АЛКОГОЛЯТЫ МЕТАЛЛОВ Российский патент 1997 года по МПК C07D305/14 

Изобретение относится к новым алкоголятам металлов, применимым при получении производных баккатина III и 10-деацетил-баккатина III, таких, как таксол, таксатор и других производных таксана, которые обладают биологической активностью.

Таксановое семейство терпенов, членом которого является таксол, привлекло значительный интерес специалистов как в области биологии, так и химии. Таксол является обещающим химиотерапевтическим средством для лечения рака с широким спектром активности против лейкемии и опухолей. Таксол имеет следующую структуру:

Благодаря этой многообещающей активности таксол в настоящее время подвергается клиническим испытаниям как во Франции, так и в Соединенных Штатах.

Поставка таксола для клинических испытаний в настоящее время обеспечивается за счет получения коры Taxus brevifolia (Тис тихоокеанский). Однако таксол найден в коре этих медленно растущих вечно зеленых растений лишь в незначительных количествах, что вызывает существенное беспокойство из-за ограниченной поставки таксола, которая не удовлетворит спрос. Вследствие этого химики в последние годы попытались найти устойчивый синтетический способ получения таксолов. До настоящего времени результаты не были полностью удовлетворительными.

Один способ, который был предложен, направлен на синтез тетрациклического ядра таксана из рыночных химикатов. Синтез таксузина, аналогичного таксолу, был изложен авторами Holton, et al. в JACS 110, 6558 (1988). Несмотря на прогресс, достигнутый при этом подходе, конечный полный синтез таксола, тем не менее, представляет собой многоступенчатый, утомительный и дорогостоящий процесс.

Альтернативный подход к получению таксола был описан авторами Greene, et al. в JACS 110, 5917 (1988) и включает в себя использование аналога таксола, 10-деацетил-баккатина III, который имеет структуру формулы II, приведенной ниже:

10-деацетил-баккатин III более доступен, чем таксол, так как он может быть получен из игл Taxus baccata. Согласно методу Greene et al. 10-деацетилбаккатин III превращают в таксол путем присоединения C-10 ацетильной группы и путем присоединения боковой цепи сложного C-13-β-амидоэфира путем этерификации C-13 спирта при помощи звена b-амидокарбоновой кислоты. Хотя этот подход требует относительно мало этапов, синтез звена b-амидокарбоновой кислоты представляет собой многоэтапный процесс, сопровождающийся низким выходом, и реакция сочетания является трудоемкой и также приводит к низкому выходу. Однако эта реакция сочетания представляет собой ключевой этап, который требуется при каждом рассмотренном синтезе таксола или биологически активного производного таксола, так как авторами Wani et al. в JACS 93, 2325 (1971) было показано, что присутствие боковой цепи сложного b-амидоэфира в C13 требуется для обеспечения противоопухолевой активности.

Позднее в пат. США авторами Colin et al. N 4.814.470 сообщалось, что производные таксола формулы III, приведенной ниже, обладают значительно большей активностью, чем производные таксола (I).

R' обозначает атом водорода или ацетил и один из радикалов R'' и R''' обозначает оксигруппу. А другой обозначат третбутоксикарбониламино и их стереоизомерные формы, а также их смеси.

Согласно пат. США 4.418.470 авторов Colin et al. продукты общей формулы (III) получают посредством воздействия натриевой соли третбутил-N- хлоркарбамата на продукт общей формулы:

в которой R' обозначает ацетил или 2,2,2-трихлорэтоксикарбонильный радикал, с последующим замещением группы или групп 2,2,2-трихлорэтоксикарбонила атомом водорода. Однако в пат. США N 4.924.011 авторами Denis et al. сообщается, что этот процесс ведет к получению смеси изомеров, которая должна быть разделена, и как результат не весь баккатин III или 10-деацетилбаккатин III, используемый для получения продукта общей формулы (IV), может быть преобразован в продукт общей формулы (III).

Стремясь внести усовершенствования в работу авторов Colin et al. Denis et al. описывают иной процесс получения производных баккатина III или 10- деацетилбаккатина III общей формулы V

в которой R' обозначает атом водорода или ацетил, где кислота общей формулы VI

в которой R₁ обозначает окси-защитную группу, конденсируется при помощи производного таксана общей формулы VII:

в которой R₂ обозначает ацетильную окси-защитную группу, а R₂ обозначает окси-защитную группу, и защитные группы R₁, R₃ и там, где имеет место, R₂, замещают атомом водорода. Однако этот способ требует относительно суровые условия, проходит с плохим превращением и обеспечивает выходы ниже оптимальных.

Основная трудность, остающаяся при синтезе таксола и других потенциальных противоопухолевых веществ, состоит в отсутствии баккатина III и производных 10-деацетил-баккатина III, которые были активированы в положении кислорода C-13. Благодаря созданию таких производных было бы возможным прикрепление боковой цепи сложного β-амидоэфира с высоким выходом и таким образом облегчило бы синтез таксола, также как и относящихся к нему противоопухолевых веществ, имеющих модифицированный набор заместителей по ядру или модифицированную боковую цепь C-13.

Другая важная трудность, возникающая при синтезе таксола, состоит в том, что известные процессы присоединения боковой цепи сложного b-амидоэфира в положении C-13 обычно недостаточно диастереоселективны. Поэтому предшественник боковой цепи должен быть приготовлен в оптически активной форме для получения требуемого диастереоизомера во время присоединения.

Одним из предметов изобретения, следовательно, является получение активированных производных баккатина III и 10-деацетил-баккатина III, которые позволяют присоединять боковую цепь сложного b-амидоэфира с высоким выходом, получение таких производных, которые позволяют использовать рацемическую смесь предшественника боковой цепи, устраняя необходимость дорогостоящего, длительного способа разделения этого предшественника на его соответствующие изомерные формы, и получение таких производных, которые позволяют получать таксаны, имеющие большее разнообразие в боковой цепи.

Таким образом, направление настоящего изобретения может быть определено как получение алкоголята металла, имеющего формулу I:

в которой T₁ обозначает атом водорода или окси-защитную группу, Z обозначает -OT₂ или -OCOCH₃, T₂ обозначает атом водорода или окси-защитную группу, а M обозначает металл, предпочтительно Li, Mg, Na, K или Ti, а Ph обозначает фенил.

