ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ, СОДЕРЖАЩАЯ ПРОИЗВОДНОЕ ЦИКЛОСПОРИНА, СПОСОБ ЕЕ ПОЛУЧЕНИЯ Российский патент 1999 года по МПК A61K38/13 A61K9/107 

Настоящее изобретение касается фармацевтического состава, имеющего в качестве активной составляющей производное циклоспорина, которое применяется при лечении синдрома множественной лекарственной устойчивости. В частности, данное изобретение относится к фармацевтическому составу, который содержит в качестве активного ингредиента [3'-дезокси-3'-оксо-MeBmt]¹-[Va1] ²-циклоспорин.

Устойчивость опухолевых клеток к химиотерапевтическим препаратам является основной причиной неудач химиотерапии. Одной из форм устойчивости к химиотерапевтическим препаратам является "множественная лекарственная устойчивость", когда опухолевые клетки становятся полностью невосприимчивыми к большинству химиотерапевтических препаратов, таких как: алкалоиды, антрациклины, актиномиксин-D, адриамицин и колхицин. Синдром множественной лекарственной устойчивости во многих работах связывали с чрезмерной выраженностью трансмембранных гликопротеинов, называемых P-гликопротеинами (Pgp). Было отмечено, что циклоспорины устраняют синдром множественной лекарственной устойчивости, в частности эффективным оказался [3'-дезокси-3'-оксо-MeBmt] ¹-[Va1]²-циклоспорин [1].

Циклоспорины составляют класс структурно обособленных, циклических поли-N-метилированных ундекапептидов, в большинстве случаев обладающих фармацевтической, в частности иммуносупрессивной, противовоспалительной и/или антипаразитной активностью в большей или меньшей степени. Циклоспорины в основном совершенно не растворимы в воде. Следовательно, проблемы возникают в разработке фармацевтически приемлемого носителя, который бы позволил доставить лекарство в достаточно высокой концентрации для его удобного применения и который позволил бы эффективную и стойкую абсорбцию лекарства организмом. Отдельные циклоспорины также абсорбцию лекарства организмом. Отдельные циклоспорины также представляют очень специфичные проблемы в отношении их введения, в частности при применении галеновых форм. Ряд специфических проблем также возникает в связи с биологической пригодностью лекарств и разнообразием в реакциях пациентов на дозы. Это относится и к соединению [3'-декокси-3'-оксо-MeBmt]¹-[Val]²-циклоспорин, это вещество приводит к определенным трудностям при применении содержащих его галеновых форм.

Что касается общих проблем лекарственных форм циклоспоринов, известны [2] галеновые формы, содержащие циклоспорины, которые представляют собой микроэмульсии или микроэмульсионные преконцентраты. Эти формы состоят из гидрофильной, липофильной фаз и поверхностно-активного вещества. Приводятся следующие компоненты гидрофильной фазы: транскутол, гликофурол и 1,2-пропилен гликоль. Отмечено, что цепочка триглицеридов жирных кислот средней длины подходит для липофильной фазы. Продукты реакции натуральные или гидрогенезированных растительных масел и этилен гликоля предлагаются как поверхностно-активные вещества. Однако не затронуты [2] проблемы образования лекарственной формы [3'-дезокси-3'-оксо-MeBmt]¹-[Val]²-циклоспорина, который является более липофильным, чем большинство других циклоспоринов.

Неожиданно было обнаружено, что могут быть получены устойчивые лекарственные формы, содержащие [3'-дезокси-3'-оксо-MeBmt]¹-[Val]²-циклоспорин в качестве активного компонента, который имеет хорошую биологическую пригодность и хорошие характеристики вариабильности между пациентами.

Таким образом, данное изобретение предлагает фармацевтическую композицию, которая в качестве активного ингредиента содержит [3'-дезокси-3'-оксо-MeBmt]¹-[Val]²-циклоспорин, среду-носитель, включающую в себя (1) гидрофильную фазу, (2) трансэтерифицированное этоксилированное растительное масло и (3) поверхностно-активное вещество. Желательно, чтобы эта композиция была в форме микроэмульсии или в форме микроэмульсионного преконцентрата.

