КАМЕРА ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ КЛЕТОК В КУЛЬТУРЕ Российский патент 1998 года по МПК C12M3/00 

Устройство относится к области биологии и предназначено для исследования культивируемых клеток методами цитофотометрии и электрофизиологии как раздельно, так и одновременно.

Известны проточные камеры для электрофизиологического и микроскопического исследования клеток в культуре, например камеры в виде открытой сверху чашки, снабженной патрубками для подвода и отбора культуральной среды (1). Прозрачная чашка из стекла или пластика дает возможность свободного доступа микроэлектродов к клеткам. Вместе с тем открытая поверхность жидкости подвержена колебаниям, вследствие шумовых механических вибраций, работы устройств протоки, что затрудняет или исключает проведение цитофотометрии. Кроме того, открытая поверхность создает нежелательное испарение воды.

За прототип выбрана камера полузакрытого типа, представляющая собой плоский капилляр, открытый с одной или двух торцевых сторон, сообщающийся через узкие каналы с двумя открытыми вертикальными "колодцами" (2). Недостатком таких устройств является нестабильность уровня жидкости в капилляре, вследствие относительно высокого сопротивления соединительных узких каналов.

Задача, решаемая изобретением - упрощение системы соединения и повышение стабильности поддержания постоянного уровня жидкости в рабочей части камеры.

Решение данной задачи достигается путем исключения узких соединяющих каналов и одной из шахт. Камера (фиг. 1) выполнена в виде двух сообщающихся сосудов, один из которых представляет собой плоский капилляр 1, непосредственно, т.е. без сужений и промежуточных узких каналов, а другой сосуд - вертикальную цилиндрическую емкость 2. Края 3 плоского капилляра, обращенные наружу, выполнены несмачиваемыми.

Отводящий патрубок 4 в виде иглы со скосом расположен по оси цилиндра, подводящий 5 изогнут на 90 градусов и может вращаться вокруг вертикальной оси. Третий патрубок 6 предназначен для аэрации культуральной среды. В верхней стенке цилиндра имеется отверстие 7 для отведения избытка газа аэрации и выравнивания давления с атмосферным.

После подачи раствора камера заполняется полностью при условии, что скорость отбора среды больше скорости подачи. Гидростатическое давление столба жидкости в вертикальном цилиндре, определяемое высотой края трубки отбора среды, компенсируется силами смачивания в плоском капилляре.

Пример 1. Устройство выполнено из стекла, как описано выше. Покровное стекло 8 с культивируемыми клетками может быть закреплено с помощью механического зажима или парафиновой замазки на верхней или на нижней стенках плоского капилляра, что делает возможным использование прямых и инвертированных микроскопов. Камера стерилизуется автоклавированием.

Пример 2. То же, что и пример 1, но камера выполнена из нетоксичного прозрачного пластика. В этом случае камера является одноразовой или при необходимости стерилизуется ультрафиолетовым или гамма-облучением.

Практическое использование при одновременных электрофизиологических и цитофотометрических исследованиях нейронов в культуре показало надежное поддержание уровня культуральной среды при изменениях скорости протока и минимальную зависимость уровня от испарения при отключении перфузии в течение 24 ч.

Источники информации
1. Руководство по культивированию нервной ткани. - М.: Наука 1976, с. 211.

2. Приборы и методы для микроэлектродного исследования клеток. Пущино, 1975, с. 47.

Использование: относится к области биологии, медицинским исследованиям и микробиологии. Сущность изобретения: камера содержит оптически прозрачные стенки, патрубки для ввода и вывода культуральной среды, при этом камера выполнена в виде двух сообщающихся сосудов, один из которых представляет собой плоский капилляр из смачиваемого водой материала, который непосредственно переходит в цилиндрическую вертикальную емкость, причем обращенные наружу края открытого плоского капилляра сделаны несмачиваемыми. 1 з. п. ф-лы, 1 ил.

\ \\1 1. Камера для исследования клеток в культуре, содержащая оптически прозрачные стенки и патрубки для ввода и вывода культуральной среды, отличающаяся тем, что камера выполнена в виде двух сообщающихся сосудов, один из которых представляет собой плоский капилляр, а второй вертикальную цилиндрическую емкость, при этом края плоского капилляра, обращенные наружу, выполнены несмачиваемыми. \\\2 2. Камера по п.1, отличающаяся тем, что патрубок для подвода культуральной среды выполнен изогнутым на 90<198> и установлен с возможностью вращения вокруг вертикальной оси.