СРЕДСТВО ДЛЯ ЭФФЕКТИВНОГО ИММУННОГО ОТВЕТА У КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА НА ЭРИТРОЦИТАРНЫЕ АНТИГЕНЫ Российский патент 2001 года по МПК A61K35/32 A61K35/32 A61K31/07 A61K31/355 A61K31/59 A61K33/06 

Изобретение относится к иммуногенетическим методам в животноводстве, в частности к средствам, повышающим иммунный ответ у крупного рогатого скота.

Известны средства для использования с этой целью различных иммуномодуляторов (культур дрожжевых грибков, адьюванта Фрейнда, стабилизированной лимфы и т.д.). Однако такие средства не гарантируют эффективного иммунного ответа, отмечается проявление побочных эффектов (отечность в месте инъекции, болезненность).

Наиболее близким аналогом по составу и физиологическому действию является средство, включающее эмульгатор (на основе органического сополимера) и масляную основу (см. патент Российской Федерации N 2108111, кл. A 61 K 39/39, 1998), которое принято нами за прототип.

Однако известное средство разработано для медицинских целей, включает сложные и малодоступные компоненты и совершенно нет сведений о его воздействии на иммунный ответ, например, при выработке антител на некоторые генетические маркеры крупного рогатого скота и других сельскохозяйственных животных.

Целью изобретения является получение средства, повышающего выработку антител, уменьшающего проявление побочных эффектов при обработке препаратом, снижение затрат средств и времени на обработку животных при получении сывороток для иммуногенетического тестирования крупного рогатого скота.

Поставленная цель достигается тем, что для получения эффективного иммунного ответа при проведении иммунизации реципиентов донорского стада крупного рогатого скота эритроцитарными антигенами (цельной кровью доноров) предлагается использовать иммуномодулирующее средство, в состав которого входят:
100 мл антимикробного стимулятора Дорогова фракция-2 (АСД ф-2), представляющего собой продукт сухой перегонки мясокостной муки, содержащего низкомолекулярные органические соединения (низшие карбоновые кислоты, их амиды и аммонийные соли, холиновые эфиры карбоновых кислот, холин, первичные и вторичные амины, сульфгидрильные группы), а также неорганические азотистые соединения (соли аммония углекислого, уксуснокислого и др.) и воды до 75%, противовоспалительные средства - глюконат кальция и глицерофосфат кальция при соотношении, мас.%: глюконат кальция 0,020-0,050, глицерофосфат кальция 0,050-0,100, в масляный раствор витаминов A, D, E, F, (тетравит), с активностью A - 50000 МЕ/мл, D - 25000 МЕ/мл, и содержанием витаминов E - 20 мг/мл, F - 5 мг/мл.

Для проведения иммунизации готовят средство путем смешивания при комнатной температуре 5 мл 10% раствора глюконата кальция и 0,5 г порошка глицерофосфата кальция с 100 мл антимикробного стимулятора Дорогова фракция-2 и добавляют вышеуказанный тетравит (масляный раствор витаминов A, D, E, F) до 1000 мл.

Полученное средство вводят однократно в дозе 0,025 мл на 1 кг живой массы внутримышечно перед проведением иммунизации реципиентов цельной кровью доноров.

Биологическая активность предлагаемого средства была испытана на 80 бычках ярославской породы 8-9 месячного возраста, живой массой 230-240 кг. Из животных сформировали 4 группы по 20 бычков в каждой. Животным первой группы вводили предлагаемое средство в дозе 0,025 мл на 1 кг живой массы внутримышечно. Второй группе бычков инъецировали по 15 мл левомизола каждому животному аналогичным образом. Третьей группе вводили адьвант Фрейнда в дозе 20 мл на одно животное. Все группы животных иммунизировали внутримышечно цельной кровью доноров в дозе 20 мл каждому животному.

Контролем служили реципиенты, иммунизацию которых проводили только цельной кровью внутримышечно в дозе 20 мл.на одно животное.

Результаты экспериментов показали, что под влиянием предлагаемого вещества число реактивных животных было выше (70%), чем в группах, где применялись адьвант Фрейнда (60%), левомизол (60%) и цельная кровь (40%).

Титр образовавшихся антител, в зависимости от примененного иммуномодулятора, имел значительные различия. Большинство животных с титром антител 1: 32 и выше, отмечалось (60%) в группе с использованием предлагаемого средства. В этой группе не наблюдалось проявления побочных эффектов типа отечности, болезненности в месте инъекции стимулятора.

В группе животных с использованием адьюванта Фрейнда процент реактивных животных с титром 1:32 и выше составил 50%, в группе с использованием левомизола - 40%, в группе с цельной кровью - 30%.

Применение предлагаемого средства повышает количество животных, вырабатывающих антитела с более высоким титром, что позволяет увеличить на 20-30% производство EA-типирующих сывороток, не повышая затрат при их производстве. Негативных признаков средства на выработку антител не обнаружено. Модулирующий эффект при проведении иммунизации животных объясняется возможным нейротропным холино-миметическим действием на центральную и вегетативную нервную системы, а также повышением активности тканевых ферментов, принимающих участие в активном транспорте ионов и питательных веществ через клеточные мембраны. Срок хранения и использования предлагаемого средства не более 6 месяцев с даты изготовления.

Изобретение относится к области животноводства. Средство включает эмульгатор и масляную основу. В качестве эмульгатора средство содержит антимикробный стимулятор Дорогова фракция - 2, а в качестве масляной основы - масляный раствор жирорастворимых витаминов A, D, Е, F. Средство дополнительно содержит глюконат кальция и глицерофосфат кальция при следующем соотношении исходных компонентов, мас.%: глицерофосфат кальция 0,050 - 0,100, глюконат кальция 0,020 - 0,050, АСД фракция-2 100 мл, масляный раствор жирорастворимых витаминов до 1000 мл, с активностью А 50000 МЕ/мл, с активностью D 25000 МЕ/мл, содержанием Е 20 мг/мл, содержанием F 5 мг/мл. Средство позволяет увеличить на 20 - 30 % производство EA-типирующих сывороток, не дает при применении побочных эффектов, 1 з.п. ф-лы.

1. Средство для эффективного иммунного ответа у крупного рогатого скота на эритроцитарные антигены, включающее эмульгатор и масляную основу, отличающееся тем, что в качестве эмульгатор содержит антимикробный стимулятор Дорогова фракция 2, масляной основы - комплекс жирорастворимых витаминов А, D, E, F и дополнительно включает соли глюконата и глицерофосфата кальция, при этом указанные компоненты содержатся в следующих, мас.%:
Глицерофосфат кальция - 0,050 - 0,100
Глюконат кальция - 0,020 - 0,050
АСД фракция 2 - 100 мл
Масляный раствор жирорастворимых витаминов - До 1000 мл
2. Средство по п.1, отличающееся тем, что масляный раствор жирорастворимых витаминов включает витамины:
с активностью
А - 50000 МЕ,
D - 25000 МЕ
и содержанием
Е - 20 мг
F - 5 мг
в 1 мл.