Эта композиция обнаруживает неожиданно высокую биологическую пригодность (в два раза более высокую по сравнению с общепринятой формой циклоспорина) и, следовательно, доза [3'-дезокси-3'-оксо-MeBmt] ¹-[Val] ²-циклоспорина, которую требуется принять, может быть уменьшена. Композиция также удобна для использования и обеспечивает эффективную и стойкую абсорбцию [3'-дезокси-3'-оксо-MeBmt] ¹-[Val] ²-циклоспорина организмом. Композиция, в частности, эффективна при лечении синдрома множественной лекарственной устойчивости, например, у онкологических больных, подвергшихся химиотерапии.

Предпочтительно, чтобы композиция была в форме "микроэмульсионного преконцентрата", в частности в виде микроэмульсии o/w (масло в воде). Однако композиция может быть и в форме микроэмульсии, которая дополнительно содержит и водную фазу, лучше всего воду.

"Микроэмульсионный преконцентрат", обозначает в данном описании лекарственную форму, которая спонтанно образует микроэмульсию в водной среде, например в воде или в желудочном соке, после перорального приема лекарства. Составление такой микроэмульсии желательно для решения вышеуказанных проблем.

"Микроэмульсия" является неопалесцирующей или несущественно опалесцирующей коллоидной дисперсией, которая образуется спонтанно или по большей части спонтанно, когда ее компоненты приходят в соприкосновение. Микроэмульсия термодинамически стабильна и содержит дисперсные частицы размером менее 2000 Обычно микроэмульсия состоит из капелек или частиц, имеющих диаметр менее 1500 чаще всего от 100 до 1000 Более подробную характеристику можно найти в [2].

"Фармацевтическая композиция" представляет собой композицию, в которой отдельные компоненты или ингредиенты сами по себе являются фармацевтически приемлемыми и, если предусматривается особая форма применения, они пригодны или приемлемы для такой формы применения.

Трансэтерифицированное этоксилированное растительное масло может составлять от 10 до 85% от массы среды-носителя, предпочтительно от 15 до 70% от массы, более предпочтительно от 20 до 60% и еще более предпочтительно приблизительно 20% от массы.

Поверхностно-активное вещество составляет от 5 до 80% от массы среды-носителя, предпочтительно от 10 до 70% от массы, более предпочтительно от 20 до 60% от массы и еще более предпочтительно около 60% от массы.

Гидрофильная фаза может составлять от 10 до 50% от массы среды-носителя, предпочтительно от 15 до 40% от массы, более предпочтительно от 20 до 30% от массы и еще более предпочтительно около 20% от массы.

Гидрофильная фаза может быть выбрана из транскутола (который имеет формулу C₂H₅-[O-(CH₂] ₂-OH), гликофурола (известного также как тетрагидрофурфурилового спирта полиэтилен гликолевый эфир) и 1,2-пропилен гликоля или смеси их, но предпочтительнее всего 1,2-пропилен гликоль. Гидрофильная фаза может, кроме того, включать гидрофильные сокомпоненты, как например этиловый спирт. Эти сокомпоненты присутствуют в основном при частичном замещении других компонентов гидрофильной фазы. Хотя использование этилового спирта в композициях не является существенным, замечено, что это имеет преимущества, когда композиция готовится на мягком желатине (инкапсулированная форма). Из-за этого улучшаются свойства хранения, в частности уменьшается риск выпадения в осадок циклоспорина в результате инкапсуляции. Таким образом, стабильность при нахождении в оболочке может быть продлена при применении этанола или какого-либо другого сокомпонента в качестве добавочного компонента гидрофильной фазы. Этанол может составлять от 0 до 60% от массы гидрофильной фазы, предпочтительно от 20 до 55% от массы и еще более предпочтительно около 55% от массы.

Желательно, чтобы активный инградиент составлял от 5 до 15% от массы композиции, еще лучше около 10%.

Подходящее трансэтерифицированное этоксилированное растительное масло может быть получено при реакции различных природных растительных масел (например, маисового, орехового, миндального, арахисового, оливкового, соевого, подсолнечного, сафлорового, пальмового масла или их смеси) с полиэтиленгликолем, который имеет среднюю молекулярную массу от 200 до 800, в присутствии соответствующего катализатора. Эти способы известны [3] и описаны примеры. Трансэтерифицированное этоксилированное кукурузное масло особенно пригодно для этого.

