ЛЕКАРСТВЕННЫЙ ГЕЛЬ Российский патент 2002 года по МПК A61K38/21 A61K9/00 

Изобретение относится к медицине и фармацевтической промышленности и касается лекарственных форм, содержащих препараты интерферона.

Известен отечественный генно-инженерный человеческий интерферон альфа-2 (ИФ α-2), который обладает выраженной биологической активностью в культуре человеческих клеток [1] . Для клинических целей в РФ выпускается несколько лекарственных форм препарата: интраназальный (100 ME в ампуле), ингаляционный (100 000 ME в ампуле), свечи с интерфероном (0,5-10•10⁶ ME на свечу) [1-4] . Последняя из перечисленных лекарственная форма (торговое название "ВИФЕРОН") в отличие от других препаратов интерферона содержит дополнительно комплекс витаминов-антиоксидантов Е и С. Логическим продолжением данного препарата стала мазь "ВИФЕРОН", в которой так же, как и в свечах, кроме основного действующего вещества - генно-инженерного человеческого ИФ α-2- имеются витамины Е и С [7].

Недостатки мази обусловлены гидрофобным характером жировой основы. Прежде всего, это выражается в затрудненной биодоступности, поскольку при гидрофобной основе поступление вещества происходит только из того слоя мази, который непосредственно соприкасается с кожей. Гидрофобная мазь препятствует нормальному газообмену и таким образом нарушает кожное дыхание. Кроме того, гидрофобная основа затрудняет контакт со слизистыми оболочками, поэтому применение мазей с жировыми основами на слизистой не дает высокого эффекта.

Известен гель на основе лейкоцитарного интерферона, содержащий интерферон и адекватный фармацевтический носитель (ЕР 0127130 А 61 К 45/02). Однако спектр его применения ограничен, поскольку препарат содержит только одно действующее вещество.

Сущность изобретения состоит в том, что предложен лекарственный гель с интерфероном альфа-2 и комплексом антиоксидантов, содержащий, мас.%:
Генно-инженерный интерферон альфа-2, тыс. МЕ/мл - 5 - 500
Витамин Е - 0,01 - 0,1
Метионин - 0,01 - 0,1
Бензойная кислота - 0,01 - 0,1
Лимонная кислота - 0,01 - 0,1
Альбумин сывороточный человеческий - 0,02 - 0,5
Спирт этиловый - 1 - 10
Глицерин - 2 - 20
Натрий карбоксиметилцеллюлоза - 0,5 - 2,5
Натрия тетраборат - 0,1 - 1,0
Вода - До 100,0 ч
Существенными признаками изобретения является включение в его состав комплекса антиоксидантов различного механизма действия. Антиоксиданты стабилизируют мембраны клеток организма, повышая их резистентность к разным повреждающим агентам (инфекционные возбудители, ионизирующая радиация, токсические вещества). Поскольку входящие в состав геля антиоксиданты действуют на разных ступенях процесса свободнорадикального окисления, их совместное применение обеспечивает полноту защиты клеток от повреждающего действия промежуточных и конечных продуктов перекисного окисления липидов. Токоферол обладает непосредственно антирадикальным действием, метионин и бензойная кислота обезвреживают радикалы гидроксила, лимонная кислота связывает ионы металлов с переменной валентностью, которые инициируют процессы перекисного окисления. В лабораторных опытах было показано, что при совместном внесении в клеточную культуру интерферона и антиоксидантов противовирусная активность интерферона возрастает синергидно. Свойство интерферона препятствовать размножению микробов опосредованно через стимуляцию системы фагоцитов значительно усиливается введением в препарат бензойной кислоты и натрия тетрабората, которые обладают прямым антимикробным действием. Таким образом, введение в лекарственную форму интерферона комплекса антиоксидантов и антибактериальных веществ позволяет получить новый результат, а именно:
1) расширить спектр терапевтического применения, используя гель с антиоксидантами при тех нозологических формах, когда применение геля только с интерфероном мало или неэффективно;
2) достигать того же уровня противовирусной активности, как у геля-прототипа при уменьшенной дозе интерферона (либо получать более высокую эффективность при той же дозе интерферона);
3) избежать побочных эффектов, присущих самому интерферону, за счет коррекции со стороны антиоксидантов.

В специально проведенных исследованиях было показано, что выход за заявленные значения компонентов геля в сторону снижения вызывает уменьшение специфической активности, а в сторону увеличения приводит к ухудшению органолептических свойств геля без усиления специфической активности.

