изучали на половозрелых крысах-самцах и самках линии Wistor массой 180-200 г.

Изучено влияние различных доз заявляемой композиции на биосинтез глутатиона и активность глутатион S-трансферазы в печени крыс-самцов линии Wistor. Опытным животным за 30 мин до декапитации под корень языка сублингвально вводили различные дозы заявляемой композиции в объеме 0,5 мл дистиллированной воды. Контрольной группе животных сублингвально вводили только соответствующий объем воды. Печень гомогенизировали и методом дифференциального центрифугирования получали ее микросомальную и постмикросомальную субфракции. Общее содержание глутатиона измеряли методами Ellman, Griffith. (Archives of biochemistry and biophysics, 1959, N 1, v. 82, Academic Press, Inc. New York, USA, p. 70-77; Analytical Biochemistry, 1980, N 1, v. 106, Academic Press, Inc. New York London, p. 207-212), а активность глутатион S-трансферазы методом Habig et al. (The journal of biological chemistry, 1974, N 22, v. 249, American Society of Biological Chemistry, Inc. Baltimore, USA, p. 7130-7139), используя в качестве субстрата I-хлор-2,4-динитробензол. Результаты исследования приведены в табл. 1.

Как видно из табл. 1, доза заявляемой композиции 6 мг/кг массы животного является оптимальной для индукции как биосинтеза глутатиона, так и активности глутатион S-трансферазы.

В печени крыс линии Wistor вышеописанным способом изучено индуцирующее биосинтез глутатиона и активность глутатион S-трансферазы действие глутатиона в дозе 6 мг/кг массы, цистеина в дозе 2 мг/кг массы и оптимальной дозы (6мг/кг массы) заявляемой композиции, включающей в качестве серосодержащей аминокислоты цистеин или цистин, или метионин. Полученные данные представлены в табл. 2.

Данные табл. 2 показывают, что ни трипептид непосредственно, ни его отдельно взятый предшественник практически не оказывают влияния на содержание глутатиона и активность глутатион S-трансферазы, в то время как заявляемая композиция индуцирует как биосинтез трипептида, так и ферментативную активность глутатион S-трансферазы.

Содержание глутатиона уже через 30 мин после введения заявляемой композиции увеличилось в печени животных в 2,7; 1,9 и 1,8 раза для композиции, включающей цистеин или цистин, или метионин соответственно по сравнению с теоретически расчетным, т. е. содержанием его при условии количественного использования ингредиентов заявляемой композиции в эквимолярном соотношении только печенью (средний вес составляет 4г) животных для биосинтеза глутатиона.

Кроме того, после введения заявляемой композиции наблюдалось увеличение активности мембраносвязанной формы глутатион S-трансферазы в 1,5 раза и цитозольной в 1,2 раза для композиции, включающей цистеин; в 1,3 и 1,4 раза соответственно для композиции, включающей цистин, и в 1,3 и 1,2 раза соответственно для композиции, включающей метионин.

Таким образом, заявляемая композиция обладает выраженным индуцирующим действием на глутатион-коньюгирующую систему, причем величину этого эффекта определяют используемые серосодержащие ингредиенты, располагающиеся по мере ослабления его в следующей последовательности: цистеин> цистин>метионин.

Антитоксическое действие заявляемой композиции изучали на половозрелых крысах-самцах линии Wistjr массой 180-200 г. Первой группе опытных животных за 30 мин до введения per os хлорбензола в дозе LD₅₀, составляющей для используемых крыс 1500 мг/кг массы, под корень языка сублингвально вводили заявляемую композицию в дозе 6 мг/кг массы; второй и третьей группам опытных животных за 30 мин до введения хлорбнезола в той же дозе сублингвально вводили глутатион в дозах 6 и 100 мг/кг массы соответственно; контрольной же группе животных за 30 мин до введения хлорбензола в той же дозе вводили соответствующий объем воды. Результаты исследования приведены в табл. 3.

Как видно из табл. 3, предварительное введение животным заявляемой композиции вызывает резкое снижение токсического действия хлорбензола. Причем антитоксический эффект трипептида значительно менее выражен, чем у его предшественников.

