МАСЛЯНО-ПОЛИВИТАМИННЫЙ ПРЕПАРАТ Российский патент 1999 года по МПК A61K31/05 A61K31/07 A61K31/355 A61K38/02 

Изобретение относится к медицине, а именно к фармакологии, к каротинсодержащим лекарственным препаратам, обладающим разнопротекторными свойствами и предназначенным для лечения слизистых оболочек с поражением различной этиологии, снижения в организме продуктов перекисного окисления липидов.

Бета-каротин является природным источником витамина A. Одновременно, в связи с уникальной химической структурой, каротин является активным антиокислителем, нейтрализующим атомарный кислород и свободные радикалы в организме. Это свойство бета-каротина является основой для его применения в медицине в качестве радиопротектора и онкопрофилактического средства [1,2].

Каротин и витамин A повышают сопротивляемость организма человека к инфекционным заболеваниям, поддерживают в нормальном состоянии слизистые оболочки носа, горла, желудочно-кишечного тракта и являются необходимыми при лечении насморков, хронических ларингитов, болезней дыхательных путей. Рекомендуется принимать препараты каротина и витамина A при камнях в почках и мочевом пузыре, при заболевании сальных, потовых и слезных желез, при лечении поражений кожных покровов, ожогов, обморожений, асептических и гнойных ран (местное и общее применение) [3].

В настоящее время в медицине применяются два класса каротинсодержащих препаратов:
- экстракты из растительного сырья (масло шиповника, кароталин, сироп шиповника, облепиховое масло),
- раствор микробиологического каротина в масле (каротинил) [4].

Недостатком указанных препаратов является большое количество примесей, которые переходят в раствор в процессе экстракции из исходного сырья одновременно с каротином. В результате состав препаратов практически невозможно стандартизировать по количественному и качественному составу примесей.

Аналогом изобретения является ранозаживляющее средство [5], включающее каротин, витамин E, витамин A, витамин K и масло, причем в качестве витамина A используют раствор ретинола ацетата или пальмитата в масле, в качестве витамина E - альфа-токоферола ацетат, в качестве витамина K - 2-метил-1,4-нафтохинон, в качестве каротина - каротин микробиологический - (провитамин A) в масле в следующем соотношении компонентов, г/100 мл: раствор ретинола ацетата или ретинола пальмитата 0,283, альфа-токоферола ацетата 0,18 (282608 ME), 2-метил-1,4-нафтохинона 0,05, бутилокситолуол 0,02, раствор каротина микробиологического в масле - до 100 мл.

Основными недостатками, затрудняющими расширение сферы применения данного препарата являются:
- присутствие в его составе примесей микробного происхождения,
- высокое перекисное число, ограничивающее применение препарата в качестве антиокислителя, онко- и радиопротектора и снижающее его стабильность,
- нестерильность и, как следствие, запрет на обработку препаратом открытых ран и ожоговых поверхностей,
- возможное присутствие в составе препарата следов хлористого метилена, растворителя, запрещенного для внутреннего применения.

Основным действующим веществом известного ранозаживляющего средства является раствор микробиологического каротина в масле. Данный раствор получают экстракцией каротина из биомассы гриба Blakeslea trispora подсолнечным маслом.

Известно, что биомасса гриба представляет собой длинные вакуолизированные клетки, заполненные мицелиальным жиром, который гриб синтезирует из липидов и углеводов питательной среды. Во время ферментации гриб накапливает до 50% жира от массы сухих веществ биомассы. Бета-каротин находится в клетках гриба в виде раствора в мицелиальном жире [6].

Как видно из представленных в таблице 1 результатов сравнительного газохроматографического анализа, жирно-кислотный состав мицелиального (внутриклеточного) жира отличается от подсолнечного масла по содержанию C4: 0, C6:0 и C14:0 жирных кислот (см. таблицу 1).

В процессе экстракции каротина подсолнечным маслом в экстракт вместе с каротином из биомассы переходит мицелиальный жир, а следовательно и липиды микробного происхождения. Кроме того, в клетках гриба обнаружены другие каротиноиды (альфа- или гамма-каротин, ликопин), стероиды, пренолы и убихиноны [7] . Эти вещества могут вызывать аллергические реакции при приеме лекарственных средств на основе раствора микробиологического каротина в масле.

Количественно нормировать степень загрязнения готового препарата примесями микробного биосинтеза не представляется возможным вследствие значительного колебания биосинтетической активности продуцента от условий ведения процесса, времени года, селекционной работы и др., но их присутствие легко обнаруживается методом спектрофотометрии.

Примеси посторонних каротиноидов, продукты разложения и метаболизма продуцента поглощают световое излучение в области 270 -430 нм. В зарубежных фармакопеях качество каротина определяется косвенно по геометрическим характеристикам спектра, которые должны соответствовать эталонному 96% очищенному образцу полностью транс- бета-каротина, при этом, чем больше соотношение оптических плотностей растворов препарата при 455 нм к 340 нм, тем меньше примесей он содержит [8].