Ниже представлена характеристика компонентов, входящих в состав геля:
Рекомбинантный альфа-2 интерферон
Продуцируется бактериальным штаммом псевдомонады, в генетический аппарат которого встроен ген человеческого лейкоцитарного альфа-2 интерферона. Идентичен человеческому лейкоцитарному интерферону. Пористый порошок или пористая масса белого цвета, гигроскопичен. Обладает противовирусной, иммуномодулирующей и противоопухолевой активностью. Применяют при вирусных и опухолевых заболеваниях. Назначают внутримышечно, субконъюнктивально и местно (в виде глазных капель).

Токоферола ацетат (Витамин Е)
Светло-желтая прозрачная вязкая маслянистая жидкость со слабым запахом. На свету окисляется и темнеет. Является природным противоокислительным средством (антиоксидантом прямого действия). Участвует в биосинтезе гема и белков, пролиферации клеток, в тканевом дыхании и других важнейших процессах клеточного метаболизма.

Метионин
Белый кристаллический порошок с характерным запахом (меркаптосоединений) и слегка сладковатым вкусом. Мало растворим в воде. Относится к числу незаменимых аминокислот, необходимых для поддержания роста и азотистого равновесия организма. Участвует в синтезе адреналина, креатина и других биологически важных соединений; активирует действие гормонов, витаминов, ферментов. Путем метилирования и транссульфирования метионин обезвреживает токсичные продукты. Обладает антиокислительной активностью за счет инактивации радикалов гидроксила. Применяют для лечения и предупреждения заболеваний и токсических поражений печени, а также при хроническом алкоголизме, сахарном диабете и др.

Бензойная кислота
Бецветные игольчатые кристаллы или белый мелкокристаллический порошок. Мало растворима в воде. Обладает антиокислительной активностью за счет инактивации радикалов гидроксила. Наружно применяют в качестве противомикробного и фунгицидного средства. При приеме внутрь усиливает секрецию слизистых оболочек дыхательных путей. Как отхаркивающее средство применяют натриевую соль бензойной кислоты.

Спирт этиловый
В медицинской практике спирт этиловый применяют преимущественно как наружное антисептическое и раздражающее средство для обтираний, компрессов и т. п. Широко применяют в различных разведениях для изготовления настоек, экстрактов и лекарственных форм для наружного применения.

Натрия тетраборат
Бесцветные прозрачные, легковыветривающиеся кристаллы или белый кристаллический порошок. Растворим в воде, глицерине, нерастворим в спирте. Применяют наружно как антисептическое средство.

Лимонная кислота
Вещество, обладающее антиоксидантным действием (за счет связывания ионов металлов с переменной валентностью) и предупреждающее свертывание крови. В медицине обычно используется натриевая соль лимонной кислоты - цитрат натрия - в качестве антикоагулянта. Лимонная кислота в качестве консерванта широко применяется в пищевой промышленности.

Альбумин сывороточный человеческий
Белок, представляющий весьма важную фракцию человеческой плазмы, в организме поддерживает осмотическое давление в циркуляции крови и служит для питания тканей и органов. Препарат альбумина представляет собой прозрачную, вязкую жидкость янтарного цвета. Альбумин является классическим стабилизатором активности высокоочищенного интерферона.

Глицерин
Густая прозрачная бесцветная гигроскопическая жидкость, смешивающаяся с водой. Используется как растворитель в жидких лекарственных препаратах, для создания определенной консистенции в мягких лекарственных формах.

Натрий карбоксиметилцеллюлоза
Водорастворимый полимер, образующий при смешивании с водой коллоидоподобные растворы и гели (в зависимости от концентрации полимера), производные целлюлозы (натрий-КМЦ, метилцеллюлоза, гидроксипропилцеллюлоза и др.) нашли широкое применение в фармацевтической промышленности в качестве стабилизаторов и пролонгаторов действия лекарственных веществ в глазных каплях и в качестве основ для мазей и гелей.

Приготовление геля осуществляется следующим образом.

Натрий карбоксиметилцеллюлозу смешивают с водой и оставляют для набухания, затем добавляют глицерин, перемешивают. Смесь стерилизуют автоклавированием. В полученную основу последовательно добавляют все вещества, входящие в композицию геля, термостатируют, разливают теплый гель в стерильные банки темного стекла и укупоривают их стерильными крышками.

Полученное средство представляет собой беловато-сероватый гель, растворимый в воде (1:20) с образованием коллоидоподобного раствора (рН 7,0±0,5). После нанесения на поврежденную кожу или слизистые оболочки гель высыхает с образованием пленки, которая оказывает дополнительное защитное действие на поврежденную поверхность. Повторные нанесения можно делать на пленку. Свойства основы таковы, что полимерная сетка не препятствует всасыванию действующих веществ из верхних слоев при повторных нанесениях. Таким образом, можно достигать высоких местных концентраций интерферона при относительно малой активности геля. При желании пленку можно отслоить или смыть водой.

