СОСТАВ ДЛЯ ТЕРАПИИ И ПРОФИЛАКТИКИ ИНФЕКЦИОННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ ЖИВОТНЫХ Российский патент 2008 года по МПК A61K31/194 A61K35/12 A61K31/245 A61P37/04 

Изобретение относится к ветеринарии, а именно к препаратам для лечения и профилактики инфекционных заболеваний у животных.

Для терапии и профилактики инфекционных заболеваний у животных предложены и широко используются антибиотики, сульфаниламиды, нитрофураны и другие химиотерапевтические препараты (Мозгов И.Е. Фармакология. М.: Колос, 1979. С.333-372).

Недостатком применения вышеуказанных препаратов является то, что к большинству из них быстро вырабатывается резистентность бактерий. Данная особенность бактерий диктует необходимость изыскания препаратов, обладающих иным механизмом действия на микробную клетку, чем вышеуказанные средства.

Наиболее близким по технической сущности, выбранным в качестве прототипа, является антисептик - стимулятор Дорогова (АСД) второй фракции (Сусский Е.В. с соавт. Модификация препарата АСД. Мат. научно-практической конференции, посвященной 80-летию ФГУП «Щелковский биокомбинат». Ветеринарная биотехнология: настоящее и будущее. Щелково. - 2004. С.113-116). Данный препарат обладает мощным антибактериальным, иммуностимулирующим и противоопухолевым действием. Низкомолекулярные компоненты данной фракции по своей структуре родственны продуктам клеточного обмена и не воспринимаются организмом как чужеродные, что исключает появление побочных реакций повышенной чувствительности. Однако недостатком АСД-2-й фракции и его модификации АСД-плюс является крайне высокая щелочная реакция, что делает невозможным применение препарата для инъекций. Препарат рекомендуется применять наружно или через рот. При этом препарат обязательно должен быть разведен водой (Ветеринарное законодательство СССР.- т. №2. Наставление по применению АСД второй фракции в ветеринарной практике от 16 июля 1958 г. С.87-89).

Пероральное введение препарата менее эффективно, точная дозировка при этом не выдерживается, и при лечении животных инъекционная форма введения препарата более удобна.

Для устранения вышеуказанных недостатков и усиления терапевтического действия предлагается состав, пригодный для инъекций.

Новым является то, что состав получают путем полной нейтрализации повышенной щелочной реакции АСД-2-й фракции раствором янтарной кислоты и раствором аскорбиновой кислоты. Сама по себе янтарная кислота (ЯК) является мощным стимулятором обмена веществ живой клетки. Объектом действия ЯК являются клетки и ткани, находящиеся в состоянии возбуждения или патологически измененные. Стимулирующее действие ЯК особо выражено при ослаблении организма и его заболевании. Кроме того, ЯК позволяет усилить эффективность применения других лекарственных средств.

В основе фармакологической активности аскорбиновой кислоты (витамин С) лежит ее способность к окислительно-восстановительным реакциям в живом организме. Под влиянием аскорбиновой кислоты существенно повышается активность ретикулоэндотелиальной системы; фагоцитарная активность ее возрастает в несколько раз. Она ускоряет образование антител при вакцинациях и инфекционных заболеваниях. При недостатке аскорбиновой кислоты в организме значительно тяжелее протекает инфекционный процесс.

Для снятия локального болевого синдрома воспалительного процесса в состав включен новокаин. Кроме того, известно, что составы на растворе новокаина оказывают более быстрое действие, чем на физиологическом растворе.

Для сохранения в тканях животного нормального осмотического напряжения в состав препарата включены соли: натрия хлорид и кальция хлорид (или кальция глюконат). Натрия хлорид (или кальция глюконат) и кальция хлорид относятся к микроэлементам, без которых невозможна жизнь растений и животных. Они предотвращают развитие воспалительных отеков и показаны при остром развитии сепсиса, интоксикациях, активизации биохимических процессов в клетках и тканях.

Разработанный состав мы решили назвать «Янтастим С».

Предлагаемый состав готовится следующим образом.