Изучено противоалкогольное действие заявляемой композиции у крыс-самцов линии Wistor. Первой группе опытных животных заявляемую композицию вводили сублингвально в дозе 6 мг/кг массы за 2 ч до внутрибрюшинного введения 25% -ного раствора этанола в дозе 4,5 мг/кг массы; второй и третьей группам опытных животных за 2 ч до внутрибрюшинного введения этанола в той же дозе сублингвально вводили глутатион в дозах 6 и 100 мг/кг массы соответственно; контрольной же группе животных за 2 ч до внутрибрюшинного введения этанола в той же дозе вводили соответствующий объем воды. Животных декапитировали через 2 ч после введения алкоголя и вышеописанными методами в печени определяли содержание глутатиона и измеряли активность глутатион S-трансферазы. Полученные данные представлены в табл. 4.

Данные табл. 4 показывают, что заявляемая композиция обладает алкопротекторным детоксицирующим действием, препятствуя истощению пула эндогенного глутатиона, причем антитоксический эффект ее значительно более выражен, чем у трипептида.

Радиопротекторное действие заявляемой композиции изучали на половозрелых самцах крыс линии Wistor массой 180-200 г и половозрелых самках белых крыс массой 180-200 г. Крыс подвергали g -облучению Co⁶⁰ на установке ГУБЭ-3000 при мощности дозы 1,45 Гр/мин.

Первой и второй группам из 20 животных за 30 мин до облучения вводили сублингвально заявляемую композицию, включающую цистеин или цистин соответственно в дозе 6 мг/кг массы; третьей и четвертой группам из 20 животных аналогично вводили глутатион в дозах 6 и 100 мг/кг массы соответственно; контрольной группе из 20 животных вводили соответствующий объем дистиллированной воды. Выживаемость и продолжительность жизни животных оценивали в течение 30 дней после облучения. Результаты исследования представлены на чертеже и в табл. 5.

Для изучения радиопротекторного действия заявляемой композици на молекулярном уровне у первой и контрольной групп животных до и на четвертые сутки после облучения в лимфоцитах периферической крови измеряли активность сукцинатдегидрогеназы (Arch. anat. gistol. embriol. 1969, v.5, p. 85)и сукцинат-цитохром C-оксидоредуктазы (Nature, 1960, v. 187, p. 85; Proc. оf the 8th Congress of the European Society of Haematology, Wien, 1961). Результаты исследования представлены в табл. 6.

Данные табл. 5 показывают, что при дозе 10 Гр, являющейся летальной для 100% контрольных животных, введение заявляемой композиции, включающей цистеин, обусловливает 35%-ную выживаемость и увеличивает среднюю продолжительность жизни до 10,2 сут против 7,1 сут в контроле, в то время как заявляемая композиция, включающая цистин, обусловливает 30%-ную выживаемость и увеличивает среднюю продолжительность жизни до 9,6 сут. Следует отметить, что глутатион в дозе 6 мг/кг массы не обладает протекторным действием, а введение его в дозе 100 мг/кг массы обусловливает лишь 10%-ную выживаемость и практически не увеличивает продолжительность жизни животных.

Кривые выживаемости крыс, представленные на чертеже, показывают, что динамика гибели контрольных животных обнаруживает два пика смертности (кривая 1), тогда как протекторное действие заявляемой композиции, включающей как цистеин (кривая 5), так и цистин (кривая 4), не только ликвидирует второй пик смертности, но и сдвигает первый во времени на момент появления второго пика у контрольных животных.

Глутатион в дозе 6 мг/кг массы не вызывает каких-либо изменений в динамике гибели крыс по сравнению с контрольными животными (кривая 2), в то время как его доза 100 мг/кг массы лишь незначительно повышает резистентность животных к радиационному воздействию (кривая 3).

Радиопротекторное действие заявляемой композиции, показанное в радиобиологических экспериментах по выживаемости животных, подтверждается цитохимическими исследованиями активности ферментов дыхательной цепи (табл. 6).

Как видно из табл. 6, активность обоих ферментов у контрольных животных после облучения значительно возрастает по сравнению с интактными, в то время как введение заявляемой композиции приводит к сохранению ее у опытных животных на прежнем уровне. Очевидно, заявляемая композиция модифицирует радиационное поражение, существенно уменьшая радиобиологические эффекты, что сопровождается снижением уровня энергопотребляющих процессов, таких как репарация ДНК, синтез белка, активный транспорт ионов, вследствие чего активность ферментов дыхательной цепи в пострадиационный период практически не изменяется и может служить перспективным тестом для оценки степени тяжести радиационного поражения.