Для раскрытия сущности изобретения приведены результаты клинического исследования заявленного геля:
Гель был исследован на 30 больных в возрасте от 18 до 55 лет с длительностью заболевания (генитальный и лабиальный герпес) не менее 6 месяцев. Больные контрольной группы (10 человек) получали "Зовиракс" по общепринятой схеме и не получали других препаратов или индукторов интерферона. Распределение больных по группам осуществлялось рандомизировано по мере их поступления.

Гель применяли путем аппликации на пораженные участки 3-4 раза в день. Курс лечения составлял от 2 до 10 дней (в среднем 3-5 дней).

Клиническая эффективность препарата оценивалась на основании клинических, биохимических параметров и данных вирусологического обследования в виде совокупной оценки эффекта.

Клиническая характеристика больных
Под наблюдением находилось 30 больных с тяжелым обострением (2-3 раза в месяц) рецидивирующего герпеса в возрасте 18-55 лет. Среди них было 14 мужчин и 16 женщин, локализация герпетических высыпаний у больных представлена в табл. 1.

Большинство больных находилось в состоянии начала рецидива заболевания. Применявшаяся ранее у этих больных общепринятая терапия была неэффективна и не влияла на частоту рецидивов.

Лечение начинали на разных стадиях развития инфекции: в период предвестников (жжение, зуд, субфебрильная температура), в первый день рецидива, во второй день рецидива (нарастание клинических симптомов - усиление гиперемии и отечности, увеличение количества везикул, выраженные субъективные ощущения), при развитии общих явлений (общее недомогание, слабость, озноб).

Результаты проведенной терапии
Уже через 1 сутки после применения геля отмечено купирование субъективных ощущений, а после 2-го дня применения - и общих явлений. К концу вторых суток после начала терапии гелем отмечалась стабилизация процесса, прекращалось образование новых везикул. С третьего дня наблюдалось начало регресса высыпаний. Температурной реакции, явлений непереносимости и аллергических реакций на применение геля не отмечалось (см. табл. 2 и 3).

Влияние предложенной композиции на содержание антигена вируса герпеса (кондуктометрический метод)
Сравнение показателей содержания антигена (АГ) вируса герпеса до лечения и через 12 дней после лечения продемонстрировало значительное снижение количества АГ: до отрицательной реакции у 17 больных, до слабоположительной у 13 больных, что четко коррелирует с клиническими проявлениями.

Влияние на иммунологические показатели крови
У всех больных отмечалось значительное снижение иммунорегуляторного индекса (при небольшом уменьшении количества Т-хелперов и значительном увеличении Т-супрессоров), снижение активности естественных киллеров, активированных Т-клеток, рецепторов к HLA-DR+.

Сущность изобретения иллюстрируется следующими примерами
Пример 1. Больной В., 28 лет, в течение 7 лет страдает рецидивирующим лабиальным герпесом. Продолжительность межрецидивного периода колеблется от 2 недель до 2 месяцев. Лечение общепринятыми методами не дало результата. Больной поступил на 3 день от начала очередного рецидива. Был назначен гель следующего состава, мас.%:
Генно-инженерный интерферон альфа-2, тыс. МЕ/мл - 5 - 500
Витамин Е - 0,01 - 0,1
Метионин - 0,01 - 0,1
Бензойная кислота - 0,01 - 0,1
Лимонная кислота - 0,01 - 0,1
Альбумин сывороточный человеческий - 0,02 - 0,5
Спирт этиловый - 1 - 10
Глицерин - 2 - 20
Натрий карбоксиметилцеллюлоза - 0,5 - 2,5
Натрия тетраборат - 0,1 - 1,0
Вода - До 100,0 ч
Препарат наносили 4 раза в сутки. На 2 сутки началось угасание болезненных ощущений, к 5 дню очаг эпителизировался. Длительность межрецидивного периода составила 3 месяца. Был проведен аналогичный повторный курс лечения, после чего в течение 6 месяцев (срок наблюдения) рецидива не возникало. Никаких побочных явлений препарат не вызывал.

Пример 2.

