СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ РИСКА РАЗВИТИЯ ВРОЖДЕННЫХ КАТАРАКТ Российский патент 2000 года по МПК G01N33/50 G01N33/569 

Изобретение относится к медицине, в частности к офтальмологии, и предназначено для прогнозирования риска развития врожденной катаракты у детей.

Врожденные катаракты до настоящего времени занимают значительное место в структуре слепоты и слабовидения и являются одной из основных причин инвалидности по зрению с детства. Высокая частота врожденной патологии хрусталика определяется недостаточной изученностью причинных факторов ее развития. Так, несмотря на длительные исследования этого вопроса, этиологию врожденных катаракт удается установить не более, чем в половине случаев, преимущественно при наследственных формах катаракт и врожденных помутнениях хрусталика, вызванных вирусами краснухи, гриппа и герпеса. Этот факт определяет большие трудности в профилактике и лечении врожденных катаракт у детей.

До настоящего времени при установлении этиологии врожденной катаракты использовались в основном анамнестические данные о заболеваниях, перенесенных матерью во время беременности, и результаты серологического обследования ребенка на краснуху, герпес, грипп, цитомегаловирус, токсоплазмоз, направленного на лечение по проводу катаракты (Круглова Т.Б. "Роль клинических, иммунологических и вирусологических факторов в течение послеоперационного периода у детей с врожденными катарактами", канд. дисс. мед. наук, Москва, 1978, 25 стр.). Прогнозирование риска рождения ребенка с врожденной катарактой еще в период беременности проводилось практически только при краснухе или подозрении на нее. Прогностические критерии для выявления такого риска при других инфекциях отсутствуют.

В связи с этим, актуальным является дальнейшее изучение факторов, способных вызывать внутриутробное поражение хрусталика с развитием в дальнейшем врожденной катаракты у ребенка.

Предлагаемый способ базируется на данных о способности вируса гепатита B проникать через плацентарный барьер и оказывать тератонгенное действие на различные органы и ткани (Тер-Григорова Е.Н., Тер-Григоров В.С. "Врожденный вирусный гепатит", Москва, 1967, 56 стр.) и на возможности обнаружения маркеров вируса гепатита в структурах глаза, в частности - в жидких средах глаза и донорских роговицах, полученных от лиц, перенесших острый гепатит или от хронических вирусоносителей (Кушнир В.Н. "Клинико-иммунологические и биохимические изменения органа зрения при хроническом активном гепатите и циррозе печени", канд. дисс. мед. наук, Москва, 1993, 24 стр.).

Актуальность проблемы определяется широкой распространенностью гепатита B во всем мире.

Обоснованием для предлагаемого нами способа явились результатом обследования детей с врожденными катарактами и их матерей. Под нашим наблюдением находилось две группы - 20 детей из России, 21 ребенок из республики Молдова - эпидемиологически неблагоприятного по гепатиту региона. Возраст детей - от 5 месяцев до 4 лет, большинство (28 из 41 ребенка) - были младше 1 года. Все дети обследованы в условиях стационара, куда поступили для хирургического лечения врожденных катаракт. Обследованы также 37 матерей оперированных детей. Все женщины были моложе 30 лет, без признаков патологии хрусталика на момент обследования и без указаний на заболевания глаз в анамнезе.

У всех детей и матерей исследовали сыворотку крови на HBs-Ag. При подозрении на этиологическую роль вируса гепатита B проводили комплексное серологическое исследование. Маркеры гепатита B (HBs-Ag; HBe-Ag; anti-HBs; anti-HBe; total anti-HBc; anti-HBc IgM) у детей и их матерей определяли в сыворотке крови. В качестве контроля использовали среднестатистические региональные показатели инфицированности, которые составили на 1994 - 1998 гг. около 11% по Молдове и около 4% по России (Подымова С.Д. "Болезни печени", М., Медицина, 1998; Соринсон С.Н. "Вирусные гепатиты", С.Петербург, 1997, 31 стр. ). Кроме того, у детей исследовали хрусталиковые массы и влагу передней камеры глаза, полученные во время операции экстракции катаракты.

Как известно, серологическая характеристика рассматриваемой инфекции довольно сложна, она учитывает несколько вариантов обнаружения антигенных компонентов вируса и антител к ним. Интерпретация полученных результатов на основе общепринятой современной классификации позволили заключить, что из 14 детей, прошедших комплексное обследование, 11 человек (78,5% из группы) перенесли вирусный гепатит B, по-видимому, во внутриутробном периоде, когда формирующиеся структуры глаза, в том числе хрусталик, особенно восприимчивы к тератогенному действию (total anti-HBc; anti-HBe; anti-HBs; anti-HBcIgM - в единичных случаях). У 28% детей были выявлены потенциальная контагиозность и продолжающаяся репликация вируса (HBs-Ah, anti-HBe; total anti-HBc; anti-HBcIgM).