Изучено радиопротекторное действие заявляемой композиции на эмбриогенез белых крыс.

Первой группе из 15 и второй группе из 16 беременных самок соответственно вводили сублингвально заявляемую композицию, включающую цистеин, в дозе 6 мг/кг массы один раз в сутки в период активного органогенеза с 7-го по 10-й день беременности; третьей и четвертой группам из 15 беременных самок аналогично вводили глутатион в дозе 100 мг/кг массы; контрольной группе животных из 14 беременных самок аналогично вводили соответствующий объем воды. Вторую, четвертую и контрольную группы животных на 10-й день беременности (после курса введения соответствующих препаратов) подвергали облучению на установке ГУТ-⁶⁰ Co-400в дозе 2 Гр; мощность поглощенной дозы радиации составляла 0,13 Гр/мин. На 20-й день беременности все группы животных подвергали эвтаназии, извлекали плоды, подсчитывали число желтых тел беременности и мест имплантации, количество живых и мертвых плодов, рассчитывали относительную гибель эмбрионов до и после имплантации. Плоды взвешивали, определяли их Краниокаудальный размер и исследовали макроанатомически и микроанатомически по методу Вильсона. Статическую обработку проводил, используя в качестве единицы наблюдения помет. При статистической обработке применяли критерий Стъюдента и критерий "и" Вилкоксона-Манн-Уитни.

Результаты исследования представлены в табл. 7 и 8. Данные таблиц показывают, что предварительное четырехкратное введение заявляемой композиции беременным крысах значительно снижает тератогенное действие радиационного облучения, существенно уменьшая количество плодов с аномалиями развития и тяжесть поражения головного мозга. Глутатион оказывает сходный радиопротекторный эффект лишь в дозе, почти в 20 раз превышающей таковую заявляемой композиции. При этом заявляемая композиции в используемой дозе не обладает эмбриотоксическим действием.

Полученные результаты позволяют отнести заявляемую композицию к радиопротекторам средней эффективности, причем ее максимальный протекторный эффект наблюдается при использовании в качестве серосодержащего ингредиента цистеина. Особый интерес представляет крайне низкая доза заявляемой композиции, что обеспечивает полное отсутствие токсического эффекта.

Антигипоксическое действие заявляемой композиции изучали на беременных самках белых крыс массой 250-300 г и их потомстве.

Исследование влияния заявляемой композиции на функционально-метаболическое состояние миокарда в условиях гипоксии проводили на модели перфузируемого сердца беременных крыс. Первой группе из 12 животных с 1 по 19 день беременности один раз в сутки под корень языка сублингвально вводили заявляемую композицию, включающую цистеин, в дозе 6 мг/кг массы; второй группе из 12 животных и третьей группе из 6 животных с 16 по 19 день беременности аналогично вводили ту же заявляемую композицию в дозе 6 мг/кг массы и глутатион в дозе 15 мг/кг массы соответственно; контрольной группе из 12 животных с 16 по 19 день беременности аналогично вводили соответствующий объем воды. На 20-й день беременности крыс подвергали эвтаназии, извлекали сердце и перфузировали его по Лангендорфу. Перфузионный раствор оксигенировали нормоксической (95% O₂ + 5% CO₂) и гипоксической ( 20% O₂ + 75% N₂ + 5% CO₂) газовыми смесями. Гипоксическое состояние моделировали после стабилизации исследуемых физиологических параметров сердца (приблизительно через 30 мин после начала перфузии). Этот момент принимали за нулевую точку отсчета и регистрировали частоту и силу сердечных сокращений. Вычисляли величину "работы", совершаемой сердцем, как произведение частоты и силы сердечных сокращений. Скорость потребления кислорода перфузируемым сердцем определяли полярографически. Полученные данные представлены в табл. 9.