Пример 1. Для приготовления комплексного препарата использовали 940 мл дистиллированной воды, в которой последовательно растворили 10 г янтарной кислоты, 2 г - аскорбиновой кислоты, 7 г натрия хлорида, 2 г глюконата кальция, 5 г новокаина.

Для нейтрализации повышенной кислотности (рН 3,0) доведение ее до рН 6,2 потребовалось добавить 40 мл АСД-2-й фракции. Данная концентрация водородных ионов в продукте необходима в связи с тем, что аскорбиновая кислота сохраняется только в кислой среде.

Полученный готовый продукт имел слабо-зеленоватую окраску и был прозрачным.

Препарат расфасовали по флаконам емкостью 50 мл и провели стерилизацию автоклавированием в режиме 1,2 атм. в течение 20 минут. Стерилизация автоклавированием не изменила физических свойств препарата. Раствор был прозрачен и выпадения осадка не наблюдалось, рН была в пределах 6,3.

При контрольных высевах состава на мясопептонный агар (МПА) и мясопептонный бульон (МПБ) рост микрофлоры отсутствовал, что свидетельствовало о его стерильности.

Антимикробную активность состава определили методом серийных разведений на МПБ. В качестве тест-культур использовали S.aureus, Ps.aeruginosa, Str.Haemolitica, которые являются основными возбудителями гнойно-септических заболеваний. Суспензии суточных тест-культур в количестве 0,2 мл вносили в пробирки с МПБ и МПБ с составом, выдерживали в термостате в течение 48 часов. В ходе исследований установлено, что минимальная концентрация состава в МПБ, которая вызывала задержку роста микроорганизмов, варьировала в пределах 0,40-0,50 мл. Это свидетельствовало об определенном бактериостатическом действии состава по отношению к указанным возбудителям гнойно-септических заболеваний, причем их чувствительность была почти одинаковой.

При внутрибрюшинном введении состава в дозе 0,5 мл белым мышам массой 16-18 г состояния угнетения или их гибели в течение 10 дней не наблюдали, что свидетельствовало о его безвредности.

Следует отметить, что препарат АСД при растворении его дистиллированной водой до 4% концентрации имел очень высокую щелочную реакцию (рН>25), что исключило его возможность применения для инъекций.

Испытание протективных свойств заявляемого комплексного препарата провели в сравнении с антибиотиотиком гентамицином и препаратом без аскорбиновой кислоты на белых мышах при моделировании у них острого септического процесса культурой S.aureus в дозе 4LD50. Численность мышей в каждой группе составляло по 10 особей. Спустя два часа после внутрибрюшинного заражения каждой группы мышей были сделаны внутрибрюшинные инъекции препаратов в объеме 0,5 мл. Результаты опыта представлены в таблице 1.

Таблица 1. Сравнительная протективная эффективность составов при заражении мышей культурой S.aureus в дозе 4LD50

СоставГибель мышей в дни наблюдений (дни)Выживаемость, % 123-10 Заявляемый21-70Заявляемый без22-60аскорбиновой    кислоты    Гентамицин31-60

Пример 2. В стеклянной биобутыли, содержащей 4 л 800 мл дистиллированной воды, последовательно растворили 50 г янтарной кислоты, 10 г аскорбиновой кислоты, 35 г натрия хлорида, 10 г кальция хлорида, 25 г новокаина.

В указанную смесь добавили АСД второй фракции. После тщательного перемешивания измерили рН, доведя ее до 6,2 дробным добавлением АСД второй фракции (всего 150 мл). Полученный состав расфасовали по флаконам емкостью 100 мл и провели стерилизацию автоклавированием в режиме 1,2 атмосферы в течение 25 минут. Полученную серию состава, после проверки на стерильность и безвредность вышеуказанными методами, испытали в клинике лечения и профилактики острых токсикоинфекционных заболеваний животных.

Лечение послеродового мастита. Изучение лечебной эффективности состава проведено на 5 свиноматках с клинически выраженным течением острого инфекционного процесса в молочной железе.