Алкоголяты металлов (1) представляют собой активированные производные баккатина III и/или 10-деацетил-баккатина III и имеют особую полезность для процесса получения таксола, таксатора и других биологически активных производных таксана. Согласно изобретению алкоголяты металлов (1) вводят в реакцию β-лактамом (2) для получения промежуточного соединения в виде сложного b-амидоэфира. Затем промежуточное соединение преобразуется в биологически активное производное таксана.

b-лактам (2) имеет общую формулу:

в которой R₁ обозначает -OR₆, -SR₇ или -NR₈R₉;
R₂ обозначает атом водорода, алкил, алкенил, алкинил, арил или гетероарил;
R₃ и R₄ независимо друг от друга обозначают атом водорода, алкил, алкенил, алкинил, арил, гетероарил или ацил, при условии, однако, что R₃ и R₄ оба не являются ацилом;
R₅ обозначает -COR₁₀, -COOR₁₀, -COSR₁₀, -CONR₈R₁₀, -SO₂R₁₁ или -POR₁₂R₁₃;
R₆ обозначает алкил, алкенил, алкинил, арил, гетероарил или окси-защитную группу;
R₇ обозначает алкил, алкенил, алкинил, арил, гетероарил или сульфгидрил-защитную группу;
R₈обозначает атом водорода, алкил, алкенил, алкинил, арил или гетероарил;
R₉ обозначает амино-защитную группу;
R₁₀ обозначает алкил, алкенил, алкинил, арил или гетероарил;
R₁₁ обозначает алкил, алкенил, алкинил, арил, гетероарил, -OR₁₀ или NR₈R₁₄;
R₁₂ и R₁₃ независимо друг от друга обозначают алкил, алкенил, алкинил, арил, гетероарил, -OR₁₀ или -NR₈R₁₄; и
R₁₄ обозначает атом водорода, алкил, алкенил, алкинил, арил или гетероарил.

Согласно изобретению R₅ из β-лактама (2) предпочтительно обозначает -COR₁₀, при этом R₁₀ обозначает арил, n-замещенный фенил или низший алкоксил, и наиболее предпочтительно фенил, метокси, этокси, третбутокси ("tBuO"; (CH₃)₃CO-) или группа
,
где X обозначает Cl, Br, F, CH₃O- или NO₂-. Предпочтительно R₂ и R₄ обозначают атом водорода или низший алкил. R₃ предпочтительно обозначает арил, наиболее предпочтительно нафтол, фенил,
,
где X имеет указанные выше значения, Me обозначает метил и Ph обозначает фенил. Предпочтительно R₁ выбирают из -OR₆, -SR₇ или -NR₈R₉, где R₆, R₇ и R₉ обозначают окси-группу, сульфгидрил и амино-защитные группы соответственно, а R₈ обозначает атом водорода, алкил, алкенил, алкинил, арил или гетероарил. Наиболее предпочтительно, R₁ обозначает -OR₆, где R₆ обозначает триэтилсилил ("TES"), 1-этоксиэтил ("EE"), или 2,2,2- трихлорэтоксиметил.

β-лактам-алкильные группы либо в чистом виде, либо с различными заместителями, определенными выше, предпочтительно представляют собой низший алкил, содержащий от одного до шести атомов углерода в основной цепи и до 15 атомов углерода. Они могут иметь прямую или разветвленную цепь и включать метил, этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил, третбутил, арил, гексил и тому подобное.

b-лактам-алкенильные группы в чистом виде или с различными указанными выше заместителями представляют собой низший алкенил, содержащий от двух до шести атомов углерода в главной цепи и до 15 атомов углерода. Они могут иметь прямую или разветвленную цепь и включать этенил, пропенил, изопропенил, бутенил, изобутенил, арил, гексенил и тому подобное.

b-лактам-алкинильные группы в чистом виде или с различными заместителями, указанными выше, предпочтительно представляют собой низший алкинил, содержащий от двух до шести атомов углерода в главной цепи и до 15 атомов углерода. Они могут иметь прямую или разветвленную цепь и включать этинил, пропинил, бутинил, изобутинил, арил, гексенил и тому подобное.

Описанные b-лактам-арильные составляющие в чистом виде или с различными заместителями содержат от 6 до 15 атомов углерода и включают в себя фенил, a-нафтил или b-нафтил и т.д. Заместители включают алканоксигруппу, защищенную оксигруппу, атом галогена, алкил, арил, алкенил, ацил, ацилокси-, нитро-, амино-, амидо- группу и т.д. Фенил является наиболее предпочтительным арилом.

Как отмечено выше, R₁ из b-лактама (2) может представлять собой -OR₆, где R₆ обозначает алкил, ацил, этоксиэтил ("EE"), триэтилсилил ("TES"), 2,2,2-трихлорэтоксиметил или другую гидрокси-защитную группу, такую как ацетали и простые эфиры, т.е. метоксиметил ("MOM"), бензилоксиметил; сложные эфиры, такие как ацетаты; карбонаты, такие как метилкарбонаты; и алкил и арилсилил, такой как триэтилсилил, триметилсилил, диметилтретбутилсилил, диметиларилсилил, диметилгетероарилсилил и триизопропилсилил и тому подобное. Ряд различных защитных групп для гидроксильной группы и синтез могут быть найдены в работе "Protective Goups in Organic Synthesis" автора T.W. Greene, изд. John Wiley and Sons, 1981. Выбранная гидроксизащитная группа должна легко удаляться при достаточно мягких условиях, например, в 48% HF, ацетонитриле, пиридине или 0,5% HCl/воде/этаноле и/или цинке, уксусной кислоте, с тем чтобы не разрушать связь сложного эфира или других заместителей промежуточного соединения таксола.

Также, как отмечено ранее, R₇ может представлять собой сульфгидрилзащитную группу, а R₉ может являться амино-защитной группой. Сульфгидрилзащитные группы включают в себя гемитиоацетали, такие как 1-этоксиэтил и метоксиметил, сложные тиоэфиры или тиокарбонаты. Амино-защитные группы включают карбаматы, например, 2,2,2-трихлорэтилкарбамат или третбутилкарбамат. Ряд сульфгидрил- и амино-защитных групп может быть найден в вышеуказанном тексте автора T.W.Greene.

b-лактамы (2) могут быть приготовлены из легкодоступных материалов, как это показано на схемах A и B, приведенных в конце описания.

