СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЛЕКАРСТВЕННОЙ ФИТОПЛЕНКИ Российский патент 2000 года по МПК A61K47/34 A61K9/00 A61K47/34 A61K47/32 A61K47/20 A61K47/10 A61K35/78 A61P17/02 A61P37/00 

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности, в частности к производству лекарственных фитопленок пролонгированного действия для профилактики и лечения воспалительных заболеваний слизистой и кожных покровов организма, а также иммунных нарушений.

В фармацевтической технологии известен способ получения пленочных лекарственных форм из индивидуальных лекарственных компонентов и растительных веществ [11] . Однако в состав основы пленок не входят поливинилпирролидон (ПВП) и диметилсульфоксид (ДМСО), придающие пленкам большую прочность и плотность, адгезию (силу сцепления), пролонгирующие и осмотические свойства.

За прототип изобретения нами взят способ получения средства для лечения слизистой рта [11] с использованием водных, водно-этанольных извлечений из лекарственных растений - аралии маньчжурской, заманихи высокой, лимонника китайского, левзеи сафлоровидной, родиолы розовой, элеутерококка колючего, настойки биоженьшеня, а также пленкообразователей (натрий карбоксиметилцеллюлоза, желатин, натрия альгинат, агар-агар), пластификатора (глицерин) и воды очищенной [11]. Следует отметить, что данное средство содержит в своем составе желатин и другие пленкообразователи, но не содержит ДМСО, обладающий пенетрирующим свойством за счет обеспечения активного транспорта биологически активных соединений пленки в более глубокие ткани организма. Кроме того, в указанном составе не содержится ПВП, способствующий повышению осмотических свойств пленки, солюбилизации гидрофобных экстрактивных веществ, повышающий биологическую доступность лекарственной формы и силу адгезии пленки с субстратом и обеспечивающий очищающее действие на рану. Недостатком данного способа является также то обстоятельство, что используемые в нем водно-спиртовые извлечения обладают в основном тонизирующими свойствами, но лишены при этом выраженных антимикробных, противовоспалительных свойств, которые показаны при лечении воспалительных заболеваний слизистой и кожных покровов организма.

Целью изобретения является расширение ассортимента лекарственных фитопленок, обладающих более выраженными адгезивными и пролонгирующими свойствами, а также большей биодоступностью.

Поставленная цель достигается тем, что в качестве вспомогательных веществ, наряду с желатином и глицерином, используют метилцеллюлозу (пленкообразователь), ДМСО (пенетратор) и ПВП (осмотически активный агент), а в качестве лекарственных субстанций - водно-спиртовые извлечения из травы эхинацеи пурпурной или плодов расторопши пятнистой, или почек различных видов тополя, или цветков лаванды колосовой, или листьев шалфея лекарственного, или почек березы повислой, или цветков календулы лекарственной, или травы мелиссы лекарственной, или корней солодки голой, или коры сирени обыкновенной, или корневищ родиолы розовой, или травы полыни эстрагон (тархун), или травы монарды. При этом раздельно готовят водные растворы пленкообразователей, так как желатин набухает в холодной воде, а МЦ - в горячей и растворяются при нагревании и на холоду соответственно. К раствору МЦ добавляют раствор, состоящий из ДМСО, глицерина и ПВП, гомогенизируют, добавляют водно-спиртовые извлечения и снова перемешивают. Добавляют раствор желатина при температуре смеси 37-40^oC и перемешивают. Для удаления воздуха из приготовленной массы - при этой же температуре - прибавляют спирт этиловый, смесь выдерживают в открытой емкости в течение 1 ч. По истечении указанного времени массу медленно перемешивают и разливают на стеклянные подложки, предварительно обезжиренные спиртом. Сушат потоком воздуха с температурой 25-30^oC до остаточной влажности 5%.

Проведенный заявителем поиск по научно-техническим и патентным источникам информации и выбранный из перечня аналогов прототип [11] позволили выявить отличительные признаки в заявляемом техническом решении. Следовательно, заявляемый способ получения удовлетворяет критерию изобретения "новизна".

Проведенный заявителем дополнительный поиск известных технических решений [8-10, 12-14] с целью обнаружению в них признаков, сходных с признаками отличительной части формулы заявляемого способа получения, показал, что эти признаки отсутствуют, следовательно, заявляемое техническое решение удовлетворяет критерию "изобретательский уровень".

Заявляемый способ иллюстрируется следующим примером.