Наиболее известны и коммерчески доступны трансэтерифицированные этоксилированные растительные масла под торговым названием Labrafil [4]. Примерами являются Labrafil M 2125 CS (полученный из кукурузного масла и имеющий кислотное число менее чем около 2, число омыления от 155 до 175, величину HLB от 3 до 4 и иодное число от 90 до 110) и Labrafil M 194 CS (полученный из орехового масла и имеющий кислотное число около 2, число омыления от 145 до 175 и иодное число от 60 до 90). Может быть также использован Labrafil M 2130 CS (который является продуктом этерификации C_12-18 глицерида и полиэтиленгликоля и имеет температуру плавления от 35 до 40^oC, кислотное число менее чем около 2, число омыления от 185 до 200 и иодное число менее чем 3). Предпочтительно использовать трансэтерифицированное этоксилированное растительное масло Labrafil M 2125 CS, которое может быть получено из Gattefosse, Saint-Priest Cedek, France.

Поверхностно-активное вещество может состоять из продуктов реакции натурального или гидрогенезированного касторового масла и окиси этилена. Натуральное или гидрогенезированное касторовое масло может вступать в реакцию с окисью этилена в молярных отношениях в диапазоне от 1:35 до 1:60 с возможным удалением компонента полиэтиленгликоля из продуктов реакции. Коммерчески доступны такие различные поверхностно-активные вещества. Особенно подходит полиэтиленгликоль-гидрогенезированное касторовое масло, известное под торговым названием Cremophor RH 40, который имеет число омыления от 50 до 60, кислотное число менее чем около 1, содержание воды по Фишеру менее чем около 2%, n60D

от 1,453 до 1,457 и HLB от 14 до 16, Cremophor RH60, который имеет число омыления от 40 до 50, кислотное число менее чем 1, иодное число менее чем около 1, содержание воды по Фишеру от 4,5 до 5,5%, n25D от 1,453 до 1,457 и HLB от 15 до 17, и Cremophor EL, который имеет молекулярный вес около 1630 (по паровой осмометрии), число омыления от 65 до 70, кислотное число около 2, иодное число от 28 до 32 и n25D около 1,471.

Могут быть также использованы подобные или идентичные продукты под торговым названием Nikkol (например HCO-40 и HCO-60), Mapeg (например Mapeg CO-40h), Incorocas (например Incorocas 40) и Tagat (например Tagat RH 40). Эти поверхностно-активные вещества также описаны [4].

Поверхностно-активные вещества могут быть также выбраны из эфиров полиоксиэтилен сорбитановых жирных кислот, таких как моно- и три-лаурил, пальмитил-, стеарил- и олеил эфиры. Примерами имеющихся в продаже эфиров являются эфиры, известные под торговым названием Tween ([4], стр. 1300-1304), в частности Tween-60 (полиоксиэтилен (20) сорбитанмоностеарат) и Tween-80 (полиоксиэтилен (20) сорбитаинмоноолеат).

Лучше всего использовать в качестве поверхностно-активного вещества Cremophor RH 40.

Композиции также могут включать в себя другие добавки и ингредиенты, например антиоксиданты (такие как аскорбил пальмитат, бутил гидрокси анизол (BHA), бутил гидрокси толуол (BHT) и токоферолы) и/или консервирующие вещества. Эти добавки или ингредиенты могут составлять от 0,05 до 1% от общей массы композиции. Композиции могут также включать подслащивающие или ароматизирующие вещества в количестве до 2,5 или 5% от массы композиции. Наиболее подходящим антиоксидантом является α- токоферол (витамин E).