реагенты: (a) триэтиламин, CH₂Cl₂, 25^oC, 18 ч; (b) 4 эквивалента церий-аммоний-нитрата, CH₃CN, -10^oC, 10 мин; (c) KOH, ТГФ, H₂O, 0^oC, 30 мин; (d) простой этил-виниловый эфир, ТГФ, толуолсульфокислота (кат.), 0^oC, 1,5 ч; (e) n-бутиллитий, простой эфир, -78^oC, 10 мин; хлористый бензоил, -78^oC, 1 ч; (f) литий-диизопропил-амид, ТГФ, -78^oC до 50^oC; (g) литий-гексаметилдисилазид, ТГФ, -78^oC до 0^oC; (h) ТГФ, 78^oC до 25^oC, 12 ч.

Исходные материалы легко доступны. На схеме А a-ацетокси-ацетил-хлорид получают из гликолевой кислоты и в присутствии третичного амина циклоконденсируют с иминами, полученными из альдегидов и n-метоксианилина, для получения 1-N-метоксифенил-3-ацилокси-4-арилазетидин-2-онов. N-метоксифенильная группа может быть легко удалена путем окисления церий-аммоний-нитратом, а ацилокси-группа может быть гидролизована при стандартных условиях, известных для специалистов в данной области, для получения 3-окси-4-арилазетидин-2-онов. 3-гидроксильная группа защищена 1-этоксиэтилом, но она может быть защищена рядом стандартных защитных групп, таких, как триэтилсилильная группа или другие триалкил (или арил) силильные группы. На Схеме В этил-a-триэтилсилилоксиацетат легко и получают из гликолевой кислоты.

Рацемический b-лактам может быть растворен в чистых энантиомерах до защиты путем перекристаллизации соответствующих сложных 2-метокси-2- (трифторметил) эфиров фенилуксусной кислоты. Однако описанная ниже реакция, в которой присоединяется боковая цепь сложного b-амидо-эфира, имеет то преимущество, что обладает высокой диастереоселективностью, позволяя таким образом использовать рацемическую смесь предшественника боковой цепи.

3-(1-этоксиэтокси)-4-фенилазетидин-2-он со Схемы A и 3-(1- триэтилсилилокси)-4-фенилазетидин-2-он со Схемы B могут быть преобразованы в b -лактам (2) путем обработки основанием, предпочтительно n-бутиллитием, и ацилхлоридом, сульфонилхлоридом, фосфинилхлоридом, фосфорилхлоридом или алкилхлорформиатом при -78^oC или ниже.

Предпочтительно алкоголяты металлов получают путем введения в реакцию спирта, имеющего от двух до четырех колец ядра таксана и гидроксильной группы C-13 с металлоорганическим соединением в подходящем растворителе. Наиболее предпочтительно, спирт представляет собой защищенный баккатин III, в частности, 7-O-триэтилсилил-баккатин III (который может быть получен согласно описанию авторов Greene et al. в JACS 110, 5917 (1988) или другими способами), или 7,10-бис-O-триэтилсилил-баккатин III.

Как изложено в работе авторов Greene et al. 10-деацетил-баккатин III преобразуют в 7-O-триэтилсилил-10-деацетил-баккатин III согласно схеме реакции (3) (4а), приведенной в конце описания.

При так называемых тщательно оптимизированных условиях 10-деацетилбаккатин III вводят в реакцию с 20 эквивалентами (C₂H₅)SiCl при 23^oC в атмосфере аргона в течение 20 ч в присутствии 50 мл пиридина/ммоль 10-деацетил-баккатина III для получения 7-триэтилсилил-10-деацетил-баккатина III (4а) в виде продукта реакции с выходом 84-86% после очистки.

Продукт реакции (4а) затем ацетилируют с помощью 5 эквивалентов CH₃COCl и 25 мл пиридина/ммоль 4а при 0^oC в атмосфере аргона в течение 48 ч для получения с выходом 86% 7-O-триэтилсилил-баккатина III (4b), как сообщается авторами Greene et al. В JACS 110, 5917-5918 (1988).

В качестве альтернативы 7-триэтилсилил-10-деацетил-баккатин III (4а) может быть защищен кислородом на C-10 с помощью кислото-неустойчивой гидрокси-защитной группы. Например, после обработки n-бутиллитием в ТГФ с последующей обработкой триэтилсилилхлоридом (1,1 мол. экв.) при 0^oC получают 7,10-бис-O-триэтилсилил-баккатин III (4c) с выходом 95% Таким же образом (4а) может быть преобразован в 7-O-триэтилсилил-10-(1-этоксиэтил)- баккатин III (46) с выходом 90% путем обработки избытком простого этилвинилового эфира и каталитического количества метанолсульфокислоты. Эти способы получения изображены на схеме I реакции, приведенной в конце описания.

Производные 7-O-триэтилсилил-баккатина III (4b, 4c или 4d) вводят в реакцию с металлоорганическим соединением, таким как n-бутиллитий, в таком растворителе, как тетрагидрофуран (ТГФ), для получения производного алкоголята металла 13-O-литий-7-O-триэтилсилил-баккатина III (5b, 5c или 5d), как показано на схеме II реакции, приведенной в конце описания.

Как показано в следующей схеме III реакции,приведенной в конце описания, производное 13-O-литий-7-O-триэтилсилил-баккатина III (5b, 5c или 5d) реагирует с b -лактамом (2) для получения промежуточного соединения (6b, 6c или 6d), в котором гидроксильные группы C-7 и C-2' защищены группой триэтилсилила. Триэтилсилильные и этоксиэтильные группы затем гидролизуют при мягких условиях так, чтобы не разрушить связь сложного эфира или заместителей таксана.

T₁ обозначает окси-защитную группу; M обозначает атом металла: Ph обозначает фенил; Ac обозначает ацетил; и радикалы R₁-R₅ имеют указанные выше значения.

Заместитель металла M из алкоголята металла (3) представляет собой лантанид или актиноид или элемент группы IA, IIA, IIIA или переходный металл, т. е. металл групп IIIA, IVA, VA или VIA. Предпочтительно он представляет собой металл группы IA, IIA или переходный металл, наиболее предпочтительно литий, магний, натрий, калий или титан.