В качестве контроля служили свиноматки с аналогичным симптомокомплексом. Для лечения последних применяли антибиотики: пенициллин и стрептомицин на 0,5% растворе новокаина. Указанные препараты в объеме 3 мл вводили на 5-7 см глубиной в середину каждой воспаленной доли молочной железы. Результаты наблюдения свидетельствовали о том, что после двух инъекций заявляемого состава произошло выраженное снижение воспалительного процесса. Вовлеченные в патологический процесс доли молочной железы стали безболезненными и мягкими. У этих свиноматок улучшилось клиническое состояние, снизилась до нормы температура тела и появился аппетит. После трех инъекций препарата произошло полное редуцирование воспалительного процесса. Напротив, у особей, которых лечили антибиотиками, воспалительный процесс стал затихать только после трех инъекций.

В дальнейшем у трех свиноматок наблюдалась индурация пораженных долей молочной железы, в связи с чем они более не использовались для воспроизводства.

Лечение послеродового эндометрита коров. Опыты проведены на коровах с признаками острого послеродового гнойно-катарального эндометрита. Одной группе коров (8 голов) ежедневно, с интервалом 12 часов внутриматочно водили заявляемый состав, а другой - (8 гол.) фуразолидоновые палочки. Состав вначале заболевания применяли в объеме 90-100 мл. Количество фуразолидоновых палочек составляло 7-10 штук на одно введение. По мере редуцирования воспалительного процесса объем вводимого препарата и количество фуразолидоновых палочек снижали.

В результате исследования установили, что у коров, которым применяли для лечения заявляемый состав, период выздоровления составил 6-8 дней, а при лечении фуразолидоновыми палочками 9-11 дней.

В следующей серии опытов было изучено влияние внутримышечных инъекций заявляемого состава на усиление терапевтического эффекта при лечении гнойного эндометрита с внутриматочным применением фуразолидоновых палочек.

Порядок применения фуразолидоновых палочек был аналогичен, что и в предыдущей серии опытов. При этом одной группе коров (опытная п=7) ежедневно внутримышечно в объеме 5,0 мл вводили заявляемый состав, а другой группе (п=7) в качестве плацебо делали инъекции 0,5% новокаина в объеме 5,0 мл. В 1-й и на 7 день лечения от животных исследовали кровь на содержание белка, глобулиновых фракций, резервной щелочности, кальция, фосфора. В результате исследований установлено весьма благоприятное воздействие заявляемого состава на обменные процессы. На 7 сутки практически у всех 7 подопытных коров первой группы произошла нормализация показателей содержания общего белка, глобулиновых фракций, кальция, фосфора, резервной щелочности. Напротив, у коров контрольной группы содержание белка, альфа-глобулинов было выше верхней границы физиологической нормы на 20-30%; ниже нижней границы было содержание кальция на 15-30%, фосфора на 5-10%, резервной щелочности на 40-50%. Гамма-глобулиновая фракция была на нижней границе физиологической нормы.

Продолжительность курса лечения в контрольной группе составила 9-11 дней, против 6-8 дней в опытной.

Следующая серия опытов была проведена на поросятах 30-35-дневного возраста в преддверии их отъема от матерей. Изучаемый тест - влияние состава на заболеваемость отечной болезнью (колибактериозом). Одной группе поросят (п=25) за 2 суток до отъема внутримышечно в объеме 2,0 мл ввели заявленный состав; другой (п=28) в качестве плацебо ввели 0,5% новокаина в объеме 2,0 мл. После отъема поросят от свиноматок в опытной группе случаев заболевания отечной болезнью зарегистрировано не было. В контрольной группе на 2 сутки от отечной болезни пало 3 поросенка, на 3 сутки пало еще 2 особи. Для профилактики заболевания 13 поросятам контрольной группы внутримышечно ввели заявляемый состав в объеме 3,0 мл, а другим 10 сделали инъекции антибиотика - гентамицина.

