СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЭКСТРАКТА РАСТОРОПШИ ПЯТНИСТОЙ Российский патент 1998 года по МПК A61K35/78 A61K9/08 

Изобретение относится к xимико-фармацевтичеcкoй промышленности, в частности к способу получения экстракта из плодов расторопши пятнистой - Silybum marianum (L. ) Gaertn. (сем. Asteraceae - астровых или сложноцветных).

Известны способы получения суммы флаволигнанов расторопши пятнистой с использованием различных экстрагентов - ацетона, этилацетата, этилового спирта, водных спиртов [1, 6-8]. Данные субстанции, основными биологически активными веществами которых являются силибин, силидианин, силикристин и другие флаволигнаны, используются для производства таких ценных гепатопротекторных препаратов, как "Легалон", "Карсил", "Силибор" [2 - 5].

Однако недостатком известных способов является сложность технологического процесса, использование дорогостоящих растворителей и как следствие дороговизна получаемых лекарственных, средств. Данное обстоятельство становится особенно важным на фоне растущей потребности здравоохранения в гепатопротекторах. Одним из главных факторов этой тенденции является ухудшающаяся экологическая ситуация, приводящая к росту заболеваний с профпатологией и экопатологией. Наличие широкого и доступного ассортимента лекарственных средств на основе плодов расторопши пятнистой могло бы способствовать смягчению вредного воздействия экологических и других неблагоприятных факторов и, следовательно, оздоровлению населения Российской Федерадии в целом, и в Самарской области, в частности, где эта проблема особенно актуальна. Кроме того, в Самарской области имеются и другие объективные предпосылки для производства доступных и эффективных экопротекторов на основе плодов расторопши пятнистой, так как в совхозе "Сергиевский" и на Средне-Волжской зональной опытной станции НПО "ВИЛАР" (пос. Антоновка) созданы промышленные плантации этого растения.

За прототип изобретения нами взят способ получения суммы флаволигнанов, описанный в литературе [1]. Данный способ включает такие стадии, как экстракция плодов расторопши пятнистой 80% этиловым спиртом, упаривание экстракта до густого остатка, растворение последнего при нагревании в 50% этиловом спирте, трехкратная обработка полученного раствора четыреххлористым углеродом (удаление жирного масла), многократное извлечение целевых веществ из водно-спиртового остатка смесью хлороформ-этанол (2:1), упаривание органической фазы до сухого остатка, растворение последнего в 50% этиловом спирте, трехкратная обработка полученного раствора спирто-хлороформной смесью и упаривание органической фазы (раствор целевых веществ), приводящее к получению целевого продукта в виде желто-коричневого порошка с выходом 4,5-5% и содержанием в нем суммы полиоксифенилхроманонов не ниже 70%.

Задача изобретения - упрощение технологии получения целевых веществ из плодов расторопши пятнистой.

Сущность предлагаемого способа заключается в том, что в качестве экстрагента используют 80% этиловый спирт, но экстракцию плодов расторопши пятнистой осуществляют методом реперколяции, сочетающей извлечение целевых веществ при комнатной температуре с последующим исчерпывающим извлечением флаволигнанов при нагревании в интервале температур 60-85^oC (примеры 1-3). При этом не только упрощается технологический процесс и уменьшается его продолжительность, но и обеспечиваются щадящие условия получения флаволигнанов, которые по нашим данным являются термолабильными веществами [3]. Например, использование более длительного нагревания на стадии термической экстракции в течение 45 мин приводит к заметному снижению содержания действующих веществ в целевом продукте (с 2,51 до 2,33%). Имеет место снижение выхода целевых веществ и в случае экстракции при температуре ниже 60^oC (с 2,51 до 2,29%), что свидетельствует о целесообразности и необходимости сочетания экстракции в условиях реперколяции при комнатной температуре и в интервале температур 60 - 85 ^oC.

Проведенный заявителем поиск по научно-техническим и патентным источникам информации и выбранный из перечня аналогов прототип [1] позволили выявить отличительные признаки в заявляемом техническом решении. Следовательно, заявляемый способ получения удовлетворяет критерию изобретения "новизна".

Проведенный заявителем дополнительный поиск известных технических решений [6 - 8] с целью обнаружению в них признаков, сходных с признаками отличительной части формулы заявляемого способа получения, показал, что эти признаки отсутствуют, следовательно, заявляемое техническое решение удовлетворяет критерию "изобретательский уровень".

Критерий изобретения "промышленная применимость" подтверждается тем, что предлагаемый способ получения экстракта расторопши пятнистой позволяет получить в промышленном производстве лекарственный препарат, достаточно простой в изготовлении и относительно дешевый из-за отсутствия в технологической схеме производства дорогостоящего оборудования, но обладающий выраженными гепатопротекторными свойствами и относящийся к малотоксичным соединениям (протокол исследования токсичности и гепатопротекторного действия прилагается).

Пример 1. 400,0 г измельченных плодов расторопши пятнистой распределяют по 100,0 г в 4 экстрактора, заливают каждый экстрактор 300 мл 80% этилового спирта и оставляют на 6 ч для замачивания сырья. Затем в условиях реперколяции осуществляют одну экстракцию при комнатной температуре и последовательно две экстракции при температуре 85^oC в течение 30 мин, в расчете на каждую операцию. Готовый продукт (400 мл) собирают из 4-го экстрактора и получают жидкий экстракт расторопши пятнистой (1:1). Содержание суммы флаволигнанов (целевые вещества), определенное с использованием описанных в литературе и разработанных нами методик [4.9], составляет в экстракте 2,48%. Выход целевого продукта составляет 91% от теоретического (содержание суммы флаволигнанов в плодах расторопши пятнистой составляет 2.73%).