Опытами показано, что раствор кристаллического каротина, 96%, в масле имеет меньшее поглощение светового излучения в области 270-430 нм (38 - 23, см •1000^-1), чем экстракт биомассы при одинаковой оптической плотности в области главного максимума -455 нм (22 см•1000^-1) (см. фиг. 1). Аналогичный характер кривых наблюдается в спектрах заявленного масляно-поливитаминного препарата и известного ранозаживляющего средства (см. фиг.2), что свидетельствует о меньшем содержании примесей, поглощающих ультрафиолетовое излучение, в заявленном препарате в сравнении с прототипом.

Эта закономерность наблюдалась и при сравнительном анализе препаратов методом высокоэффективной жидкостной хроматографии.

Отсутствие пиков примесей в области 30-40 мм при одинаковых площадях пика каротина (10-12 мм) (см. фиг. 3) свидетельствует о значительном снижении примесей в растворе, приготовленном из химически однородного сырья.

На хроматограммах известного и заявленного поливитаминного препарата наблюдаются отличия в области 47-60 мм, где отчетливо выделяются два пика посторонних примесей в препарате, приготовленном на основе раствора микробиологического каротина в масле (см. фиг. 4).

Таким образом доказано, что предложенное изменение состава позволяет гарантировать отсутствие примесей микробных липидов, каротиноидов или др. продуктов биосинтеза.

Известно, что перекиси могут реагировать с биологическими молекулами, определяющими иммунозащитные свойства организма, вызывая их разрушение, что сопровождается развитием новобразований и сокращением продолжительности жизни [1,2]. Используемый в настоящее время способ производства раствора каротина микробиологического в масле [9] включает стадии сушки биомассы, экстракции каротина маслом при 90-95^oC, фильтрации. Данная технология не позволяет полностью исключить контакт технологических потоков с кислородом воздуха, и поэтому полученный раствор каротина микробиологического в масле имеет высокое перекисное число (см. пример 1).

Предложенный состав препарата исключает присутствие примесей, инициирующих перекисное и кислотное разрушение липидов. Поэтому в опытах установлено снижение кислотного и перекисного числа в 1,5 - 2 раза в сравнении с прототипом.

Цель изобретения - улучшение качества, стабильности и, как следствие, исключение побочного действия и расширение области применения препарата.

Указанная цель достигается за счет того, что разработан масляно-поливитаминный препарат на основе известного ранозаживляющего средства, включающего каротин, витамин E, витамин A, витамин K и жир. Причем в качестве витамина A используют раствор ретинола ацетата или пальмитата в масле, витамина E - альфа-токоферола ацетат, витамина K - 2-метил-1,4-нафтохинон при следующих концентрациях компонентов: ретинола ацетат или пальмитат от 254000 до 311000 ME/100 мл, альфа-токоферола ацетат от 0,16 до 0,20 г/100 мл, 2-метил-1,4-нафтохинон от 0,04 до 0,06 г/100 мл, бутилокситолуол, не более 0,02 г/100 мл.

Отличие заявленного масляно-поливитаминного препарата состоит в том, что источником каротина вместо раствора микробиологического каротина в масле служит не содержащий примесей, стандартный по составу кристаллический каротин (с массовой долей основного вещества более 96%) не менее 0,18 г/100 мл, а в качестве масла - очищенный природный жир - до объема 100 мл.

Замена в составе ранозаживляющего средства раствора каротина микробиологического в масле на кристаллический каротин и природный жир (преимущественно подсолнечное или соевое, или оливковое рафинированное дезодорированное масло или рыбий жир) позволяет значительно снизить количество примесей, перекисное и кислотное число масляно-витаминного средства, повысить биологическую ценность за счет непредельных жирных кислот оливкового или соевого масла или витаминов группы D рыбьего жира. Исследованиями доказано, что изменение состава препарата положительно сказалось на его стабильности при хранении (см. пример), что позволило увеличить срок годности на 0,5 года.

Таким образом, предложенный масляно-поливитаминный препарат на основе химически однородных компонентов содержит меньшее количество примесей, имеет стандартный постоянный состав и сохраняет свои свойства в течение 2,5 лет.

Пример
В колбу загружают 2 литра рафинированного дезодорированного подсолнечного масла, нагревают до температуры 60-90^oC и при перемешивании вносят 4 грамма кристаллического бета-каротина с массовой долей основного вещества 96%. Растворение проводят в течение 30 минут. Раствор фильтруют, охлаждают (Раствор A).

2 грамма 2-метил-1,4-нафтохинона растворяют в 100 г раствора А при перемешивании и нагревании до 45 -50^oC. Раствор фильтруют, охлаждают (раствор Б).

2 грамма бутилокситолуола растворяют при нагревании в 100 г раствора А (раствор С).

К 2000 г раствора A добавляют расчетные количества растворов Б и С, 55% раствора ретинола пальмитата в масле и 0,2 г альфа -токоферола-ацетата. Смесь перемешивают, фильтруют и фасуют во флаконы из темного стекла, герметично укупоривают и стерилизуют в автоклаве при 100-105^oC в течение 30 минут.