Композиции проявляют особенно полезные свойства при пероральном применении, например в отношении консистенции и высокого уровня биологической применимости, полученных при стандартных испытаниях. Эти испытания выполнены на здоровых людях с использованием неспецифически моноклонального набора для определения уровня [3'-дезокси-3'-оксо-MeBmt] ¹-[Val] ²-циклоспорина. Результаты показали, что может быть получена по меньшей мере на 170% более высокая переносимость у млекопитающих и примерно на 200% выше у людей (по сравнению с имеющейся в продаже пероральной формой циклоспорина). Это означает, что дозировка, которая должна быть применена, может быть уменьшена по сравнению с имеющейся в продаже пероральной формой. Эти композиции дают также обладают способностью меньше взаимодействовать с пищей, чем имеющаяся в продаже пероральная форма циклоспорина, особенно с пищей, богатой жиром. Более того, при применении данных композиций изменения фармококинетических параметров в субъекте и у разных субъектов могут быть значительно ниже, чем у имеющихся в продаже пероральных форм циклоспорина. Особенно могут быть уменьшены различия между фармакокинетическими параметрами при приеме пищи и без приема пищи или даже между дневным и ночным временем абсорбции.

Таким образом, фармакокинетические параметры, например абсорбция и показатели крови, становятся на удивление более предсказуемыми и проблемы в назначении с ошибочной абсорбцией могут быть ограничены или уменьшены. Кроме того, композиция совместима с тенсидными материалами, например с желчными солями, которые присутствуют в желудочно-кишечном тракте. То есть композиция полностью дисперсна в водной системе, содержащей такие натуральные тенсиды, и способна таким образом создавать микроэмульсионные системы in situ (непосредственно на месте применения), которые стабильны и не дают преципитации активного ингредиента или другого нарушения тонкой структуры. Функция композиции при пероральном назначении остается в значительной степени независимой и/или неизменной при присутствии или отсутствии желчных солей в какой-либо промежуток времени или для какого-либо человека.

Композиции составляют предпочтительно в штучной дозированной форме, например, заключая их в оболочки капсул для перорального применения. Капсульные оболочки могут быть мягкими или твердыми желатиновыми оболочками. Если композиции приготавливают в виде штучных дозированных форм, каждая штучная доза должна содержать от 10 до 200 мг [3'-дезокси-3'-оксо-MeBmt]¹-[Val] ²-циклоспорина, более предпочтителен в дозировках между 10 и 150 мг; например 15, 20, 25, 50 или 100 мг 3'-дезокси-3'-оксо-MeBmt]¹-[Val] ²-циклоспорина. Такие штучные дозированные формы пригодны для применения от 1 до 5 раз в день в зависимости от особых терапевтических задач, фазы лечения и т.п.

Однако, если требуется, композиция может быть приготовлена в виде питьевого раствора и включать в себя воду или другую водную систему, чтобы микроэмульсионная система была пригодна для питья.

Полезность композиций можно наблюдать в стандартных клинических тестах [1] при использовании доз от 200 до 1800 мг в день на 75 кг для взрослых и в стандартных тестах на животных. Возросшую биологическую пригодность активного ингредиента, обеспечиваемую такой композицией, можно наблюдать в стандартных тестах на животных, как это описано на примере 13, и в клинических испытаниях.

Оптимальная доза, которая назначается отдельному больному, должна быть тщательно рассчитана лечащим врачом по индивидуальной реакции, при этом метоболизм [3'-дезокси-3'-оксо-MeBmt] ¹-[Val]²-циклоспорин может варьивать. Желательно проверять величины циклоспорина в сыворотке крови радиоиммунным анализом, анализом с моноклональными антителами или другими соответствующими стандартными средствами. Дозы [3'-дезокси-3'-оксо-MeBmt]¹-[Val]²-циклоспорин для лечения множественной лекарственной устойчивости в основном находятся в диапазоне от 200 мг до 1800 мг в день для взрослого человека 75 кг массой, предпочтительно 300-1500 мг, при оптимальной суточной дозе около 500 мг. Удовлетворительные результаты получены при назначении около 500 мг в день в форме пяти капсул, содержащих каждая по 100 мг или десяти капсул по 50 мг каждая.

Кроме того, изобретение также включает в себя способ приготовления фармацевтической композиции, которая описана выше, что включает в себя доставку (1) гидрофильной фазы, (2) трансэтерифицированного этоксилированного растительного масла и (3) поверхностно-активного вещества в однородной смеси в соответствующих пропорциях компонентов (1), (2) и (3) и добавление активного ингредиента. Если необходимо, композиция может быть выполнена в виде единичной дозированной формы, например в виде желатиновых капсул, наполненных композицией.

