СПОСОБ ПРОФИЛАКТИКИ СЕЗОННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ ОСТРЫХ РЕСПИРАТОРНЫХ ИНФЕКЦИЙ - ОРИ И ПОВЫШЕНИЯ ЗАЩИТНЫХ СИЛ ОРГАНИЗМА Российский патент 2002 года по МПК A61K31/07 A61P31/00 

Изобретение относится к иммунологии и медицине и может быть использовано для профилактики сезонных заболеваний ОРИ и повышения защитных сил организма в целом.

Исследования последних лет показали, что недостаток бета-каротина и ретинола в рационе человека обусловливают развитие вторичной иммунной недостаточности в комплексе с гиповитаминозом A (Uteshev D.B., Sergeev A.V., Uteshev B. S., 1998) В связи с этим была изучена иммунотропность бета-каротина как стимулятора активности клеток, принимающих участие в развитии иммунных реакций клеточного и гуморального типа (Буюклинская О.В., 1992; Плецитый К.Д., Давыдова Т.Ф., Фомина В.Г. и соавт., 1987 г.). Полученные данные свидетельствуют о целесообразности его использования в профилактике и лечении патологических состояний (в том числе и онкологических заболеваний), связанных с дисбалансом в иммунной системе,. Это обусловлено способностью бета-каротина стимулировать дифференцировку В- и Т-лимфоцитов и выраженными антиоксидантным и детоксикационным эффектами (Чиркин А.А. и соавт., 1997; Подцубный Н.П., Казарян Р.В., 1999).

Однако основная часть исследований иммунотропности бета-каротина связана с оценкой специфических звеньев иммунитета - гуморального и клеточного. Оценка функциональной активности системы клеток неспецифической защиты (нейтрофильных гранулоцитов) при оценке действия данного препарата в комплексной терапии иммунной недостаточности практически не изучена. Имеются лишь отдельные сведения об эффективности модуляции функций нейтрофилов бета-каротином при некоторых заболеваниях, в частности, желудочно-кишечного тракта (Чиркин А.А., Казарян Р.В., Поддубный Н.П., 1997). Установлено отсутствие влияния его на нейтрофилы интактных животных (Потапова А.А. и соавт., 1995). Между тем, оценка функционального статуса нейтрофильных гранулоцитов - основной в количественном отношении клеточной популяции периферической крови, оснащенной мощными микробицидными и цитотоксическими механизмами, является важнейшим способом зондирования иммунного гомеостаза (Маянский А.Н., Маянский Д.Н.;, 1989, Колесникова Н.В., 1999).

Аналогом предлагаемого изобретения может служить иммуномодулятор имунофан - регуляторный пептид четвертого поколения, способный повышать генетическую стабильность лимфоцитов. Принципиальным отличием имунофана от многих других иммуномодуляторов является его модулирующее действие на другие системы гомеостаза организма. Присутствие имунофана защищает ДНК лимфоцитов при воздействии низких концентраций перекиси водорода. Обработка клеток препаратом повышает их защитный потенциал, оцениваемый по степени повреждения ДНК. При терапии имунофаном отмечается также стабилизация уровня продукции свободных форм кислорода фагоцитами до значений физиологической нормы, что позволяет сохранить их резервные возможности к бактериальному киллингу и избежать повреждающего действия на клетки ближайшего окружения (Лебедев В.В. , Шелепова Т. М., Степанов О.Г. и др. Имунофан - регуляторный пептид в терапии инфекционных и неинфекционных болезней / Под ред. В.И. Покровского. М. : Праминко, 1998. С. 120). Действительно, благодаря приему имунофана достигается два эффекта: коррекция окислительно-восстановительного статуса и восстановление иммунной системы организма (Лебедев В.В., Шелепова Т.М., Степанов О.Г. и др. Имунофан - регуляторный пептид в терапии инфекционных и неинфекционных болезней / Под ред. В.И. Покровского. М.: Праминко, 1998. С. 120). Имунофан эффективен в очень низких дозах, для него характерна высокая биодоступность, он не накапливается в организме, оказывает биологическое действие через специфические рецепторы, утилизируется в результате естественных обменных процессов и обладает низкой токсичностью. Имунофан действует на клетки иммунной системы через различные механизмы. С одной стороны, препарат стимулирует образование ИЛ-2 иммунокомпетентными клетками, с другой - повышает чувствительность лимфоидных клеток к этому лимфокину, что, вероятно, реализуется посредством увеличения плотности соответствующих рецепторов. Имунофан оказывает регулирующее влияние на продукцию медиаторов иммунитета, иммуноглобулинов, в том числе, при недостаточности IgA или гиперпродукции IgE, обеспечивает восстановление пролиферативной активности лимфоцитов у иммунокомпроментированных лиц и стимулирует синтез антителпродуцирующих клеток (Лебедев В.В., Шелепова Т.М., Степанов О.Г. и др. Имунофан - регуляторный пептид в терапии инфекционных и неинфекционных болезней / Под ред. В.И. Покровского. М.: Праминко, 1998. С. 120). К недостаткам имунофана следует отнести его высокую себестоимость и необходимость длительного применения. Небезопасна его передозировка.