Как преобразование спирта в алкоголят металла, так и последующий синтез производное таксана могут происходить в том же самом реакционном сосуде. Предпочтительно, b -лактам добавляют в реакционный сосуд после образования в нем алкоголята металла.

Металлоорганическое соединение n-бутиллития предпочтительно используется для преобразования баккатина III или 10-деацетил-баккатина III в соответствующий алкоголят металла, но также могут быть использованы другие источники металлического заместителя, такие как литий-диизопропиламид, другие амиды лития или магния, этилмагний бромид, метилмагний бромид, другие литий-органические соединения, другие магний-органические соединения, натрий-органическое соединение, титан-органическое соединение, цирконий-органическое соединение, цинк-органическое соединение, кадмий- органическое соединение или калий-органическое соединение или соответствующие амиды. Металлоорганические соединения доступны или могут быть получены известными методами, включая восстановление органических соединений галогенидов металлом. Предпочтительны низшие алкил-галогениды. Например, бромистый бутил может быть введен в реакцию с металлическим литием в простом диэтиловом эфире для получения раствора н-бутиллития следующим образом:

В качестве альтернативы алкоголят лития может быть подвергнут обмену с галоидами металлов для образования алкоголятов алюминия, бора, церия, кальция, циркония или цинка.

Хотя ТГФ является предпочтительным растворителем для реакционной смеси, также могут подойти другие эфирные растворители, такие как диметоксиэтан, или же ароматические растворители. Некоторые растворители, включая некоторые галогенсодержащие растворители и некоторые прямоцепные углеводороды с прямой цепью, в которых реагенты слишком малорастворимы, непригодны. Другие растворители непригодны по другим причинам. Например, сложные эфиры непригодны для использования с некоторыми металлоорганическими соединениями, такими как n-бутиллитий из-за несовместимости с ними.

Хотя приведенная схема реакции идеально направлена на синтез таксола, таксатора и других производных таксана, примеры которых приведены здесь, она может быть использована с модификациями в отношении β-лактама или тетрациклического алкоголята металла для получения других соединений. Так, бета-лактам и тетрациклический алкоголят металла могут быть получены из природных или искусственных источников для получения других синтетических таксолов, производных таксола, 10-деацетилтаксолов и энантиомеров и их диастереомеров, рассматриваемых в рамках изобретения.

Способ согласно изобретению также имеет важное преимущество в том, что обладает высокой диастереоселективностью. Поэтому могут быть использованы рацемические смеси предшественников боковой цепи. Может быть достигнута значительная экономия стоимости, так как здесь не требуется разлагать рацемические бета-лактамы на их чистые энантиомеры. Дополнительная экономия стоимости может быть достигнута благодаря тому, что требуется меньше предшественника боковой цепи, например, на 60-70% по отношению к предшествующим процессам.

Пример 1 Получение 2'-этоксиэтил-7-триэтилсилил-таксола и потом таксола из рацемического b-лактама. К раствору 7-триэтилсилил-баккатина III (20 мг, 0,028 ммоля) в 1 мл ТГФ при -78^oC добавляют по каплям 0,17 мл 0,164 М раствора nBuLi в гексане. Спустя 30 мин при -78^oC к смеси по каплям добавляют раствор цис-1-бензоил-3-(1-этоксиэтокси)-4-фенилазетидин-2-она (47,5 мг, 0,14 ммоля) в 1 мл ТГФ. Этому раствору дают медленно нагреться (в течение 1,5 ч) до 0^oC и затем его перемешивают при 0^oC в течение 1 ч и добавляют 1 мл 10%-ного раствора AcOH в ТГФ. Смесь делят между насыщенным водным NaHCO₃ и 60/40 этилацетатом/гексаном. Выпаривание органического слоя дает остаток, который очищают при помощи быстрой хроматографии для получения 23 мг (80%) (2'R,3'S)-2'-этоксиэтил-7-триэтилсилилтаксола и 3,5 мг (13%) 2',3'-эпи (2'S, 3'R) -2'-этоксисилил-7-триэтилсилилтаксола. 5 мг пробы (2'R,3'S)-2'-этоксиэтил-7-триэтилсилилтаксола растворяли в 2 мл этанола и добавляют 0,5 мл 0,5% -ного водного раствора HCl. Смесь перемешивают при 0^oC в течение 30 ч и разбавляют 50 мл этилацетата. Раствор экстрагируют при помощи 20 мл насыщенного водного раствора бикарбоната натрия, высушивают на сульфате натрия и концентрируют. Остаток очищают при помощи быстрой хроматографии для получения 4,5 мг (примерно 90%) таксола, который идентичен аутеничной пробе во всех отношениях. Пробу объемом в 5 мг 2',3'-эпи(2'S,3'R)-2'-этоксиэтил-7-триэтилсилилтаксола растворяют в 2 мл этанола и добавляют 0,5 мл 0,5%-ного водного раствора HCl. Смесь перемешивают при 0^oC в течение 30 ч и разбавляют 50 мл этилацетата. Раствор экстрагируют при помощи 20 мл насыщенного водного раствора бикарбоната натрия, сушат на сульфате натрия и концентрируют. Остаток очищают при помощи быстрой хроматографии для получения 4,5 мг (примерно 90%) 2',3'-эпитаксола.