В некоторых случаях дополнительные компоненты или добавки, в частности сокомпоненты гидрофильной фазы, например этанол, могут быть смешаны с компонентами (1), (2) и (3) при добавлении или после добавления активного ингредиента.

В композицию может быть добавлено достаточное количество воды или водного разбавителя для получения микроэмульсии.

Реализация изобретения описана только в виде примера со ссылкой на чертеж, в котором показаны графически три направления изменения концентраций наиболее пригодных компонентов среды-носителя, которые дают микроэмульсионные преконцентраты при постоянной концентрации активного ингредиента, равной 10%, и этанола - 15%. Лекарственные формы, обозначенные внутри заштрихованной зоны, спонтанно образуют микроэмульсии в водной среде. Лекарственные формы, попадающие за пределы заштрихованной зоны, образуют другие дисперсные системы в водной среде, например эмульсии.

Следующие примеры иллюстрируют некоторые предпочтительные формы изобретения (см. табл. 1-3).

Для приготовления композиции тщательно смешивают Labrafil M 2125 CS, Cremophor RH 40 (или Tween) и полипропилен гликоль, а затем дегазируют. Затем суспендируют в смесь [3'-дезокси-3'-оксо-MeBmt]¹-[Val]²-циклоспорин и снова дегазируют. Затем к смеси добавляют этанол. PEG(полиэтиленгликоль)-гидрогенезированное касторовое масло возможно необходимо слабо подогреть (т. е. приблизительно до 30^oC), пока оно не станет прозрачной жидкостью. Полученная композиция пригодна для перорального применения как питьевой раствор или в мягких желатиновых капсулах, содержащих мерное количество, например 1 мл композиции. Композиции набивают в капсулы и запечатывают с помощью Quali-Seal оборудования.

Стабильность.

Капсулы упаковывают в двухстороннюю алюминевую упаковку и хранят при 5^oC, 25^oC (при 50% влажности) и 30^oC (при 65% влажности). Капсулы проверяются после 6 и 12 месяцев. Никаких изменений внешнего вида и содержимого капсул не наблюдается. Следовательно капсулы очень стабильны.

Образец 13. Биологическая пригодность для собак.

Биофармацевтические свойства композиции примера 1 сравниваются с имеющимся в продаже циклоспорином (Ciclosporin) в мягких желатиновых капсулах. Эти формы сравнивают после перорального применения 7 собаками, самцам гончей породы, при перекрестных назначениях. Фармакокинетический профиль активного ингредиента определяли в цельной крови на протяжении 24 часов. Определялась площадь под кривой концентрации крови в зависимости от времени (AUC), C_max и T_max. Использовали дозы активного ингредиента от 50 до 350 мг; у 2 собак по 50 мг и у 5 собак по 350 мг.

Композиция X (коммерческая форма, мягкая желатиновая капсула), мас.%:
Ciclosporin - 11
Labrafil - 32
Этанол - 11
Кукурузное масло - 46
Введение лекарства.

В опыте использовали 7 собак самцов гончей породы весом около 12 кг каждая. За 20 ч до приема лекарства пищу убирали, но животным позволяли свободно подходить к воде вплоть до начала эксперимента. Дозы вводили животным через зонд, рано утром (приблизительно в 8,00), с последующим применением 20 мл 0,9%-ного раствора NaCl. В течение трех часов после приема лекарства животным снова разрешали свободно подходить к воде и пище. Между 2 введениями лекарства одному и тому же животному необходим перерыв в одну неделю.

Анализ крови.

Пробы крови в количестве 2 мл (или 5 мл для холостой пробы) брали из головной вены (или из вены передней конечности) стерильной иглой (диаметр около 1,2 мм) в 5 мл пластмассовую пробирку, содержащую ЕДТА. Пробы брали перед введением лекарства и через 15 минут, 30 минут, 45 минут, через 1 час, 1,5 часа, 2 часа, 3 часа, 4 часа, 6 часов, 8 часов, 12 часов и 24 часа после перорального приема лекарства. Пробы крови хранят при -20^oC пока не закончится испытание лекарства. Пробы крови анализируются неспецифическим радиоиммунологическим методом (RA). Площади под кривыми концентрации лекарства в крови в зависимости от времени (AUC) рассчитывали по правилу трапеции. Выполнен анализ отклонений (CV), значения AUC, C_max и T_max сравнивали статически по тесту Tukey. Полученные результаты показаны в табл. 4.