Данные табл. 9 показывают, что заявляемая композиция обладает высокой антигипоксической активностью, существенно превосходящей таковую глутатиона. Уровень "работы" сердца при гипоксии у животных I и II групп существенно выше, чем у контрольных, а аналогичные показатели у животных II группы значительно превосходят таковые у животных III группы. Поскольку "работа" сердца является интегративным показателем, отражающим степень энергизации миокарда, то ее увеличение под влиянием заявляемой композиции характеризует энергизующее действие последней. Однако указанный эффект заявляемой композиции в отличие от действия известных антигипоксантов не сопровождается увеличением потребления кислорода гипоксическим миокардом, что свидетельствует о повышении эффективности АТФ-синтезирующих систем за счет увеличения отношения Р/О.

Механизм антигипоксического действия заявляемой композиции, по-видимому, заключается в снижении индуцируемым ею эндогенным глутатионом гипервосстановленности начального участка дыхательной цепи и восстановлении тем самым способности образования АТФ в первом пункте окислительного фосфорилирования. При этом поток электронов с начального участка дыхательной цепи не направляется к терминальным ее отделам, а используется в специфических для глутатиона реакциях, таких как пероксидазные или глутатион-S-трансферазные реакции восстановления гидроперекисей, содержание которых возрастает при гипоксии. Следует отметить, что антигипоксическое действие заявляемой композиции наиболее выражено при ее введении с 16 по 19 день беременности, поскольку это именно тот период, когда организм матери имеет минимальную защищенность от гипоксического воздействия, а в организме плода происходит метаболические перестройки и индукции ферментов, необходимые в родах и раннем постнатальном развитии, тогда вероятность гипоксического воздействия максимальна.

Таким образом, применение заявляемой композиции в качестве антигипоксанта наиболее целесообразно и эффективно в тот период, когда организм наиболее подвержен и чувствителен к гипоксическому фактору.

Изучено влияние заявляемой композиции на индивидуальную резистентность к гипоксии потомства крыс путем введения ее беременным самкам. Первой опытной группе из 6 животных с 16 по 19 день беременности один раз в сутки по корень языка сублингвально вводили заявляемую композицию, включающую цистеин, в дозе 6 мг/кг массы; второй опытной группе из 6 животных аналогично вводили глутатион в дозе 15 мг/кг массы; контрольной группе из 6 животных аналогично вводили соответствующий объем воды. Индивидуальную резистентность потомства опытных и контрольной групп крыс к острой гипоксической гипоксии у самцов и самок определяли барокамерным способом. Животных помещали в приточно-вытяжную барокамеру и моделировали подъем на "высоту" 11000 м. Измеряли время от момента достижения указанной "высоты" до появления у крыс второго агонального вдоха, так называемое резервное время (РВ), являющееся критерием устойчивости организма к гипоксии. Полученные данные представлены в табл. 10.

Как видно из табл. 10, новорожденные животные контрольных групп обладает повышенной устойчивостью к гипоксии, которая сохраняется у них весь период вскармливания (с 1 по 16 сут). В период отъема (с 16 до 30сут) происходит значительное снижение устойчивости крыс к гипоксии, что проявляется в резком уменьшении РВ. Подобное явление объясняется все большей зависимостью энергетического обмена от окисления углеводов и связанной с этим относительной физиологической нестабильностью организма.

Введение заявляемой композиции беременным самкам крыс обусловливает значительно более высокую, чем у контрольных животных, устойчивость потомства к острой гипоксической гипоксии. Молодые животные даже в период относительной физиологической нестабильности (с 16 по 30 сут) обнаруживают высокий уровень резистентности к гипоксии. Следует отметить, что глутатион оказывает аналогичные действие лишь в дозе в 2,5 раза превышающей таковую заявляемой композиции.

Полученные данные свидетельствуют о том, что заявляемая композиция, вводимая самке в последней трети беременности, стимулирует и у нее, и в организме плода развитие адаптационно-компесаторных механизмов, повышающих устойчивость к гипоксии. При этом защитные механизмы продолжают активно работать и в послеродовом периоде, особенно в периоды перинатального и ближайшего постнатального развития.

Таким образом, заявляемая композиция может быть использована как в качестве терапевтического, так и профилактического антигипоксанта энергизующего действия.