Косвенным подтверждением внутриутробного заражения детей явились и результаты исследования их матерей: у всех 14 женщин в крови были обнаружены маркеры гепатита B, характеризующие хроническое вирусоносительство (total anti-HBc; HBs-Ag; 9 человек, 64,3%) или потенциальную контагиозность (anti-HBc IgM; total anti-HBc, anti-HBe; 5 человек, 35,7%).

Полученные результаты свидетельствуют об этиологической роли вируса гепатита B в развитии врожденных катаракт.

Так, например, у ребенка А., муж., 5 месяцев, поступившего в отделение для хирургического вмешательства по поводу врожденной катаракты обоих глаз, при исследовании сыворотки крови, влаги передней камеры и хрусталиковых масс, взятых во время операции, был обнаружен HBs-Ag во всех пробах.

У матери ребенка в сыворотке крови также был обнаружен HBs-Ag и total anti-HBc, свидетельствующие о том, что женщина является хроническим вирусоносителем гепатита B.

Результаты, полученные при обследовании матери и ребенка, позволили установить роль вируса гепатита во внутриутробном поражении хрусталика с последующим развитием врожденной катаракты.

Техническим результатом предлагаемого способа является максимальное прогнозирование риска развития врожденных катаракт с последующим выбором тактики ведения будущего новорожденного. Технический результат достигается путем исследования крови беременных женщин на вирусоносительство и заболеваемость гепатитом B.

Способ осуществляют следующим образом. В сыворотке крови беременной женщины исследуют маркеры, характеризующие стадию активного гепатита или хронического вирусоносительства (HBs-Ag и HBc-Ag). Исследования проводят с помощью иммуноферментного анализа с использованием коммерческих диагностических тест-систем (фирма Abbott, США и др.). Исследуемые сыворотки вносят в 96-ти луночные планшеты. Одновременно вносят два контроля: положительный и отрицательный. После контакта (длительность контакта определяется фирмой изготовителя) планшеты отмывают от непрореагировавших компонентов реакции. Затем в лунки вносят конъюгат антивидовых антител с пероксидазой хрена, а затем - субстрат, который в присутствии пероксидазы меняет окраску. Учет реакции проводят на спектрофотометре.

При обнаружении какого-либо из маркеров прогнозируют риск врожденной катаракты у ребенка.

Пример 1. Ребенок К., муж., 3 месяца. Диагноз - врожденная катаракта обоих глаз. Поступил для операции экстракции врожденной катаракты.

Мать ребенка за 2 месяца до беременности переболела острым гепатитом. Во время беременности было проведено исследование сыворотки крови на маркеры гепатита. Выявлены HBs-Ag, HBe-Ag и total anti-HBc, т.е. маркеры, указывающие на наличие у женщин хронического активного гепатита (ХАГ). В связи с этим женщина была предупреждена о риске рождения ребенка с врожденной патологией хрусталика.

При операции экстракции врожденной катаракты у ребенка были взяты на исследование сыворотка крови и внутриглазные материалы (влага передней камеры и хрусталиковые массы). При иммунологическом исследовании материала в хрусталиковых массах и в сыворотке крови ребенка был обнаружен HBs-Ag.

Полученными данными подтвержден прогноз рождения ребенка с врожденной катарактой от женщины с хроническим активным гепатитом B .

Таким образом, предложенный способ позволяет прогнозировать риск врожденной катаракты путем исследования сыворотки крови беременных женщин на маркеры гепатита B (HBs-Ag и/или HBe-Ag) с последующим целенаправленным, тщательным наблюдением за ребенком с момента рождения для раннего выявления врожденной патологии хрусталика и выбора своевременной адекватной лечебной тактики.

Способ может быть использован в медицине, а именно в офтальмологии. В сыворотке крови беременной женщины исследуют маркеры, характеризующие стадию активного гепатита или хронического вирусоносительства (HBs - Ag и HBe - Ag). При обнаружении какого-либо из этих маркеров прогнозируют риск развития врожденной катаракты у ребенка. Способ более точен, позволяет выявить врожденную патологию хрусталика и выбрать своевременную адекватную тактику лечения.

Способ прогнозирования риска развития врожденных катаракт, включающий серологическое исследование крови беременной женщины, отличающийся тем, что исследуют кровь на маркеры гепатита B HBs - Ag и HBe - Ag и при обнаружении какого-либо из этих маркеров прогнозируют риск развития врожденной катаракты у ребенка.