Пример 1. В коническую колбу вместимостью 50 мл помещают 1,9 (мас. %) МЦ, заливают ее 18 мл воды очищенной с температурой 90^oC и оставляют для набухания в течение 2 ч. К набухшей МЦ добавляют 18 мл воды очищенной комнатной температуры и выдерживают на холоду до получения прозрачного раствора. В другую коническую колбу вместимостью 50 мл помещают 3,85 желатина, заливают 15 мл воды очищенной комнатной температуры и оставляют для набухания на 30-40 мин. Далее добавляют 20 мл воды очищенной и нагревают на водяной бане до полного растворения желатина.

В смеситель помещают приготовленный раствор МЦ, при перемешивании добавляют к нему смесь 2,31 глицерина, 1,54 ПВП и 0,15 ДМСО. Далее добавляют 19,25 водно-спиртового извлечения из лекарственного растительного сырья: травы эхинацеи пурпурной или плодов расторопши пятнистой, или почек различных видов тополя, или цветков лаванды колосовой, или листьев шалфея лекарственного, или почек березы повислой, или цветков календулы лекарственной, или травы мелиссы лекарственной, или корней солодки голой, или коры сирени обыкновенной, или корневищ родиолы розовой, или травы полыни эстрагон (тархун), или травы монарды. При перемешивании смесь нагревают на водяной бане до температуры 37-40^oC и вливают раствор желатина. Для удаления пузырьков воздуха из приготовленной пленочной массы добавляют 30 мл 40% этанола и выдерживают 1 ч. По истечении указанного времени пленочную массу осторожно гомогенезируют и разливают на стеклянную подложку, предварительно обезжиренную спиртом, с площадью 553 см³. Сушат потоком воздуха с температурой 25-30^oC до остаточной влажности 5%. После высушивания получают пленки различных размеров:
- для нанесения на слизистую полость рта - 0,8х2 см, 0,5х2 см;
- для использования в гинекологии и дерматологии - 2х2 см;
- по назначению врача пленки могут иметь и иные размеры.

Для увеличения дозировки по согласованию с врачом могут быть наклеены дополнительные дозы пленки.

Примеры других оптимальных соотношений даны в таблице (составы 1-12). Технология изготовления лекарственных пленок осуществлялась аналогично примеру 1.

Изменение количеств (запредельные параметры) пленкообразователей (МЦ, желатин) и вспомогательных веществ (ПВП, ДМСО, глицерин) в сторону уменьшения или увеличения (запредельные параметры) по отношению к указанным в таблице не приводит к достижению положительного эффекта: полученные пленки не отвечают технологическим и биофармацевтическим требованиям - незначительная клейкость, отсутствие пролонгированного действия, низкая степень биодоступности (БД).

Для изучения влияния вспомогательных веществ (ВВ) и основы на высвобождение действующих веществ (ДВ) из лекарственных фитопленок взяты две лекарственные формы на основе типичных гидрофильных субстанций - водно-спиртовые извлечения из травы эхинацеи пурпурной ("Эхинаплен") и корневищ родиолы розовой ("Розоплен"), а также две лекформы на основе характерных гидрофобных субстанций - водно-спиртовые извлечения из почек тополя ("Топоплен") и плодов расторопши пятнистой ("Силиплен"). При этом был использован метод диализа через полупроницаемую мембрану.

В эксперименте применяли стеклянные трубки с внутренним диаметром 2,5 см, один конец которых перекрывали полупроницаемой мембраной, в качестве которой служит целлофан. Из пленок вырезали участок диаметром 2,5 см, который помещали в диализные трубки на мембрану, избегая попадания воздуха между пленкой и мембраной. Диализные трубки с образцами пленок помещали в термостатируемые при температуре 37±1^oC химические стаканы емкостью не менее 400 мл и закрепляли так, чтобы мембраны лишь соприкасались с поверхностью диализной жидкости, в качестве которой служила вода очищенная в объеме 50 мл. Отбор проб производили через 2, 5, 10, 15, 20, 25, 30, 40, 50, 60, 90, 120, 150, 180, 210, 240, 270, 300 минут. Объем пробы составлял 5 мл, после чего отобранный объем сразу восполняли равным объемом воды очищенной.

Анализ содержания действующих веществ в диализной жидкости проводили спектрофотометрически на спектрофотометре СФ-26 в УФ-области при длине волны 330 нм (для "Эхинаплена"), 252 и 279 нм (для "Розоплена"), 289 нм (для "Топоплена" и
"Силиплена") и толщине слоя 10 мм [1-7, 15, 16]. Раствором сравнения служила вода очищенная.

Параллельно измеряли оптическую плотность диализных жидкостей из пленок, приготовленных только из основы (плацебо) и не содержащих спиртовых извлечений из растений. Как показали результаты, в этих растворах практически отсутствуют вещества, способные существенно изменить оптическую плотность раствора. Она колебалась в пределах от 0,025 до 0,075 для всех аналогичных исследованных растворов, что составляло статистически достоверную разницу с p ≥ 0,95.