Пример 2. Получение 2',7-(бис)триэтилсилил-таксола и впоследствии таксола, из рацемического b-лактама. К раствору, содержащему 7-триэтилсилил-баккатин III (100 мг, 0,143 ммоля) в 1 мл ТГФ, при -45^oC по каплям добавляют 0,087 мл 1б63М раствора nBuLi в гексане. Спустя 1 ч при -45^oC к смеси по каплям добавляют раствор цис-1-бензоил-3-триэтилсилилокси-4-фенилазетидин-2-она (274 мг, 0,715 ммоля) в 1 мл ТГФ. Раствору дают нагреться до 0^oC и выдерживают при 0^oC в течение 1 ч. Добавляют 1 мл 10-кого раствора AcOH в ТГФ. Смесь разделяют на насыщенный водный NaHCO₃ и 60/40 этилацет/гексан. После выпаривания органического слоя получают остаток, который очищают при помощи быстрой хроматографии с последующей перекристаллизацией для получения 131 мг (85%) (2'R,3'S)-2',7-(бис)триэтилсилилтаксола и 15 мг (10%) 2',3'-эпи (2'S, 3'R)-2', 7-(бис)триэтисилилтаксола. К раствору, содержащему 121,3 мг (0,112 ммоля) (2'R,3'S)-2',7- (бис)триэтилсилилтаксола в 6 мг ацетонитрила и 0,3 мл пиридина при 0^oC добавляют 0,9 мл 48%-ного водного HP. Смесь перемешивают при 0^oC в течение 8 ч, затем при 25^oC в течение 6 ч. Смесь разделяют между насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и этилацетатом. После выпаривания раствора этилацетата получают 113 мг материала, который очищают при помощи быстрой хроматографии и перекристаллизации для получения 94 мг (98%) таксола, который идентичен подлинной пробе во всех отношениях. К раствору из 5 мг (2'R,3'S)-2',7-(бис)триэтилсилилтаксола в 0,5 мл ацетонитрила и 0,03 мл пиридина при 0^oC добавляют 0,09 мл 48%-ного водного НF. Смесь перемешивают при 0^oC в течение 8 ч, затем при 25^oC в течение 6 ч. Смесь разделяют на насыщенный водный бикарбонат натрия и этилацетат. После выпаривания раствора этилацетата получают 5 мг материала, который очищают при помощи быстрой хроматографии и перекристаллизации для получения 4,6 мг (примерно 95%) 2',3'-эпитаксола.

Пример 3. Получение таксатора. К раствору, содержащему 7,10-бис-триэтилсилил-баккатин III (200 мг, 0,248 ммоля) в 2 мл ТГФ, при -45^oC по каплям добавляют 0,174 мл 1,63 М раствора nBuLi в гексане. После выдерживания в течение 0,5 ч при -45^oC к смеси добавляют по каплям раствор цис-1-(трет. бутоксикарбонил)-3- триэтилсилилокси-4-фенилазетедин-2-она (467 мг, 1,24 ммоля) в 2 мл ТГФ. Раствор нагревают до 0^oC и выдерживают при этой температуре в течение 1 ч, после чего добавляют 1 мл 10%-ного раствора AcOH в ТГФ. Смесь разделяют на насыщенный водный NaHCO₃ и 60/40 этилацетат/гексан. После выпаривания органического слоя получают остаток, который очищают фильтрованием через силикагель для получения 280 мг сырого 2',7,10-трис-триэтилсилилтаксотера. К раствору из 280 мг сырого продукта, полученного при предшествующей реакции, в 12 мл ацетонитрила и 0,6 мл пиридина при 0^oC добавляют 1,8 мл 48%-ного водного НР. Смесь перемешивают при 0^oC в течение 3 ч, затем при 25^oC в течение 13 ч и разделяют на насыщенный водный раствор бикарбоната натрия и этилацетат. После выпаривания раствора этилацетата получают 215 мг материала, который очищают при помощи быстрой хроматографии для получения 190 мг (95%) таксатора, который перекристаллизуют из метанола/воды. Все аналитические и спектральные данные идентичны данным, приведенным для таксатора в пат. США 4.814.470.

Пример 4.

где N_p2 обозначает

Получение 3'-десфенил-3'-(2-нафтил)-таксола. К раствору, содержащему 7-триэтилсилил-баккатин III (200 мг, 0,286 ммоля) в 2 мл ТГФ, при -45^oC по каплям добавляют 0,174 мл 1,63М раствора nBuli в гексане. После выдерживания в течение 0,5 ч при -45^oC к смеси по каплям добавляют раствор цис-1-бензоил-3-триэтилсилилокси-4-(2- нафтил)азетидин-2-она (620 мг, 1,43 ммолей) в 2 мл ТГФ. Раствор нагревают до 0^oC и выдерживают при этой температуре в течение 1 ч, после чего добавляют 1 мл 10%-ного раствора AcOH в ТГФ. Смесь разделяют на насыщенный водный NaHCO₃ и 60/40 этилацетат/гексан. После выпаривания органического слоя получают остаток, который очищают фильтрованием через силикагель для получения 320 мг смеси, содержащей (2'R,3'S)-2',7- (бис)триэтилсилил-3'-десфенил-3'-(2-нафтил)-таксола и небольшого количества изомера (2'S, 3'R). К раствору из 320 мг (0,283 ммоля) смеси, полученной в результате предшествующей реакции, в 18 мл ацетонитрила и 0,93 мл пиридина при 0^oC добавляют 2,8 мл 48%-ного водного раствора HF. Смесь перемешивают при 0^oC в течение 3 ч, затем при 25^oC в течение 13 ч и разделяют на насыщенный водный бикарбонат натрия и этилацетат. После выпаривания раствора этилацетата получают 255 мг материала, который очищают при помощи быстрой хроматографии для получения 166 мг (64%) 3'-десфенил-З'-(2-нафтил)-таксола, который перекристаллизовывают из метанола/воды.

Т.пл. 164-165^oC; [α]25Na

¹Н-ЯМР (CDCl₃, 300 МГц) δ 8,14 (d, J=7,3 Гц, 2Н, бензоат орто), 7,96 (m, 1Н, ароматический), 7,90 (m, 1Н, ароматический), 7,85 (m, 2Н, ароматический), 7,76 (m, 2Н, ароматический), 7,60 (m, ЗН, ароматический), 7,52 (m, 4Н, ароматический), 7,41 (m, 2Н, ароматический), 7,01 (d, J=8,8 Гц, 1Н, NH), 6,27 (s, 1Н, Н10), 6,26 (dd, J=9,2, 9,2 Гц, 1Н, Н13), 5,97 (dd, J=8,8, 2,5 Гц, 1Н, НЗ'), 5,68 (d, J=7,1 Гц, 1Н, Н20 a ), 4,93 (m, 1Н, Н5), 4,92 (m, 1Н, Н2'), 4,39 (m, 1Н, Н7), 4,30 (d, J=8,5 Гц, 1Н, Н20 a ), 4,20 (d, J=8,5 Гц, 1Н, Н20 бета ), 3,81 (d, J=7,1 Гц, 1Н, Н3), 3,60 (d, J=5 Гц, 1Н, 2'OH), 2,48 (m, 1Н, Н6 a ), 2,45 (br, 1Н, 70Н), 2,39 (s, ЗН, 4Ac), 2,30 (m, 2Н, Н14), 2,24 (s, ЗН, 10Ac), 1,83 (m, 1Н, Н6 бета), 1,82 (br, ЗН, Me18), 1,68 (s, 1Н, 10Н), 1,68 (s, ЗН, Me19), 1,24 (s, ЗН, Me17), 1,14 (s, ЗН, Me16).