LD₅₀ заявляемой композиции определены на мышах (группа из 50 животных массой 25-30 г) и крысах (группа из 30 животных массой 200-250 г). Установлено, что при внутрижелудочном введении LD₅₀ заявляемой композиции, включающей цистеин или цистин, или метионин, составляет более 3000 мг/кг массы животного, следовательно заявляемая композиция является не токсичной.

Патоморфологическое исследование внутренних органов животных после многократного внутрижелудочного введения заявляемой композиции, включающей цистеин или цистин, или метионин, в течение 60 дней в дозах до 200 мг/кг массы животного не выявило их морфологических и патологических изменений.

Заявляемая композиция была испытана на 45 людях-добровольцах, страдающих хроническим алкоголизмом и хронической ишемической болезнью сердца.

Антитоксическое действие заявляемой композиции изучено на 30 больных мужчинах в возрасте от 20 до 25 лет, страдающих хроническим алкоголизмом I-II стадии (длительность потребления алкоголя от 5 до 20 лет). У 12 больных потребление алкоголя носило характер псевдозапоев, у 8 истинных запоев. Все пациенты наблюдались в период выраженных проявлений алкогольного абстинентного синдрома. Клинически у больных наблюдались вегетативно-астеническое расстройства (потливость, тахикардия, сухость во рту) и неврологические симптомы ( тремор пальцев рук, повышение сухожильных рефлексов, неточность движений и т. п. ) с нарушением сна. Пациенты контрольной группы (10 больных) получали дезинтоксикационную терапию с применение витаминов группы B. Пациенты опытной группы (20 больных) наряду с витаминотерапией принимали заявляемую композицию, включающую цистин, в дозе 6 мг/кг массы тела сублингвально 3 раза в день в течение недели.

Исследование показали, что уже через 20-30 мин после приема заявляемой композиции больные отчетливо ощущали ее положительное влияние. Так, субъективно опытная группа пациентов отмечала снятие напряжения и возникновение расслабления. Объективно одновременно наблюдалась уменьшение и даже исчезновение (у 11 из 20 больных) тремора пальцев рук, урежение частоты сердечных сокращений (с 94-98 до 82-88 уд/мин).

Прием заявляемой композиции в течение 7 дней показал, что у пациентов опытной группы уже на 2-е сут налаживался сон, исчезали тремор, а на 3-и сутки и тахикардия. Субъективно больные отмечали чувство бодрости и успокоения. У пациентов контрольной группы тахикардия, тремор и нарушение сна наблюдались до 6-7 дня эксперимента включительно.

Антигипоксическое действие заявляемой композиции изучено на 15 больных (8 женщин и 7 мужчин) в возрасте от 60 до 72 лет, страдающих хронической ишемической болезнью сердца с нарушением кровообращения I-II степени с длительностью заболевания от 1 до 3 лет. Пятеро больных в анамнезе перенесли инфаркт миокарда. У всех больных отмечались явления стенокардии, а на ЭКГ - явления дистрофии миокарда и синусовая тахикардия.

Вся группа больных принимала однократно сублингвально заявляемую композицию, включающую цистеин, в дозе 6 мг/кг массы; на вторые сутки те же больные принимали аналогично заявленную композицию, включающую цистин, в дозе 6 мг/кг массы; на третьи сутки больные получали аналогично глутаминовую кислоту в дозе 3 мг/кг массы; на четвертые сутки больные получали аналогично глутатион в дозе 6 мг/кг массы, а на пятые заявляемую композицию, включающую цистеин, в дозе 6 мг/кг массы в желатиновых капсулах внутрижелудочно. До и через 30 мин после приема вышеуказанных препаратов у больных измеряли частоту сердечных сокращений. В качестве контроля служили данные тех же больных, получавших аналогично сахарозу в дозе 6 мг/кг массы. Полученные результаты представлены в табл. 11.

Как видно из табл. 11, заявляемая композиция, включающая как цистеин, так и цистин, при сублингвальном введении обнаруживает значительный антигипоксический эффект, снижая у больных частоту сердечных сокращения. Кроме того, субъективно больные ощущали снятие тяжести в области сердца.

Следует отметить, что при введении внутрижелудочно заявляемой композиции последняя теряет свойства антигипоксанта, что свидетельствует о регулярном механизме ее действия.