Результаты исследований отражены на фиг. 1-18.

Исследована зависимость БД от соотношения пленкообразователей (фиг. 1 - 5). Как видно из чертежей, МЦ как компонент, более легко растворимый по сравнению с желатином (Ж), способствует более быстрому (однако не максимальному) высвобождению производных пиностробина [5], силибина [3, 4] и салидрозида [1, 5] (фиг. 3 - 5). Высвобождение цикориевой кислоты [5, 6] и розавина [1, 5] из фитопленок, не содержащих желатина, достигает максимума намного позднее по сравнению с пленками, содержащими желатин (фиг. 1, 3).

Желатин способствует высвобождению ДВ длительно, но на низком уровне, поэтому необходимо его сочетание с МЦ. Это характерно для всех исследованных фитопленок (фиг. 1 - 5).

Изменение высвобождения в сторону увеличения концентрации ДВ, уменьшения времени достижения максимума, увеличения периода высвобождения на максимальном уровне наблюдается в ряду соотношений МЦ к желатину 1:6-1:4-1:2.

Таким образом, введение пленкообразователей (МЦ:Ж) в указанных соотношениях способствует получению каркаса, структура которого наиболее оптимальна для высвобождения ДВ.

Выяснено влияние ДМСО на высвобождение ДВ из фитопленок (фиг. 6 - 9). Как видно из приведенных графиков, влияние ДМСО неоднозначно на высвобождение ДВ из фитопленок. С уменьшением концентрации ДМСО увеличивается высвобождение ДВ из всех фитопленок, время достижения максимума резко изменяется только для "Топоплена" (6,5 ч - 24,2%, 5,5 ч - 1,33%). Однако полное отсутствие ДМСО в составе пленки ведет к максимальному высвобождению только в случае "Топоплена" и "Силиплена" (без изменения динамики) (фиг. 8 - 9). В случае "Розоплена" и "Эхинаплена" (фиг. 6 - 7) отсутствие ДМСО ведет к резкому снижению биодоступности и изменению динамики высвобождения. Для цикориевой кислоты и розавина характерно достижение максимума в начальный период экспозиции, затем в течение 1 - 1,5 ч резкое снижение концентрации, а затем плавное снижение. Для высвобождения салидрозида характерен максимум на 60-ой минуте, выход на плато и плавное снижение концентрации в диализной жидкости после 210 минуты.

С помощью хроматографии в тонком слое сорбента получены косвенные доказательства взаимодействия цикориевой кислоты, розавина и салидрозида с ДМСО. Для пиностробина и его производных, и силибина таких доказательств не получено. Существует также мнение, что ДМСО участвует в "сшивке" макромолекул основы.

Как видно из фиг. 10 - 14, ПВП оказывает влияние на высвобождение ДВ из всех фитопленок. При уменьшении содержания ПВП в пленках "Эхинаплен" высвобождение фенилпропаноидов увеличивается и достигает своего максимума по времени раньше (при концентрации 0,77% - на 90 мин; 13,42%-на 150 мин). Однако исключение его из состава пленки приводит к уменьшению высвобождения. Период резкого увеличения концентрации быстро сменяется периодом резкого падения (оба периода длятся 2,5 часа), затем наступает период плавного снижения содержания фенилпропаноидов в диализной жидкости (фиг. 10).

При исследовании высвобождения ДВ из фитопленок "Розоплен", "Силиплен" и "Топоплен" обнаружено обратное действие ПВП: с уменьшением его концентрации уменьшается высвобождение ДВ. Это можно объяснить большей гидрофобностью ДВ из этих пленок по сравнению с цикориевой кислотой, и ПВП выступает здесь как солюбилизатор. Для фитопленок "Розоплен", "Силиплен" и "Топоплен" достаточной концентрацией ПВП является 3,73%, т.к. дальнейшее увеличение ее не приводит к статистически достоверному увеличению биодоступности (фиг. 11 - 14),
Отмечена неодинаковая степень влияния ПВП на высвобождение розавина и салидрозида (фиг. 11 - 12). С уменьшением количества ПВП с 13,42% до 1,53% высвобождение розавина уменьшается в 1,2 раза, а салидрозида - в 1,3 раза. Но высвобождение идет параллельно (одинаковое время достижения максимума концентрации, плато и снижения высвобождения) (фиг. 11). Однако при исключении ПВП из состава пленки изменяется динамика высвобождения и становится непараллельной. Высвобождение розавина достигает максимума на 120 мин, с 120 до 150 мин наблюдается резкое падение концентрации и после 150 мин плавное снижение концентрации розавина в диализной жидкости. Высвобождение салидрозида достигает максимума на 180 мин и выходит на плато, снижение концентрации наблюдается после 5 часов экспозиции (фиг. 12).