Больная Ж, 29 лет. Страдает рецидивирующим генитальным герпесом в течение 2 лет. Продолжительность межрецидивного периода колеблется от 2 до 4 месяцев. Лечение общепринятыми методами не дало результата. Поступила в период продромальных симптомов. Больной был назначен гель следующего состава, мас. %:
Генно-инженерный интерферон альфа-2, тыс. МЕ/мл - 5 - 500
Витамин Е - 0,01 - 0,1
Метионин - 0,01 - 0,1
Бензойная кислота - 0,01 - 0,1
Лимонная кислота - 0,01 - 0,1
Альбумин сывороточный человеческий - 0,02 - 0,5
Спирт этиловый - 1 - 10
Глицерин - 2 - 20
Натрий карбоксиметилцеллюлоза - 0,5 - 2,5
Натрия тетраборат - 0,1 - 1,0
Вода - До 100,0 ч
Препарат наносили 3 раза в день. Исчезновение субъективных ощущений происходило уже в первый день применения препарата. Развившееся высыпание было незначительным и полная эпителизация очага поражения наблюдалась к 5 дню. В течение 6 месяцев (срок наблюдения) рецидива заболевания не возникало.

Таким образом, из представленных данных следует, что заявленный гель обладает рядом преимуществ: высокой терапевтической активностью, не вызывает побочных явлений, прост в применении.

По сравнению с прототипом данный препарат имеет более высокую эффективность и более широкий спектр действия, поскольку входящие в состав геля антиоксиданты повышают противовирусную и антимикробную активности интерферона, стабилизируют мембраны клеток организма от повреждающего действия различных агентов, усиливают репаративную функцию кожи. Отличительные свойства препарата позволяют использовать гель не только для лечения герпетических повреждений кожи, но и для лечения ран, ожогов, нарывов и т.п. заболеваний, когда применение геля только с интерфероном будет мало или вообще неэффективно. Свойства водополимерной основы позволяют наносить гель многократно на пленку, образовавшуюся после первичного нанесения препарата. Тонкая пленка основы, которая образуется после всасывания действующих веществ в ткани, обеспечивает дополнительную защиту поврежденной поверхности, сохраняя при этом газообмен с окружающим воздухом и не нарушая клеточного дыхания тканей.

Кратностью нанесения препарата можно варьировать дозу в широком диапазоне, достигая высоких значений местной концентрации интерферона при относительно небольшой активности геля.

Высокая биодоступность препарата делает его высокоэкономичным, поскольку позволяет достигнуть желаемого терапевтического эффекта при использовании меньших количеств интерферона, нежели в случае с прототипом.

Список литературы
1. Брюханова Л.К. и др. Педиатрия, 1982, 7, с.55-57.

2. Бугаева Н.П. и др. В кн.: Вирусные гепатиты. М., 1987, с.167-173.

3. Линник Л.Ф. и др. В кн.: Экспериментальные исследования в офтальмологии. М., 1986, с.132-134.

4. Малиновская В.В. и др. Вопросы вирусологии, 1989, 2, с.180-183.

5. Калинин Т.Ю. и Парфенов В.В. Журнал микробиологии, 1985, 10, с.3-7.

6. Парфенов В. В. и др. Антибиотики и химиотерапия, 1990, т.35, 9, с. 38-41.

7. Патент РФ 2114611 от 10.07.98. МПК 6 А 61 К 9\06, 38\21.

8. Европейский патент 0127130 А 61 К 45\02 (прототип).

Изобретение относится к медицине и фармацевтической промышленности и касается лекарственных форм, содержащих препараты интерферона. Сущность изобретения: предложен гель с интерфероном и витамином Е, содержащий дополнительно метионин, бензойную кислоту, лимонную кислоту, альбумин сывороточный человеческий, спирт этиловый, глицерин, натрий карбоксиметилцеллюлозу, натрия тетраборат и воду. Технический результат: гель обладает рядом преимуществ: более широким спектром терапевтического применения, большей степенью противовирусной активности в сравнении с прототипом при равных дозах интерферона, большей экономичностью; препарат не вызывает побочных явлений, прост в применении. 3 табл.

Лекарственный гель, содержащий интерферон, отличающийся тем, что используют генно-инженерный интерферон альфа-2 и дополнительно витамин Е, метионин, бензойную и лимонную кислоты, альбумин сывороточный человеческий, спирт этиловый, глицерин, натрий карбоксиметилцеллюлозу, натрия тетраборат при следующих соотношениях компонентов, мас. %:
Генно-инженерный интерферон альфа-2, тыс. МЕ/мл - 5 - 500
Витамин Е-токоферол - 0,01 - 0,1
Метионин - 0,01 - 0,1
Бензойная кислота - 0,01 - 0,1
Лимонная кислота - 0,01 - 0,1
Альбумин сывороточный человеческий - 0,02 - 0,5
Спирт этиловый - 1,0 - 10,0
Глицерин - 2,0 - 20,0
Натрий карбоксиметилцеллюлоза - 0,5 - 2,5
Натрия тетраборат - 0,1 - 1,0
Вода - До 100