Пример 2. 400,0 г измельченных плодов расторопши пятнистой распределяют по 100,0 г в 4 экстрактора, заливают каждый экстрактор 300 мл 80% этилового спирта и оставляют на 6 ч для замачивания сырья. Затем в условиях реперколяции осуществляют одну экстракцию при комнатной температуре и последовательно две экстракции при температуре 60^oC в течение 30 мин, в расчете на каждую операцию. Готовый продукт (400 мл) собирают из 4-го экстрактора и получают жидкий экстракт. Содержание суммы флаволигнанов в целевом продукте составляет 2,40%. Выход целевых веществ составляет 88% от теоретического (содержание суммы флаволигнанов в плодах расторопши пятнистой составляет 2,73%).

Пример 3. 400,0 г измельченных плодов расторопши пятнистой распределяют по 100,0 г в 4 экстрактора, заливают каждый экстрактор 300 мл 80% этилового спирта и оставляют на 6 ч для замачивания сырья. Затем и условиях реперколяции осуществляют одну экстракцию при комнатной температуре и последовательно две экстракции при температуре 75^oC в течение 30 мин, в расчете на каждую операцию. Готовый продукт (400 мл) собирают из 4-го экстрактора и получают жидкий экстракт. Содержание суммы флаволигнанов в целевом продукте составляет 2,51%. Выход целевых веществ составляет 92% от теоретического (содержание суммы флаволигнанов в плодах расторопши пятнистой составляет 2,73%).

Использование предлагаемого способа позволяет осуществлять производство в условиях фармацевтической фабрики и других фармацевтических предприятий, где отсутствует дорогостоящее оборудование, необходимое для получения очищенных субстанций и таблетированных лекформ на их основе. Использование предлагаемого способа получения, в котором не предусмотрены многостадийные операции по очистке суммы флаволигнанов, как это описывается в прототипе [1], позволяет не только сократить число операций, но и значительно удешевить стоимость получаемой продукции.

O целесообразности такого подхода к получению целевых веществ и, следовательно, о положительном эффекте свидетельствует также то обстоятельство, что полученный экстракт расторопши пятнистой обладает выраженными гепатопротекторными свойствами (протокол исследования гепатопротекторного действия). Исходя из этого, можно сделать вывод о том, что внедрение предлагаемого способа позволит пополнить ассортимент гепатопротекторных средств конкурентоспособным препаратом, простым в изготовлении и относительно дешевым и доступным для широких слоев населения.

Следует отметить, что использование предлагаемого способа дает следующие преимущества.

Количество операций сокращается с 18 (прототип) до 4 операций (предлагаемый способ).

Продолжительность технологического процесса уменьшается в 3 раза по сравнению с прототипом.

Стоимость целевого продукта удешевляется минимум в 3-4 раза.

В предлагаемом способе не используются такие токсичные растворители, как четыреххлористый углерод и хлороформ, представляющие огромную опасность для здоровья людей и для окружающей среды в целом.

Источники информации:
1. Драник Л.И., Долганенко Л.Г., Беликов В.В., Бeзpук П. И., Ткалич Л.В. и Несмиян Т.Я. Способ получения суммы полиоксифенилхроманонов // А.с. 603386 (СССР), A 61 K 35/78, 25.04.78, Бюл. 15.

2. Куркин В. А. Запесочная Г.Г. Флаволигнаны и другие природные лигноиды. Проблемы структурного анализа // Химия природ. соедин., 1987, N 1, с. 11-34.

3. Куркин В.А., Запесочная Г.Г., Авдеева Е.В., Браславский В.Б., Сенцов М. Ф. и Смольякова И.Б. Фитохимическое исследование лекарственных растений родов родиола, тополь, ива, расторопша, одуванчик, содержащих флавоноиды // Современные аспекты изучения лекарственных растений: Научные труды. М., 1995, с. 151-157.

4. Куркин В.А., Сенцов М.Ф., Авдеева Е.В. и Первушкин С.В. Методика количественного определения силибина и суммы флаволигнанов в плодах расторопши пятнистой // Самарский медицинский архив, 1996, N 1, с.71-76.

5. Куркин В. А. Фенилпропаноиды - перспективные природные биологически активные соединения. Самара, 1996, 80 с.

6. Мадаус P., Герлер К. и Молльс В. Способ получения силимариновой смеси // А.с. 1433391 (СССР), A 61 K 35/78, 23.10.88, Бюл. 30.

7. Николов Н., Бижев Ат. и Андонова Е. Возможности за получеване на силибин от плодовете Silybum marianum (L.) Caertn. и някои нови решения // Год. Висш. химикотехнол. инст., София, 1990, т. 30, N 3, с. 209-214 (болг.).

8. Силадьи И., Терек Е. и Штибер Д. Способ получения флавоноидов // А. с. 598544 (СССР), A 61 K 35/78, 15.03.78, Бюл. N 10.

9. Технические условия 64-4-97-93. Плоды расторопши пятнистой.

Способ предназначен для получения экстракта из плодов расторопши пятнистой, обладающего гепатозащитным действием. Экстракцию ведут 80% этиловым спиртом методом реперколяции сначала при комнатной температуре, затем при 60-85^oC.

Способ получения экстракта плодов расторопши пятнистой с использованием 80% -ного этилового спирта, отличающийся тем, что экстрагирование целевого продукта проводят в условиях реперколяции, сочетающей в себе экстракцию при комнатной температуре с последующим извлечением целевых веществ при нагревании в интервале 60 85^oС.