СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СУЛЬФАТИРОВАННЫХ ГЛИКОЗАМИНОГЛИКАНОВ Российский патент 2001 года по МПК A61K35/32 

Описание патента на изобретение RU2162331C1

Изобретение относится к медицине, а более конкретно к медицинской промышленности, и может быть использовано для получения сульфатированных гликозаминогликанов из костной ткани, применяемых в качестве лекарственных средств.

Ближайшим аналогом получения сульфатированных гликозаминогликанов является способ получения сульфатированных гликозаминогликанов из роговиц сельскохозяйственных животных путем гидролиза раствором фермента - папаина с последующим кипячением, добавлением трихлоруксусной кислоты, цетрифугированием и диализом (RU патент N 2056851).

Однако при обработке роговицы ферментом часть гликозаминогликанов остается в неразрушенной ткани, что приводит к снижению выхода целевого продукта, с помощью данного способа могут быть получены только растворенные сульфатированные гликозаминогкликаны.

Задачей изобретения является разработка универсального способа получения сульфатированных гликозаминогликанов из костной ткани.

Техническим результатом изобретения является получение целевого продукта нативных сульфатированных гликозаминогликанов в виде сухого лиофильного порошка.

Технический результат достигается тем, что, согласно изобретению, в способе получения сульфатированных гликозаминогликанов, включающем гидролиз биологической ткани, добавление трихлоруксусной кислоты до 5% концентрации, центрифугирование и диализ, в качестве биологической ткани используют кость сельскохозяйственных животных или человека в виде костной крошки размером от 700 до 2000 мкм, гидролиз костной крошки проводят в течение 24-48 часов в 0,4 H растворе гидроксида натрия, нейтрализуют до pH 6,8-7,8, удаляют надосадок центрифугированием при 3000-5000 об/мин в течение 20-40 минут, добавляют в надосадок этанол в соотношении 1: 2 (этанол), а после добавления трихлоруксусной кислоты диализуют последовательно против насыщенного хлорида натрия и воды, затем осаждают сульфатированные гликозаминогликаны этанолом в присутствии 1% ацетата натрия, сушат под вакуумом и лиофилизируют.

Согласно изобретению, костную ткань измельчают до крошки размером 700-2000 мкм, так как ее размер менее 700 мкм приводит к затруднению выделения сульфатированных гликозаминогликанов, а при ее размере более 2000 мкм - время их выхода увеличивается. Гидролиз костной крошки проводят в течение 24-48 часов в 0,4 H раствора гидроксида натрия, что позволяет провести полный гидролиз свободных белков кости.

Удаляют надосадок центрифугированием. При центрифугировании менее 3000 об/мин осаждается менее 50% гидролизата, а при более 5000 об/мин часть основного продукта уходит в осадок.

Затем добавляют в надосадок этанол в соотношении 1:2 (этанол), установленном экспериментально. Далее добавляют трихлоруксусную кислоту до 5% концентрации.

Затем проводят последовательный диализ против насыщенного хлорида натрия и воды, что позволяет удалить из раствора остатки белков, аминокислот и других примесей. Осаждение сульфатированных гликозаминогликанов в присутствии 1% ацетата натрия позволяет получить кислую, кисло-солевую или основную солевую форму конечного продукта.

После осаждения гликозаминогликаны сушат под вакуумом и лиофилизируют.

Пример конкретного выполнения способа получения сульфатированных гликозаминогликанов.

1 кг костной крошки размером 2000 мкм гидролизуют в течение 24-48 часов в 0,4 H растворе гидроксида натрия, нейтрализуют до pH 6,8-7,8, удаляют надосадок центрифугированием 4000 об/мин в течение 30 минут, добавляют в надосадок этанол в соотношении 1:2 (этанол), добавляют трихлоруксусную кислоту до 5% концентрации, диализуют последовательно против насыщенного хлорида натрия и воды, затем осаждают сульфатированные гликозаминогликаны этанолом в присутствии 1% ацетата натрия, сушат под вакуумом и лиофилизируют.

Изобретение может быть использовано для получения сульфатированных гликозаминогликанов из костной ткани в виде сухого лиофильного порошка, применяемых в качестве лекарственных средств.

