СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АКТИВНОСТИ ОСТЕОГЕНЕЗА Российский патент 2002 года по МПК A61B5/117 G01N1/28 

Изобретение относится к медицине, в частности к анатомии.

Известно, что исследование гистогенеза костной ткани - одна из серьезных проблем. Разнообразие физиологических функций, в которых участвует костная ткань, привлекает к ней внимание при анализе многих процессов, казалось бы не связанных с органами опоры и движения. Поиск способов, позволяющих ускорять и замедлять резорбцию и новообразование костной ткани, связан с решением таких медицинских задач, как выведение из кости включившихся вредных веществ, преодоление "барьера невесомости", нормализация поврежденной облучением кроветворной ткани.

Процессы резорбции и новообразования костной ткани длятся в течение всего периода роста человека. Эту способность к перестройке в зависимости от меняющихся условий функциональной нагрузки или под влиянием различных оперативных вмешательств кость сохраняет и во взрослом состоянии. Интенсивность роста и перестройки меняется на различных этапах онтогенеза, в различных костях скелета.

Выяснение факторов, влияющих на остеогенез, невозможно без определения активности костеообразования.

Существуют способы определения активности остеогенеза, которые позволяют сравнить процессы костеообразования в разные возрастные периоды путем определения объема кости, устойчивости к перелому, наличия или отсутствия очагов соединительной ткани, очагов оссификации и кальцинации, определяемых на гистопрепаратах.

Недостатками данных способов являются - субъективизм в оценке полученных данных, неправильный выбор критериев, при помощи которых исследователи пытаются охарактеризовать процесс остеогенеза. Такие критерии как объем кости, устойчивость к перелому скорее позволяют оценить скорость роста костей, их механические и прочностные качества, а не активность остеогенеза. Исследование же темпов пролиферативного роста ткани, регенерации связано с подсчетом клеток, их типов и патологических признаков.

Целью данного изобретения является определение активности остеогенеза в костях различных отделов скелета человека и животных на трупном материале в различные возрастные периоды.

Данная цель разрешается тем, что определение активности остеогенеза проводят следующим образом: от трупов людей различных периодов остеогенеза забирают фрагменты костей, фиксируют в растворе формалина, заливают в целлоидин, готовят гистологические срезы, окрашивают гематоксилин-эозином. Затем при помощи микроскопа и квадратной решетки с двойным периодом С и 5С определяют плотность костных клеток в одном квадратном миллиметре по формуле Р= 1,01•Х/4,41, где Р - плотность костных клеток; Х - количество клеток в квадратной решетке с двойным периодом С и 5С; 1,01 - цена деления при увеличении 7•8; 4,41 - площадь квадратной решетки с двойным периодом С и 5С в миллиметрах. Увеличение плотности костных клеток на 30% и более свидетельствует об активности остеогенеза. Уменьшение плотности костных клеток на 30% и более свидетельствует о снижении интенсивности остеогенеза.

Способ осуществляют следующим образом. От трупов плодов человека 6-7 недель и 14 недель беременности забирали и маркировали фрагменты различных костей черепа.

Предварительно фиксированные в растворе формалина препараты заливали в целлоидин, гистологические срезы окрашивали гематоксилин-эозином и заключали в бальзам. При помощи микроскопа и квадратной решетки с двойным интервалом С и 5С определяли плотность костных клеток в одном квадратном миллиметре (см. таблицу) по формуле Р=1,01•Х/4,41. Плотность костных клеток у эмбрионов 6-7 недель беременности составила в среднем 2416,78 клеток в одном квадратном миллиметре, у плодов 14 недель - 906,97. Полученные данные сравнивали по формуле: К= (Рс2-Рс1)/Рс1•100%, где Pс1 - средняя арифметическая плотность костных клеток у 6-7 недельных эмбрионов; Рс2 - средняя арифметическая плотность костных клеток у 14 недельных плодов. К=(906,97-2416,78)/2416,78•100%= -66%. Количество костных клеток у 14 недельных плодов по сравнению с эмбрионами 6-7 недель беременности уменьшилось на 66%. Следовательно, на 14 неделе беременности произошло снижение активности остеогенеза по сравнению с 6-7 недельными эмбрионами.

Определение активности остеогенеза путем подсчета плотности костных клеток с использованием квадратной решетки с двойным интервалом С и 5С и критерии К позволяет усилить объективизацию сравнительного анализа интенсивности костеообразования. Использование счетного признака цитометрических данных точнее характеризует процессы резорбции и новообразования костной ткани длящиеся в течении онтогенеза организма человека.

Изобретение относится к области медицины. Сущность изобретения заключается в определении активности остеогенеза в костях различных отделов скелета человека и животных на трупном материале в различные возрастные периоды. Технический результат достигается тем, что определение активности остеогенеза проводят путем забора фрагментов костей от трупов людей, фиксации фрагментов костей, изготовления гистологических препаратов, определения при помощи микроскопа и квадратной решетки с двойным интервалом С и 5С плотности костных клеток в одном квадратном миллиметре и при соотношении числа костных клеток в двух различных периодах онтогенеза более или менее 30% судят об интенсивности остеогенеза как высокой или низкой соответственно. Способ обеспечивает точность определения. 1 табл.

Способ определения активности остеогенеза путем забора фрагментов костей от трупа человека, их фиксации в растворе формалина, изготовления гистологических препаратов и подсчета, отличающийся тем, что определение ведут на трупах эмбрионов человека, в кости определяют количество костных клеток в единице площади с использованием квадратной решетки с двойным интервалом С и 5С по формуле
Р= 1,01•Х/4,41,
при этом сравнивают результаты по формуле
К= Рс2-Рс1/Рс1•100%,
где Рс1 - средняя арифметическая плотность костных клеток одной группы;
Рс2 - средняя арифметическая плотность костных клеток другой группы,
при этом увеличение величины К на 30% свидетельствует об активности остеогенеза, а уменьшение величины К на 30% свидетельствует о снижении интенсивности остеогенеза.