Пример 5. Получение 2',7-окси-защищенного таксола с использованием алкоголята магния. К раствору, содержащему 7-триэтилсилил-баккатин III (100 мг, 0,143 ммоля) в 1 мл ТГФ, при -45^oC по каплям добавляют 0,048 мл 3,0М раствора метил-магний-бромида в простом эфире. После выдерживания в течение 1 ч при -45^oC к смеси добавляют по каплям раствор (+)-цис-1-бензоил-3-триэтилсилилокси-4-фенилазетидин-2-она (82 мг, 0,215 ммоля) в 1 мл ТГФ. Раствор нагревают до 0^oC и выдерживают при этой температуре в течение 4 ч, после чего добавляют 1 мл 10%-ного раствора AcOH в ТГФ. Смесь разделяют на насыщенный водный NaHCO₃ и 60/40 этилацетат/гексан. После выпаривания органического слоя получают остаток, который очищают при помощи быстрой хроматографии с последующей перекристаллизацией для получения 148 мг (96%) (2'R, 3'S)-2',7-(бис)триэтилсилилтаксола.

Пример 6. Получение 2',7-окси-защищенного таксола с применением алкоголята калия. К раствору, содержащему 7-триэтилсилил-баккатин III (100 мг, 0,143 ммоля) в 1 мл ТГФ, при -45^oC по каплям добавляют 0,286 мл 0,5М раствора калий-гексаметилдисилазида в толуоле. После выдерживания в течение 1 ч при -45^oC к смеси по каплям добавляют раствор (+)-цис-1-бензоил-3-триэтилсилилокси-4-фенилазетидин-2-она (82 мг, 0,215 ммоля) в 1 мл ТГФ. Раствор нагревают до 0^oC и выдерживают при этой температуре в течение 3 ч, после чего добавляют 1 мл 10%-ного раствора AcOH в ТГФ. Смесь разделяют на насыщенный водный NaHCO₃ и 60/40 этилацетат/гексан. После выпаривания органического слоя получают остаток, который очищают при помощи быстрой хроматографии с последующей перекристаллизацией для получения 139 мг (90%) (2'R, 3'S)-2',7-(бис)триэтилсилилтаксола.

Пример 7. Получение 2',7-окси-защищенного таксола с применением алкоголята лития из гексаметилдисилазида лития. К раствору, содержащему 7-триэтилсилил-баккатин III (100 мг, 0,143 ммоля) в 1 мл ТГФ, при -45^oC по каплям добавляют 0,143 мл 1,0М раствора гексаметилдисилазида лития в ТГФ. После выдерживания в течение 1 ч при -45^oC к смеси по каплям добавляют раствор (+)-цис-1-бензоил-3-триэтилсилилокси-4-фенилазетидин-2-она (82 мг, 0,215 ммолей) в 1 мл ТГФ. Раствор нагревают до 0^oC и выдерживают при этой температуре в течение 2 ч, после чего добавляли 1 мл 10%-ного раствора AcOH в ТГФ. Смесь разделяют на насыщенный водный NaHCO₃ и 60/40 этилацетат/гексан. После выпаривания органического слоя получают остаток, который очищают при помощи быстрой хроматографии с последующей перекристаллизацией для получения 151 мг (98%) (2'R,3'S)-2',7-(бис)триэтилсилилтаксола.

Пример 8. Получение таксола с использованием алкоголята лития (из гексаметилдисилазида лития). К раствору, содержащему 7-триэтилсилил-баккатин III (100 мг, 0,143 ммоля) в 1 мл ТГФ, при -45^oC по каплям добавляют 0,143 мл 1,0 М раствора гексаметилдисилазида лития в ТГФ. После выдерживания в течение 1 ч при -45^oC к смеси по каплям добавляют раствор (+)-цис-1-бензоил-3-(2- метокси-2-пропилокси)-4-фенилазетидин-2-она (58 мг, 0,172 ммоля) в 1 мл ТГФ. Раствор нагревают до 0^oC и выдерживают при этой температуре в течение 2 ч, после чего добавляют 1 мл 10%-ного раствора AcOH в ТГФ. Смесь разделяют на насыщенный водный NaHCO₃ и 60/40 этилацетат/гексан. После выпаривания органического слоя получают остаток, который очищают перекристаллизацией для получения 147 мг (99%) (2'R,3'S)-2'-(2-метокси-2-пропилокси)-7-триэтилсилилтаксола. К раствору, содержащему 116 мг (0,112 ммоля) (2'R,3'S)-2'-(2-метокси-2-пропилокси)-7-триэтилсилилтаксола в 6 мл ацетонитрила и 0,3 мл пиридина, при 0^oC добавляют 0,9 мл 48%-ного водного HF. Смесь перемешивают при 0^oC в течение 8 ч, затем при 25^oC в течение 10 ч. Смесь разделяли на насыщенный водный бикарбонат натрия и этилацетат. После выпаривания этилацетатного раствора получают 113 мг материала, который очищают при помощи перекристаллизации для получения 95 мг (99%) таксола, который идентичен с подлинной пробой во всех отношениях.

Пример 9. Получение 2',7-окси-защищенного таксола с применением алкоголята натрия. К раствору, содержащему 7-триэтилсилил-баккатин III (100 мг, 0,143 ммоля) в 1 мл ТГФ, при -45^oC по каплям добавляют 0,143 мл 1М раствора гексаметилдисилазида натрия в ТГФ. После выдерживания в течение 1 ч при -45^oC к смеси добавляют по каплям раствор (+)-цис-1-бензоил-3триэтилсилилокси-4-фенилазетидин-2-она (82 мг, 0,215 ммоля) в 1 мл ТГФ. Раствор нагревают до 0^oC и выдерживают при этой температуре в течение 3 ч, после чего добавляют 1 мл 10%-ного раствора AcOH в ТГФ. Смесь разделяют на насыщенный водный раствор NaHCO₃ и 60/40 этилацетат/гексан. После выпаривания органического слоя получают остаток, который очищают при помощи быстрой хроматографии с последующей перекристаллизацией для получения 108 мг (70%) (2'R,3'S)-2',7-бис)триэтилсилилтаксола.