Заключение. Композиция примера 1 имеет значительно более высокую биологическую пригодность (фактор 1.7 при дозе 350 мг и фактор 2.1 при дозе 50 мг), чем коммерческая (мягкие желатиновые капсулы циклоспорина).

Литература
1. EP N 296122.

2. GB, заявка, 2222770 А.

3. Патент США N 3288824.

4. Fiedler H. Lexikon der Hilfsstoffe, 3^rd edition, val 2, page 707, pp. 1300-1304.

Фармацевтическая композиция содержит в качестве активного ингредиента [3'-дезокси-3'-оксо-MeBmt] ¹-[Va1] ²-циклоспорин. Она представляет собой микроэмульсию или микроэмульсионный преконцентрат с использованием среды-носителя, которая содержит гидрофильную фазу, трансэтерифицированное этоксилированное растительное масло и поверхностно-активное вещество. Композиция имеет более хорошую стабильность, биофармацевтические свойства и может быть применена при лечении синдрома множественной лекарственной устойчивости у людей. 2 с. и 11 з.п.ф-лы, 4 табл., 1 ил.

1. Фармацевтическая композиция, включающая в качестве активного компонента производное циклоспорина и в качестве среды-носителя - трансэтерифицированное этоксилированное растительное масло, отличающаяся тем, что в качестве производного циклоспорина она содержит эффективное количество [3'-дезокси-3'-оксо-MeBmt]¹-[Va1]²-циклоспорина, а среда-носитель содержит дополнительно гидрофильную фазу и поверхностно-активное вещество. 2. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что она находится в форме микроэмульсионного концентрата, предшествующего микроэмульсии типа масло в воде. 3. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что она содержит трансэтерифицированное этоксилированное растительное масло в количестве 10 - 85% от массы среды-носителя, поверхностно-активное вещество в количестве 5 - 80% от массы среды-носителя и гидрофильную фазу в количестве 10 - 50% от массы среды-носителя. 4. Композиция по п.3, отличающаяся тем, что она содержит трансэтерифицированное этоксилированное растительное масло в количестве 15 - 70% от массы среды-носителя, поверхностно активное вещество в количестве 10 - 70% от массы среды-носителя и гидрофильную фазу в количестве 15 - 40% от массы среды-носителя. 5. Композиция по п.4, отличающаяся тем, что она содержит трансэтерифицированное этоксилированное растительное масло в количестве 20% от массы среды-носителя, поверхностно-активное вещество в количестве 60% от массы среды-носителя и гидрофильную фазу в количестве 20% от массы среды-носителя. 6. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что гидрофильная фаза содержит компонент, выбранный из группы, включающей в себя транскутол, гликофурол и 1,2-пропиленгликоль или их смесь. 7. Композиция по п.6, отличающаяся тем, что гидрофильная фаза содержит дополнительно этанол. 8. Композиция по п.7, отличающаяся тем, что она содержит этанол в количестве до 60% от массы гидрофильной фазы. 9. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что она содержит активный компонент в количестве 5 - 15% от массы композиции. 10. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что в качестве трансэтерифицированного этоксилированного растительного масла она содержит трансэтерифицированное этоксилированное кукурузное масло. 11. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что в качестве поверхностно-активного вещества она содержит продукт реакции натурального или гидрогенезированного касторового масла и окиси этилена или содержит сложный эфир полиоксиэтиленсорбитановой жирной кислоты. 12. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что она предназначена для применения при лечении синдрома множественной лекарственной устойчивости у людей. 13. Способ получения фармацевтической композиции, включающей смешивание компонентов, отличающийся тем, что осуществляют смешивание гидрофильной фазы, трансэтерифицированного этоксилированного растительного масла, поверхностно-активного вещества и добавляют активный компонент по п.1.