Влияние ПВП на высвобождение флаволигнанов из "Силиплена" и флавоноидов из "Топоплена" является идентичным (фиг. 13 - 14). Уменьшение ПВП приводит к уменьшению значения максимальной концентрации веществ в диализной жидкости и увеличению времени достижения максимальной концентрации.

При исследовании извлечений из фитопленок с помощью хроматографии в тонком слое сорбента получены косвенные доказательства отсутствия взаимодействия между ПВП и каким-либо из исследуемых ДВ (отсутствуют новые пятна).

В ходе эксперимента выяснено влияние глицерина на высвобождение ДВ из фитопленок (фиг. 15 - 18). При увеличении или уменьшении концентрации глицерина в основе БД всех изучаемых пленок статистически достоверно не изменяется. Однако при полном отсутствии глицерина в пленке высвобождение резко снижается и незначительно изменяется его динамика (в сторону увеличения времени достижения максимума). Такой результат можно объяснить смягчающим действием глицерина на пленку, в результате чего увеличивается адгезия пленки к слизистой или коже, увеличивается поверхность контакта. Отмечены также солюбилизирующие свойства глицерина.

При увеличении концентрации глицерина в "Топоплене" (фиг. 17) статистически достоверных изменений в динамике высвобождения не происходит. Однако при исключении глицерина из состава пленки высвобождение увеличивается в 1,05 раза на 6 часу экспозиции, по сравнению с пленкой, содержащей 22,9% глицерина. Очевидно, это объясняется выраженной гидрофобностью производных пиностробина.

Таким образом, рационально вводить глицерин в концентрации от 9,0% до 30,0 %, уменьшение его количества приводит к получению хрупких пленок, а увеличение - очень липких и не упругих.

Результаты данных исследований позволили обосновать оптимальные концентрации вспомогательных веществ и компонентов основы лекарственных фитопленок (таблица).

Таким образом, использование заявляемого способа получения лекарственных фитопленок дает следующие преимущества:
1. Лекарственные фитопленки, получаемые заявляемым способом, обладают более широким спектром биологической активности (антимикробное, противовоспалительное и иммуномодулирующее действие), что позволяет использовать их для эффективного лечения воспалительных заболеваний слизистой.

2. Лекарственные фитопленки, получаемые заявляемым способом, обладают более выраженными адгезивными и пролонгирующими свойствами и большей биодоступностью.

3. С использованием заявляемого способа лекарственные фитопленки могут выпускаться как в промышленных условиях на базе фармацевтических фабрик и других фармацевтических предприятий, так и в условиях аптечного производства, что создает хорошую основу для расширения ассортимента лекарственных средств, используемых в стоматологии, гинекологии и дерматологии.

Источники информации
1. Запесочная Г.Г., Куркин В.А. Гликозиды коричного спирта из корневищ Rhodiola rosea // Химия природ, соедин. - 1982. - N 6. - С. 723-727.

2. Запесочная Г.Г., Куркин В.А., Бойко В.П., Колхир В.К. Фенилпропаноиды - перспективные природные биологически активные вещества лекарственных растений / Хим-фармац. журнал. - 1995. - Т. 29, N 4. - С. 47-50.

3. Куркин В.А., Запесочная Г.Г., Авдеева Е.В., Сенцов М.Ф., Смольякова И. Б. , Браславский В.Б., Первушкин С.В., Цыбулько С.В. Количественное определение силибина и суммы флаволигнанов в плодах Silybum marianum (L.) Gaertn. // Растительные ресурсы. - 1996. - Т. 32, вып. 3. - С. 80-86.

4. Куркин В.А., Лебедев А.А., Авдеева Е.В., Запесочная Г.Г., Первушкин С. В. , Симерзина Л.В., Булатова М.В. Способ получения экстракта расторопши пятнистой. - Патент РФ N 2102999.- A 61 K 35/78, A 61 K 9/08. - 27.01.98 г. Бюл. N 3.

5. Куркин В. А. Фенилпропаноиды - перспективные природные биологически активные соединения. - Самара. - 1996. - 80 с.

6. Куркин В.А., Авдеева О.И., Авдеева Е.В., Мизина П.Г. Количественное определение суммы гидроксикоричных кислот в надземной части Echinacea purpurea (L. ) Moench. // Растительные ресурсы. - 1998. - Т. 34, вып. 2. - С. 81-85.