Контрольный пример, соответствующий примеру 1. В раствор 100 мг (0,143 ммол. ) 7-триэтилсилилбаккатина III в 1 мл ТГФ при -45^oC по каплям добавляют раствор 274 мг (0,715 ммол.) цис-1- бензоил-3-триэтилсилилокси-4-фенилазетидин-2-она в 1 мл ТГФ. Раствор подогревают до 0^oC и выдерживают при этой температуре в течение 1 ч перед добавлением 1 мл 10%-ного раствора AcOH в ТГФ. Смесь разделяют на насыщенный водный раствор NaHCO₃ и смесь этилацетата с гексаном 60/40. Выпаривание органического слоя дает остаток, который очищают выходом непрореагировавшие исходные материалы.

Контрольный пример, соответствующий примеру 5. В раствор 200 мг (0,286 ммол. ) 7-триэтилсилилбаккатина III в 2 мл ТГФ при -45^oC по каплям добавляют раствор 620 мг цис-1-бензоил-3-триэтил- силилокси-4-(1-нафтил)-азетидин-2-она (1,43 ммол.) в 2 мл ТГФ. Раствор подогревают до 0^oC и выдерживают при этой температуре в течение 1 ч перед добавлением 1 мл 10%-ного раствора AcOH в ТГФ. Смесь разделяют на насыщенный водный раствор NaHCO₃ и смесь этилацетата с гексаном 60/40. Выпаривание органического слоя дает остаток, который очищают фильтрованием через силикагель, получая с полной рекуперацией непрореагировавшие исходные материалы.

Контрольный пример, соответствующий примеру 4. В раствор 200 мг (0,286 ммол. ) 7-триэтилсилилбаккатина III в 2 мл ТГФ при -45^oC по каплям добавляют раствор 620 мг цис-1-бензоил-3-триэтилсилилокси-4-(2-нафтил)-азетидин-2-она (1,43 ммол. ) в 2 мл ТГФ. Раствор подогревают до 0^oC и выдерживают при этой температуре в течение 1 ч перед добавлением 1 мл 10%-ного раствора AcOH в ТГФ. Смесь разделяют на насыщенный водный раствор NaHCO₃ и смесь этилацетата с гексаном 60/40. Выпаривание органического слоя дает остаток, который очищают фильтрованием через силикагель, получая с количественной рекуперацией непрореагировавшие исходные материалы.

Контрольный пример, соответствующий примеру 6. В раствор 200 мг (0,286 ммол. ) 7-триэтилсилилбаккатина III в 2 мл ТГФ при -45^oC по каплям добавляют раствор 590 мг цис-1-бензоил-3-триэтилсилилокси-4-(4-метоксифенил)-азетидин-2-она (1,43 ммол.) в 2 мл ТГФ. Раствор подогревают до 0^oC и выдерживают при этой температуре в течение 1 ч перед добавлением 1 мл 10%-ного раствора AcOH в ТГФ. Смесь разделяют на насыщенный водный раствор NaHCO₃ и смесь этилацетата с гексаном 60/40. Выпаривание органического слоя дает остаток, который очищают фильтрованием через силикагель, получая с количественной рекуперацией непрореагировавшие исходные материалы.

Контрольный пример, соответствующий примеру 7. В раствор 200 мг (0,286 ммол. ) 7-триэтилсилилбаккатина III в 2 мл ТГФ при -45^oC по каплям добавляют раствор 595 мг цис-1-бензоил-3-триэтилсилилокси-4-(4-хлорфенил)-азетидин-2-она (1,43 ммол.) в 2 мл ТГФ. Раствор подогревают до 0^oC и выдерживают при этой температуре в течение 1 ч перед добавлением 1 мл 10%-ного раствора AcOH в ТГФ. Смесь разделяют на насыщенный водный раствор NaHCO₃ и смесь этилацетата с гексаном 60/40. Выпаривание органического слоя дает остаток, который очищают фильтрованием через силикагель, получая с количественной рекуперацией непрореагировавшие исходные материалы.

Пример 10. Получение 2',7-гидроксиблокированного таксола с использованием алкоксида магния. В раствор 100 мг (0,143 ммол.) 7-триэтилсилилбаккатина III в 1 мл ТГФ при -45^oC по каплям добавляют 0,048 мл 3,0 М раствора метилмагнийбромида в диэтиловом эфире. По истечении 1 ч выдержки при -45^oC в смесь по каплям добавляют раствор (+)-цис-1-бензоил-3-триэтилсилилокси-4-фенилазетидин-2-она (82 мг, 0,215 ммол.) в 1 мл ТГФ. Раствор подогревают до 0^oC и выдерживают при этой температуре в течение 4 ч перед добавлением 1 мл 10% -ного раствора AcOH в ТГФ. Смесь разделяют на насыщенный водный раствор NaHCO₃ и смесь этилацетата с гексаном 60/40. Выпаривание органического слоя дает остаток, который очищают высокоскоростной хроматографией с последующей перекристаллизацией, получая 148 мг (96%) (2'R,3'S)-2',7- (бис)триэтилсилилтаксола.

Пример 11. Получение 2',7-гидроксиблокированного таксола с использованием алкоксида калия. В раствор 100 мг (0,143 ммол.) 7-триэтилсилилбаккатина III в 1 мл ТГФ при -45^oC по каплям добавляют 0,286 мл 0,5 М раствора калийгексаметилдисилазида в толуоле. По истечении 1 ч выдержки при -45^oC в смесь по каплям добавляют раствор (+)-цис-1-бензоил-3-триэтилсилилокси-4-фенилазетидин-2-она (82 мг, 0,215 ммол.) в 1 мл ТГФ. Раствор подогревают до 0^oC и выдерживают при этой температуре в течение 3 ч перед добавлением 1 мл 10% ного раствора AcOH в ТГФ. Смесь разделяют на насыщенный водный раствор NaHCO₃ и смесь этилацетата с гексаном 60/40. Выпаривание органического слоя дает остаток, который очищают высокоскоростной хроматографией с последующей перекристаллизацией, получая 1,39 мг (90%) (2'R,3'S)-2',7-(бис)триэтилсилилтаксола.

