СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ КРАСНОГО ВОЛОСЯНОГО ЛИШАЯ ДЕВЕРЖИ Российский патент 1998 года по МПК G01N33/53 G01N33/48 

Изобретение относится к области медицины и может быть использовано в дерматологии.

Известен способ диагностики красного волосяного лишая Девержи (КВЛ) путем клинического обследования больного, включающий выявление эритематозной кожи с мелкопластинчатым шелушением, на фоне которой встречаются островки здоровой кожи, фолликулярных папул, эритродермия, ладонно-подошвенный гиперкератоз и дистрофические поражения ногтевых пластинок (Каламкарян А.А, Мордовцев В. Н. , Трофимова Л.Я. Болезнь Девержи. //Клиническая дерматология. Редкие атипичные дерматозы. - Ереван: Айастан, 1989. - С. 284-289). Однако клиническое обследование больного недостаточно для четкого разграничения между такими дерматозами, как псориаз, лекарственная токсидермия, лимфомы кожи.

В связи с этим помимо клинического обследования проводят морфологическое исследование пораженной кожи.

Известен способ диагностики КВЛ Девержи путем клинического обследования больного и морфологического анализа биоптата пораженной кожи, включающего гистологическое и электронно-микроскопическое исследование, причем гистологически выявляют паракератоз без исчезновения зернистого слоя, гипергранулез, перинуклеарный сток зернистых эпителиоцитов, отсутствие экзоцитоза нейтрофильных гранулоцитов и выраженный отек сосочкового слоя дермы, а электронно-микроскопически-скудное содержание тонофиламентов, большое количество гранул кератогиалина и пластинчатых гранул и по совокупности клинических и морфологических признаков диагностируют болезнь Девержи (Чистякова И.А., Альбанова В.И., Гетлинг З.М. Клинико-морфологическая характеристика красного волосяного лишая Девержи. //Вестник дерматологии и венерологии. 1992. N 8. с. 4-9.).

Согласно современным представлениям для точной диагностики КВЛ Девержи необходимо проведение дополнительного электронно-микроскопического исследования пораженной кожи.

Однако, известный клинико-морфологический способ диагностики не выявляет специфических изменений в эпидермисе пораженной кожи больного, характерных для КВЛ Девержи, что не позволяет точно установить диагноз и выделить КВЛ от других дерматозов и может привести к неправильной схеме лечения больных.

Целью исследования является создания способа диагностики КВЛ Девержи путем обнаружения изменений экспрессии цитокератинов в эпидермоцитах больных красных волосяным лишаем Девержи.

Цитоскелет эпидермоцитов кожи человека представлен белками промежуточных филаментов эпителиальных клеток - цитокератинами (ЦКР). Согласно каталогу цитокератинов, созданного Рональдом Моллом (Moll R., Franke W., Schiller D. et al.The catalogue of human cytokeratins: patterns of expression in normak epitelia. Tumor and cultured cella. //Cell. 1982. Vol. 31. F.11-24, Moll R. Epitelial tumor markere: cytokeratins and tissue polypeptide antigen (TRA). //Curr.Top.Pathol. 1987. Vol.77. P.7-101) в эпителиальных клетках имеется 20 цитокератиновых белков от N 1 до N 20. Часть цитокератинов экспрессируется в простом (одинаковом) эпителии (ЦКР NN 7, 8, 18, 19), часть - в неороговевающем плоском эпителии (ЦКР NN 4, 13). В кератиноцитах эпидермиса человека экспрессируется группа ЦКР NN 1, 2, 5, 10, 11, 14, 15. Цитокератин N 17 (молю масса 46 КДА) обнаруживается в базальных слоях сложных эпителиев, миоэпителии, резервных клетках бронхиального эпителия и слизистой оболочки шейки матки и др. В эпидермисе здорового человека экспрессии ЦКР N 17 не происходит.

Предлагаемый способ диагностики осуществляется следующим образом. Вначале проводят обычное клиническое обследование больного. После выявления визуально эритематозной кожи с мелкопластинчатым шелушением, на фоне которой встречаются островки здоровой кожи, эритродермия, ладонно-подошвенный гиперкератоз и дистрофические поражения ногтевых пластинок и пальгаторно-фолликулярных папул, производят биопсию пораженной кожи и полученные на криостате срезы окрашивают иммуногистохимически с помощью моноклональных антител E 3 к цитокератину N 17. В эпидермисе больных КВЛ Девержи наблюдается окрашивание на цитокератин N 17 в супрабазальном, шиповатом и зернистом слоях (см. чертеж), в то время как в эпидермисе здорового человека этот цитокератин не обнаруживается (Петров С.В., Райхлин Н.Т., Серре Г. Применение моноклональных антител к цитрокератиновым пептидам и белкам десмосом для диагностики базально-клеточного рака кожи. //Архив патологии. 1991. N 6, с.7-11; Troyanovsky S.M., Guelstein V.I., Tchipysheva T.A. et al. Patterns of expression jf keratin 17 in epithelia: dependcy on cell position. // J. Cell Science. 1989. Vol.93. P.419-426).

Антитела E 3 к цитокератину N 17 производства объединения "ДИА-М" (г. Москва) получены и иммунохимически охарактеризованы в лаборатории механизмов канцерогенеза НИИ экспериментального канцерогенеза Онкологического научного центра РАМН (г. Москва) (Troyanovsky S.M., Guelstein V.I., Tchipysheva T.A. et al. Patterns jf expression of keratin 17 in epitelia: dependency on position //J.Cell Science. - 1989. - Vol.93. - P.419-426).

По совокупности клинических и иммуногистохимических признаков диагностируют заболевание. Именно использование иммуногистохимического метода с помощью моноклональных антител E 3 позволило устанавливать наличие цитокератина N 17 в супрабазольном, шиповатом и зернистом слоях эпидермиса больных красным волосяным лишаем Девержи.

Предлагаемый способ диагностики позволяет четко дифференцировать КВЛ Девержи без проведения электронно-микроскопического исследования пораженной кожи.

Использование: в области медицины, в частности в дерматологии. Сущность изобретения: больному проводят клиническое и иммуноморфологическое исследование с помощью моноклональных антител E 3 к цитокератину N 17, который обнаруживается в отличие от здоровой кожи в супрабазальном, шиповатом и зернистом слоях эпидермиса. При этом клинически выявляют эритематозную кожу с мелкопластинчатым шелушением, на фоне которого встречаются островки здоровой кожи, фолликулярные папулы, эритродермия ладонно-подошвенный гиперкератоз и дистрофические поражения ногтевых пластинок. После этого по совокупности клинических и иммуногистохимических признаков диагностирую заболевание. Способ позволяет четко дифференцировать красный волосяной лишай. Девержи без проведения электронно-микроскопического исследования пораженной кожи. 1 ил.

Способ диагностики красного волосяного лишая Девержи путем клинико-морфологического исследования больного, включающего выявление эритематозной кожи с мелкопластинчатым шелушением, на фоне которой встречаются островки здоровой кожи, фолликулярных папул, эритродермии, ладонно-подошвенного гиперкератоза и дистрофических поражений ногтевых пластинок, отличающийся тем, что дополнительно проводят иммуногистохимическое исследование срезов биптатов пораженной кожи с использованием моноклональных антител Е 3 к цитокератину N 17, который обнаруживается, в отличие от здоровой кожи, в супрабазальном, шиповатом и зернистом слоях эпидермиса и по совокупности клинических и иммуногистохимических признаков диагностируют заболевание.