7. Куркин В.А., Запесочная Г.Г., А.В. Мыцык, А.В. Куркина, К.С. Пименов, М.С. Марьина. Флавоноиды надземной части Artemisia dracunculus L., культивируемой в Самарской области // Растительные ресурсы. - 1996. - Т. 32, вып. 1-2. - С. 88-92.

8. Машковский М. Д. Лекарственные средства: В 2-х томах. Т. 1. - 11-е изд. - М.: Медицина. 1988. - 624 с.

9. Муравьева Д.А. Фармакогнозия. - М: Медицина, 1991. - 560 с.

10. Муравьева Д.А. Тропические и субтропические лекарственные растения. - М: Медицина, 1983. - 336 с.

11. Олешко Л.Н., Олешко Г.И. Средство для лечения слизистой рта // Патент РФ N 2058783. - A 61 K 35/78. - 27.04.96 г., Бюл. N 12.

12. Растения для нас. Справочное пособие / Под ред. Г.П. Яковлева и К.Ф. Блиновой. - С.-Петербург: Учебная книга, 1996. - 653 с.

13. Регистр лекарственных средств России / Под ред. Ю.Ф. Крылова. - М.: Инфармхим, 1993. - 1006 с.

14. Справочник Видаль. Лекарственные препараты в России: Справочник. - М. АстраФармСервис, 1997. - 1504 с.

15. Koch-Heitzmann I., Schultze W. Melissa officinalis // Z. Phytotherapie. - 1991. - Vol. 11, N. 2. P. 50-58.

16. Leng-Peschlov E., Strenge-Hesse A. Die Mariendistel (Silybum marianum) und Silymarin als Lebertherapeuticum // Z. Phytotherapie. - 1991. - Vol. 11, N. 2. - P. 50-58.

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности, в частности к производству лекарственных фитопленок пролонгированного действия для профилактики и лечения воспалительных заболеваний слизистой и кожных покровов организма, а также иммунных нарушений. В качестве вспомогательных веществ, наряду с желатином и глицерином, используют метилцеллюлозу, диметилсульфоксид и поливинилпирролидон. В качестве лекарственных субстанций водно-спиртовые извлечения из травы эхинацеи пурпурной или плодов расторопши пятнистой, или почек различных видов тополя, или цветков лаванды колосовой, или листьев шалфея лекарственного, или почек березы повислой, или цветков календулы лекарственной, или травы мелиссы лекарственной, или корней солодки голой, или коры сирени обыкновенной, или корневищ родиолы розовой, или травы полыни эстрагон (тархун), или травы монарды при следующем соотношении компонентов, мас.%: водно-спиртовые извлечения с 8-30, желатин 2,4-6, метилцеллюлоза 1-5, диметилсульфоксид 0,1-3,5, глицерин 0,5-4,0, поливинилпирролидон 0,1-2, вода очищенная - до 100. Изобретение позволяет получить лекарственные фитопленки, обладающие более выраженными адгезивными и пролонгирующими свойствами и большей биодоступностью. 18 ил., 1 табл.

Способ получения лекарственных фитопленок, включающий использование желатина (пленкообразователь), глицерина (пластификатор), водно-спиртовых извлечений лекарственных растений и воды очищенной, отличающийся тем, что способ осуществляют с использованием метилцеллюлозы (МЦ 16, 35, 65 и 100), поливинилпирролидона (ПВП), диметилсульфоксида (ДМСО) и водно-спиртовых извлечений из травы эхинацеи пурпурной, или плодов расторопши пятнистой, или почек различных видов тополя, или цветков лаванды колосовой, или листьев шалфея лекарственного, или почек березы повислой, или цветков календулы лекарственной, или травы мелиссы лекарственной, или корней солодки голой, или коры сирени обыкновенной, или корневищ родиолы розовой, или травы полыни эстрагон (тархун), или травы монарды при следующем соотношении компонентов, мас. %: водно-спиртовые извлечения из травы эхинацеи пурпурной, или плодов расторопши пятнистой, или почек различных видов тополя, или цветков лаванды колосовой, или листьев шалфея лекарственного, или почек березы повислой, или цветков календулы лекарственной, или травы мелиссы лекарственной, или корней солодки голой, или коры сирени обыкновенной, или корневищ родиолы розовой, или травы полыни эстрагон (тархун), или травы монарды - 8 - 30; желатин 2,4 - 6,0; метилцеллюлоза 1 - 5; диметилсульфоксид 0,1 - 3,5; глицерин 0,5 - 4,0; поливинилпирролидон 0,1 - 2,0; вода очищенная - до 100.