Одновременно готовят известное ранозаживляющее средство по методике [5], в соответствии с которой в колбу, содержащую раствор 3,8 г викасола в 10 мл воды добавляют раствор 15 г кальцинированной соды в 50 мл горячей воды. После окончания реакции выделения 2-метил-1,4-хинона проводят его экстракцию из реакционной массы 10-12 мл хлористого метилена. Образовавшуюся двухфазную систему трижды промывают водой до отсутствия щелочной реакции. Фазу метиленхлорида отделяют и передают в установку для отгонки метиленхлорида. Перед отгонкой в куб загружают 30 мл раствора каротина микробиологического в масле. Процесс начинают при температуре 28^oC и продолжают под вакуумом, повышая температуру до 70-80^oC, до отсутствия следов метиленхлорида по Бейльштейну.

В колбу загружают расчетные количества раствора микробиологического каротина в масле, витаминов A, E, раствора бутилокситолуола, 2-метил-1,4-нафтохинона (менадиона). Перемешивают в течение 30 минут, фильтруют и фасуют во флаконы из оранжевого стекла по 100 мл.

Стабильность качественных и количественных характеристик препаратов изучают при термостатировании 20^oC. Представленные в таблице 2 данные свидетельствуют о меньшей скорости инактивации витаминов, повышении перекисного числа, изменении геометрических характеристик спектра каротина.

Литература
1. Conn PF; Schalch W; Truscott TG. The singlet oxygen and carotenoid interaction. J-Photochem-Photobiol-B; 1991 Oct; 11(1); PP 41-7.

2. Conn PF; Lambert C; Land EJ; Schalch W; Truscott TG. Carotene-oxygen radical interactions [published erratum appears in Free Radic Res Commun 1993;18(4):253]: Free-Radic-Res-Commun. 1992; 16(6): 401-8.

3. Ковальская Т.И., Мансурова Л.А. Влияние состава мазей на ранозаживляющее действие микробиологического бета-каротина // Материалы 5 Всероссийского съезда фармацевтов. -Ярославль, 1987. с. 160-102.

4. Машковский М.Д. Лекарственные средства. -12 изд.-М.: Медицина.-1993. -Т 2.-С. 53-54.

5. Патент РФ 1628281 Ранозаживляющее средство. 30.03.89, опубл.28.02.94 Бюлл. N 4. Кричковская Л.В., Зябченкова А.К., Черненькая Л.А., Северцев В.А. (Прототип).

6. Феофилова Е.П. Пигменты микроорганизмов.- М.:Наука.,1974.-217 C.

7. Bu Lock J.D. Comparative and functional aspects of isoprene parthway in fungs. Pure and appl. chem.-1973.-V. 34, 3. -p. 435-470.

8.USP XXII, p. l56.

9. Авторское свидетельство СССР N 398123, кл. C 12 D 5/00. Способ получения каротина.

Изобретение относится к области медицины, а именно к фармакологии, и касается масляного поливитаминного препарата. Изобретение заключается в том, что предложенный препарат содержит витамин Е, витамин А, витамин К, каротин и жир, в котором в качестве витамина А используют раствор ретинола ацетата или пальмитата в масле, в качестве витамина Е - альфа-токоферола ацетат или альфа-токоферол, в качестве витамина K - 2-метил-1,4-нафтохинон, в качестве каротина - раствор каротина кристаллического 96% в очищенном природном масле. Изобретение обеспечивает стабильность препарата и, как следствие, исключение побочного действия и расширение области применения. 1 с. и 2 з.п.ф-лы, 2 табл., 4 ил.

1. Масляный поливитаминный препарат, включающий каротин, витамин Е, витамин А, витамин К, антиокислитель и жир, причем в качестве витамина А содержит раствор ретинола ацетата или пальмитата в масле, витамина Е - альфа-токоферола ацетат или альфа-токоферол, витамина К - 2-метил-1,4-нафтохинон, отличающийся тем, что в качестве каротина содержит кристаллический бета-каротин и в качестве жира - очищенный от примесей природный жир, а компоненты взяты в следующих количествах:
Раствор ретинола ацетата или ретинола пальмитата - от 254000 до 311000 ME
Альфа-токоферола ацетат или альфа-токоферол - от 0,16 до 0,20 г
2-Метил-1,4-нафтохинона - от 0,04 до 0,06 г
Антиокислитель - Не более 0,02 г
Кристаллический бета-каротин - Не менее 0,18 г
Очищенный от примесей природный жир, до объема - 100 мл
2. Масляный поливитаминный препарат по п.1, отличающийся тем, что он содержит кристаллический бета-каротин с массовой долей основного вещества более 96% бета-каротина. 3. Масляный поливитаминный препарат по п.1, отличающийся тем, что в качестве источника очищенного от примесей природного жира он содержит или подсолнечное, или соевое, или оливковое рафинированное дезодорированное масло или рыбий жир.