Введение непосредственно трипептида не влияет на частоту сердечных сокращений, а один из его предшественников глутаминовая кислота, помимо учащения пульса у всех больных, вызвала у пяти из них экстрасистолию продолжительностью 40-90 мин, а у четырех боли в сердце.

Таким образом, результаты лабораторных и клинических исследований показали, что заявляемая композиция в отличие от глутатиона и его предшественников индуцирует глутатион-коньюгирующую систему и обладает выраженным антитоксическим, антигипоксическим и радиопротекторным действием.

Заявляемая композиция полностью безопасна и не имеет противопоказаний.

Использование: в медицине, для повышения резистентности организма посредством избирательной индукции биосинтеза глутатиона и активности глутатионтрансфезы. Сущность изобретения: фармацевтическая композиция содержит фармацевтически приемлемый носитель и в качестве действующего вещества - эффективное количество смеси L -глутаминовой кислоты, глицина и серосодержащей аминокислоты, выбранной из группы, включающей цистеин, цистин и метионин, при массовом соотношении компонентов 1:1:1. Фармацевтическая композиция может быть приготовлена в виде порошка, таблетки или раствора, при этом она содержит каждый из указанных компонентов в количестве от 0,1 до 0,2 г на единичную дозу. Фармацевтически приемлемый носитель представляет собой воду или метилцеллюлозу. Новая фармацевтическая композиция оказывает антитоксическое, радиопротекторное и антигипоксическое действие. Способ профилактики и лечения хронического алкоголизма, алкогольной абстиненции, интоксикации ароматическими углеводородами, а также повышения резистентности к гипоксии и защиты от радиационного поражения заключается в сублингвальном введении эффективного количества новой композиции. 6 с. и 2 з.п. ф-лы, 11 табл., 1 ил.

1. Фармацевтическая композиция, индуцирующая биосинтез глутатиона, активность глутатионтрансферазы и оказывающая антитоксическое, радиопротекторное и антигипоксическое действие, для сублингвального введения, характеризующаяся тем, что в качестве действующего вещества она содержит эффективное количество смеси L-глутаминовой кислоты, глицина и серосодержащей аминокислоты, выбранной из группы, включающей цистеин, цистин и метионин, или смеси фармацевтически приемлемых солей указанных аминокислот при массовом соотношении компонентов 1 1 1, а также содержит фармацевтически приемлемый носитель. 2. Композиция по п.1 в виде раствора, порошка или таблеток, характеризующаяся тем, что она содержит каждый из указанных компонентов в количестве 0,1 0,2 г на одну дозу. 3. Композиция по п.2, характеризующаяся тем, что она содержит в качестве фармацевтически приемлемого носителя воду или метилцеллюлозу. 4. Способ профилактики и лечения хронического алкоголизма и алкогольного абстинентного синдрома путем введения лекарственного средства, содержащего аминокислоту, отличающийся тем, что в качестве лекарственного средства, содержащего аминокислоту, вводят сублингвально фармацевтическую композицию по п.1 в дозе 6 мг/кг массы 3 раза в сут. 5. Способ профилактики интоксикаций ароматическими углеводородами или их производными у теплокровных животных путем введения лекарственного средства, отличающийся тем, что за 30 мин до воздействия токсического агента в качестве лекарственного средства вводят сублингвально единовременно фармацевтическую композицию по п.1 в дозе 6 мг/кг массы. 6. Способ защиты от радиационного поражения теплокровных животных путем введения лекарственного средства, содержащего аминокислоту, отличающийся тем, что за 30 мин до начала радиационного облучения в качестве лекарственного средства, содержащего аминокислоту, вводят сублингвально единовременно фармацевтическую композицию по п.1 в дозе 6 мг/кг массы. 7. Способ защиты от радиационного поражения потомства теплокровных животных путем введения лекарственного средства, содержащего аминокислоту, отличающийся тем, что самкам в период беременности до радиационного облучения в качестве лекарственного средства, содержащего аминокислоту, вводят сублингвально фармацевтическую композицию по п.1 в дозе 6 мг/кг массы 1 раз в сут с 7-го по 10-й день беременности. 8. Способ профилактики и лечения гипоксических состояний путем сублингвального введения лекарственного средства, отличающийся тем, что в качестве лекарственного средства вводят фармацевтическую композицию по п.1 в дозе 6 мг/кг массы 1 раз в сут.