Таксол с использованием алкоксида цинка. В раствор 100 мг (0,143 ммол.) 7-триэтилсилилбаккатина III в 1 мл ТГФ при -45^oC по каплям добавляют 0,286 мл 0,5 М раствора калийгексаметилдисилазида в толуоле. По истечении 15 мин добавляли 32 мг (0,143 ммол.) цинкхлориддиметоксиэтанового комплекса. По истечении дополнительного 1 ч выдержки при -45^oC смесь подогревают до 0^oC и в смесь по каплям добавляют раствор (+)-цис-1-бензоил-3-триэтилсилилокси-4-фенилазетидин-2-она (82 мг, 0,215 ммол.) в 1 мл ТГФ. Раствор перемешивают при 0^oC в течение 3 ч перед добавлением 1 мл 10%-ного раствора AcOH в ТГФ. Смесь разделяют на насыщенный водный раствор NaHCO₃ и смесь этилацетата с гексаном 60/40. Выпаривание органического слоя дает остаток, который очищают высокоскоростной хроматографией с последующей перекристаллизацией, получая 139 мг (90%) (2'R,3'S)-2',7-(бис)триэтилсилилтаксола.

Таксол с использованием алкоксида кадмия. В раствор 100 мг (0,143 ммол.) 7-триэтилсилилбаккатина III в 1 мл ТГФ при -45^oC по каплям добавляют 0,286 мл 0,5 М раствора калийгексаметилдисилазида в толуоле. По истечении 15 мин добавляли 26 мг (0,143 ммол.) безводного хлорида кадмия. По истечении дополнительного 1 ч выдержки при -45^oC смесь подогревают до 0^oC и в смесь по каплям добавляют раствор (+)-цис-1-бензоил-3-триэтилсилилокси-4-фенилазетидин-2-она (82 мг, 0,215 ммол.) в 1 мл ТГФ. Раствор перемешивают при 0^oC в течение 3 ч перед добавлением 1 мл 10%-ного раствора AcOH в ТГФ. Смесь разделяют между насыщенным водным раствором NaHCO₃ и смесью этилацетата с гексаном 60/40. Выпаривание органического слоя дает остаток, который очищают высокоскоростной хроматографией с последующей перекристаллизацией, получая 131 мг (85%) (2'R,3'S)-2',7-(бис)триэтилсилилтаксола.

(2'R, 3'S)-2', 7-(бис)триэтилсилилтаксол с использованием алкоксида натрия. Раствор 100 мг (0,143 ммол.) 7-триэтилсилилбаккатина III в 1 мл ТГФ при -45^oC по каплям добавляют в суспензию 3,5 мг гидрида натрия в 0,5 мл ТГФ. Раствор подогревают до 0^oC в течение 6 ч, затем охлаждают до -45^oC и в смесь по каплям добавляют раствор (+)-цис-1-бензоил-3-триэтилсилилокси-4-фенилазетидин-2-она (82 мг, 0,215 ммол.) в 1 мл ТГФ. Раствор подогревают до 0^oC и выдерживают при этой температуре в течение 10 ч перед добавлением 1 мл 10% -ного раствора AcOH в ТГФ. Смесь разделяют на насыщенный водный раствор NaHCO₃ и смесь этилацетата с гексаном 60/40. Выпаривание органического слоя дает остаток, который очищают высокоскоростной хроматографией с последующей перекристаллизацией, получая 98 мг (64%) (2'R,3'S)-2',7- (бис) триэтилсилилтаксола.

(2'R, 3'S)-2',7-(бис)триэтилсилилтаксол с использованием алкоксида титана. В раствор 100 мг (0,143 ммол.) 7-триэтилсилилбаккатина III в 1 мл ТГФ при -45^oC по каплям добавляют 0,087 мл 1,63 М раствора BuLi в гексане. После выдержки в течение 1 ч при -45^oC раствор охлаждают до -78^oC и добавляют в него 0,140 мл 1,0М раствора четыреххлористого титана в хлористом метилене. Раствор подогревают до -45^oC и в смесь по каплям добавляют раствор (+)-цис-1-бензоил-3-триэтилсилилокси-4-фенилазетидин-2-она (82 мг, 0,215 ммол.) в 1 мл ТГФ. Раствор подогревают до 0^oC и выдерживают при этой температуре в течение 8 ч перед добавлением 1 мл 10%-ного раствора AcOH в ТГФ. Смесь разделяют на насыщенный водный раствор NaHCO₃ и смесь этилацетата с гексаном 60/40. Выпаривание органического слоя дает остаток, который очищают высокоскоростной хроматографией с последующей перекристаллизацией, получая 129 мг (84%) (2'R,3'S)-2',7-(бис)- триэтилсилилтаксола.

Алкоголят металла, имеющий формулу (I)

в которой T₁ обозначает водород или окси-защитную группу, Z обозначает -OT₂, или -OCOCH₃, T₂ обозначает водород или окси-защитную группу, а M выбирают из группы, включающей металлы группы IA, IIA и переходные металлы, которые применяются при получении биологически активных производных баккатина III и 10-деацетил-баккатина III. 4 з.п.ф-лы.

1. Алкоголяты металлов общей формулы

где Т₁ водород или оксизащитная группа;
Z ОТ₂- или -ОСОСН₃-группа, где Т₂ водород или оксизащитная группа;
М металл;
Ас ацетил;
Ph фенил. 2. Алкоголят по п.1, в котором M Li, Mg, Na, K или Ti. 3. Алкоголят по п.1, в котором М литий. 4. Алкоголят по п.1, в котором М литий, Z -ОТ₂-группа, где Т₂ оксизащитная группа. 5. Алкоголят по п.4, в котором Т₁ и Т₂ независимо друг от друга выбирают из группы, состоящей из 1-этоксиэтила, 2,2,2-трихлорэтоксиметила, триалкилсилила и триарилсилила.

Приоритет по пунктам:
23.09.91 по пп.1 4.