Последующие наблюдения показали, что у 2 из 13 поросят отечная болезнь проявилась в легком течении, остальные не заболели. Из 10 поросят, которым были сделаны инъекции гентамицина, заболело отечной болезнью 2 особи, из них у одной заболевание было со смертельным исходом.

Профилактическая эффективность заявляемого состава была изучена на телятах 3-4-месячного возраста в прогнозируемый период вспышки сальмонеллеза и пастереллеза при выводе животных из зимних помещений в летний лагерь.

Телятам 1-й группы (п=25) за 7 и2 суток до смены условий содержания внутримышечно двукратно в объеме 3+3 мл были сделаны инъекции заявляемого состава. Телят второй группы (п=18) и телят третьей группы (п=18) за 12 дней до вывода в лагерь привили соответственно вакциной против сальмонеллеза и пастереллеза. После вывода животных в летний лагерь случаев заболевания животных в первой группе не зарегистрировано (срок наблюдения 10 дней). Во второй и третьей группах телят спустя 2-3 дня после изменения условий их содержания значительно ухудшилось клиническое состояние. У 2-х животных из второй группы и у 3 из третьей возникли признаки респираторного заболевания. Применение антибиотиков для лечения больных не имело положительного значения. Все больные пали. Во избежание заболевания остальных телят им двукратно, с интервалом в 12 часов были сделаны внутримышечные инъекции заявленного состава в объеме 3,0 мл. Клиническое состояние животных значительно улучшилось уже после первой инъекции состава.

Дальнейших случаев респираторного заболевания телят в этих группах в течение 10 дней не зарегистрировано.

Заявляемый состав испытан с лечебной целью на щенках собак с симптомокомплексом токсического энтерита вирусной этиологии. Состав применяли внутримышечно в объеме 2,0 мл, двух- и трехкратно с интервалом 12 часов в комплексе с антибиотиками (п=17) и без них (п=12). Во всех случаях на вторые сутки отмечалось значительное улучшение клинического статуса и выраженное редуцирование диарейного синдрома. Следует отметить, что применение одних антибиотиков в клинике лечения токсического энтерита вирусной этиологии положительного результата не имеет.

Таким образом, заявляемый состав продемонстрировал хорошо выраженные протективные свойства и терапевтическую эффективность при моделировании острого септического процесса в условиях эксперимента, что подтвердилось в клинике лечения острых токсикоинфекционных заболеваний домашних и сельскохозяйственных животных, в профилактике вспышек заболеваний животных, обусловленных неблагоприятным воздействием факторов внешней среды.

Состав показал свою эффективность при лечении и профилактике инфекционных заболеваний не только микробной, но и вирусной этиологии. При этом наблюдается быстрое действие состава, что очень важно при лечении и профилактике инфекционных заболеваний сельскохозяйственных животных для прекращения и профилактики массовых заболеваний животных. Этому способствует и инъекционная форма введения в отличие от прототипа.

Изобретение относится к ветеринарии, а именно к препаратам для лечения и профилактики инфекционных заболеваний у животных. Состав для терапии и профилактики инфекционных заболеваний животных содержит антисептик стимулятор Дорогова второй фракции (АСД-Ф 2), янтарную кислоту, аскорбиновую кислоту, новокаин, натрия хлорид, кальция хлорид или кальция глюконат, дистиллированную воду, при определенном соотношении компонентов. Изобретение обеспечивает повышение терапевтической эффективности при лечении заболеваний сельскохозяйственных животных с симптомокомплексом острого течения инфекционного процесса. 1 табл..

Состав для терапии и профилактики инфекционных заболеваний животных, содержащий антисептик стимулятор Дорогова второй фракции (АСД-Ф2), отличающийся тем, что дополнительно содержит янтарную кислоту, аскорбиновую кислоту, новокаин, натрия хлорид, кальция хлорид или кальция глюконат, дистиллированную воду при следующем соотношении компонентов, мас.%:

АСД-Ф 24,0Янтарная кислота1,0Аскорбиновая кислота0,2Новокаин0,5Натрия хлорид0,7Кальция хлорид или кальция глюконат0,2Дистиллированная водаостальное