Похожие патенты RU2162331C1

название год авторы номер документа
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ КОЛЛАГЕНА ИЗ КОСТНОЙ ТКАНИ 2000
  • Панасюк А.Ф.
  • Иванов С.Ю.
  • Ларионов Е.В.
  • Левин В.О.
  • Саващук Д.А.
RU2161976C1
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СУЛЬФАТИРОВАННЫХ ГЛИКОЗАМИНОГЛИКАНОВ ИЗ БИОЛОГИЧЕСКИХ ТКАНЕЙ 2005
  • Саващук Дмитрий Алексеевич
  • Панасюк Андрей Федорович
RU2304441C1
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ГЛИКОЗАМИНОГЛИКАНОВ 1998
  • Ларионов Е.В.
  • Новиков С.В.
  • Трегубов А.А.
  • Саващук Д.А.
RU2129871C1
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СОЛЕЙ ГЛИКОЗАМИНОГЛИКАНОВ 1999
  • Ларионов Е.В.
  • Кузьмина С.А.
  • Баньковская Е.О.
  • Иванов С.Ю.
RU2139715C1
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ БИОСОВМЕСТИМОГО МАТЕРИАЛА ДЛЯ СТОМАТОЛОГИИ 1999
  • Панасюк А.Ф.
  • Ларионов Е.В.
  • Шехтман М.А.
  • Якобашвили Р.Д.
  • Саващук Д.А.
RU2155025C1
СПОСОБ ВЫДЕЛЕНИЯ СУЛЬФАТИРОВАННЫХ ГЛИКОЗАМИНОГЛИКАНОВ ИЗ БИОЛОГИЧЕСКИХ ТКАНЕЙ 2004
  • Панасюк Андрей Федорович
  • Ларионов Евгений Викторович
RU2273486C1
БИОСОВМЕСТИМЫЙ МАТЕРИАЛ ДЛЯ СТОМАТОЛОГИИ 1999
  • Иванов С.Ю.
  • Панасюк А.Ф.
  • Ларионов Е.В.
  • Саващук Д.А.
  • Панин А.М.
  • Журули Г.Н.
RU2155024C1
СПОСОБ ВЫДЕЛЕНИЯ СУЛЬФАТИРОВАННЫХ ГЛИКОЗАМИНОГЛИКАНОВ ИЗ РОГОВИЦЫ 1992
  • Багров Сергей Николаевич
  • Ларионов Евгений Викторович
  • Панасюк Андрей Федорович
RU2056851C1
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ БИОМАТЕРИАЛОВ ИЗ КОСТНОЙ ТКАНИ И ПОЛУЧЕННЫЙ ЭТИМ СПОСОБОМ МАТЕРИАЛ ДЛЯ ОСТЕОПЛАСТИКИ И ТКАНЕВОЙ ИНЖЕНЕРИИ 2005
  • Панасюк Андрей Федорович
RU2342162C1
РАСТВОР ДЛЯ СТИМУЛЯЦИИ РЕПАРАЦИИ КОЖИ "КОЛЛАГЕЛЬ" 1994
  • Багров Сергей Николаевич
  • Ларионов Евгений Викторович
  • Маклакова Ирина Александровна
  • Панасюк Андрей Федорович
RU2092156C1

Реферат патента 2001 года СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СУЛЬФАТИРОВАННЫХ ГЛИКОЗАМИНОГЛИКАНОВ

Изобретение относится к медицинской промышленности и может быть использовано для получения сульфатированных гликозаминогликанов из костной ткани. Сущность изобретения: костную крошку размером 700-2000 мкм гидролизуют в течение 24-48 ч в 0,4 Н растворе гидроксида натрия, нейтрализуют до рН 6,8-7,8, удаляют надосадок центрифугированием при 3000-5000 об/мин в течение 20-40 мин, добавляют в надосадок этанол в соотношении 1:2, добавляют трихлоруксусную кислоту до 5% концентрации, диализуют последовательно против насыщенного хлорида натрия и воды, осаждают сульфатированные гликозаминогликаны этанолом в присутствии 1% ацетата натрия, сушат под вакуумом и лиофилизируют. Технический результат: увеличение выхода целевого продукта и получение сульфатированных гликозаминогликанов в виде сухого лиофильного порошка.

Формула изобретения RU 2 162 331 C1

Способ получения сульфатированных гликозаминогликанов, включающий гидролиз биологической ткани, добавление трихлоруксусной кислоты до 5% концентрации, центрифугирование и диализ, отличающийся тем, что в качестве биологической ткани используют кость сельскохозяйственных животных или человека в виде костной крошки размером от 700 до 2000 мкм, гидролиз костной крошки проводят в течение 24 - 48 ч в 0,4 Н растворе гидроксида натрия, нейтрализуют до pH 6,8 - 7,8, удаляют насадок центрифугированием при 3000 - 5000 об/мин в течение 20 - 40 мин, добавляют в насадок этанол в соотношении 1:2, а после добавления трихлоруксусной кислоты до 5% концентрации диализуют последовательно против насыщенного хлорида натрия и воды, затем осаждают сульфатированные гликозаминогликаны этанолом в присутствии 1% ацетата натрия, сушат под вакуумом и лиофилизируют.

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 2001 года RU2162331C1

СПОСОБ ВЫДЕЛЕНИЯ СУЛЬФАТИРОВАННЫХ ГЛИКОЗАМИНОГЛИКАНОВ ИЗ РОГОВИЦЫ 1992
  • Багров Сергей Николаевич
  • Ларионов Евгений Викторович
  • Панасюк Андрей Федорович
RU2056851C1
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СОЛЕЙ ГЛИКОЗАМИНОГЛИКАНОВ 1999
  • Ларионов Е.В.
  • Кузьмина С.А.
  • Баньковская Е.О.
  • Иванов С.Ю.
RU2139715C1
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ГЛИКОЗАМИНОГЛИКАНОВ 1998
  • Ларионов Е.В.
  • Новиков С.В.
  • Трегубов А.А.
  • Саващук Д.А.
RU2129871C1
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СУЛЬФАТИРОВАННЫХ ГЛИКОЗАМИНОГЛИКАНОВ 1996
  • Федоров С.Н.
  • Багров С.Н.
  • Ларионов Е.В.
RU2118524C1
СПОСОБ ВЫДЕЛЕНИЯ ГЛИКОЗАМИНОГЛИКАНОВ ИЗ ФИБРОЗНОГО ХРЯЩА 1994
  • Карякина Е.В.
RU2089201C1
US 3936351 А, 03.02.1976.

RU 2 162 331 C1

Авторы

Панасюк А.Ф.

Иванов С.Ю.

Ларионов Е.В.

Левин В.О.

Саващук Д.А.

Даты

2001-01-27Публикация

2000-04-21Подача