За прототип предлагаемого изобретения нами избран способ профилактики заболеваний путем введения витамина А (Государственный реестр лекарственных средств. Типовые клинико-фармакологические статьи. Официальное издание. М. Т. II. 2000. С.506). Он (витамин А) входит в состав многих иммуномодулирующих препаратов. Витамин А обнаружен только в продуктах животного происхождения (рыбий жир, жир молока, сливочное масло, сливки, творог, сыр, яичный желток, жир печени и жир других органов - сердца, мозга). Витамин А депонируется в печени. Однако в организме человека (в кишечной стенке и печени) витамин А может образовываться из некоторых пигментов, называемых каротинами, которые широко распространены в растительных продуктах. Наибольшей активностью обладает бета-каротин (провитамин А). Считается, что 1 мг бета-каротина по эффективности соответствует 0,17 мг витамина А (ретинол). Из бета-каротина в организме образуется ретиналь, затем ретинол. И, очевидно, существуют надежные механизмы регуляции уровня абсорбции бета-каротина, позволяющие избежать токсических эффектов при передозировке. Кроме того, процесс превращения бета-каротина в витамин А, вероятно, строго контролируется. В результате такой сложной регуляторной системы бета-каротин представляется как наиболее безопасный препарат витамина А. Безопасность бета-каротина наиболее полно отвечает целям иммунокоррекции на ранних проклинических стадиях иммунной недостаточности, а данный иммуномодулятор имеет статус пищевой добавки. Действительно, ни один из существующих на сегодняшний день иммуномодуляторов не отвечает требованиям безопасности настолько, как бета-каротин (Danil В. Uteshev, Alexander V. Sergeev, Boris S. Uteshev. Analysis of Immunomodulating Properties of Retinoids // Russian Journal of Immunology. 1998. 3-4). При введении в организм витамина А только с продуктами питания иммунокоррелирующий эффект оказывается недостаточным.

Задача: поиск способа повышения защитных свойств организма в целом и профилактики сезонной заболеваемости ОРИ в скученных коллективах.

Для осуществления намеченной задачи исследованы возможные иммунопротективные эффекты бета-каротина у практически здоровых лиц, на основе изучения функциональной активности системы нейтрофильных гранулоцитов.

Сущностью предлагаемого изобретения является возможность достоверного повышения защитных свойств организма и снижения сезонной заболеваемости ОРИ в скученных коллективах на 25-30% включением в пищевой рацион практически здоровых людей бета-каротина в дозе 20 мг/сут в течение 40 дней, который оказывает стимулирующее действие на систему нейтрофильных гранулоцитов в пределах физиологической нормы, т.е. предлагается двухкратный прием бета-каротина на растительном масле, например, подсолнечном, в 0,2% концентрации бета-каротина, по 5-7 мл 2 раза в день.

Техническая новизна предлагаемого изобретения состоит в установлении свойств бета-каротина, которые позволяют его рассматривать как иммуномодулятор выраженного иммунопротективного действия.

Способ осуществляют следующим образом. В пищевой рацион практически здоровых людей (25 человек) в течение 40 дней включали препарат "Каролин", содержащий бета-каротин в суточной дозе 20 мг. Эта доза в два раза превышает физиологическую потребность человеческого организма в бета-каротине (Russel R. V. Nutrition. JAMA. 1994. Vol. 271. - P. 1687-1689). Оценку основных функций нейтрофильных гранулоцитов - фагоцитарную и микробицидную осуществляли дважды до включения в рацион бета-каротина и по истечении 40 дней. Группой сравнения служили практически здоровые дети тех же возрастов, находящиеся в течение времени наблюдения на том же пищевом рационе, но без добавления бета-каротина. Оценку фагоцитарной активности проводили по отношению к суточной культуре бактерий Staphylococcus aureus (штамм 209) по следующим показателям: проценту активных фагоцитов (%ФАН), фагоцитарному числу (ФЧ), фагоцитарному индексу (ФИ), проценту переваривания (ПП) и индексу переваривания (ИП) (Нестерова И.В. и соавт., 1996). Оксидазную микробицидность нейтрофилов оценивали по показателям спонтанного и стимулированного NBT-теста: среднему цитохимическому индексу (СЦИ спонтанному, СЦИ стимулированному), проценту формазан-позитивных клеток (%ФПК спонтанному и %ФПК стимулированному) и коэффициенту мобилизации (КМ), рассчитываемому по отношению %ФПК в стимулированном к %ФПК в спонтанном NBT-тесте (Нестерова И. В. и соавт., 1996). Полученные данные подвергали адекватной статистической обработке с использованием критерия t Стьюдента.

Анализ полученных результатов исследования показал, что длительное включение в пищевой рацион практически здоровых детей бета-каротина оказывает стимулирующее влияние на основную функцию нейтрофильных гранулоцитов - фагоцитарную (фиг. 1, 2). Показано увеличение поглотительной способности фагоцитов судя по фагоцитарному числу в 1,3 раза, а по фагоцитарному индексу в 1,5 раза. Процент переваривания при этом возрос до 64,30±2,20 против 50,40±4,14 при исходной оценке, а индекс переваривания увеличился до 1,83±0,12 по сравнению с 1,03±0,08 до начала эксперимента (р<0,01). Анализ аналогичных данных в группе сравнения не позволил установить достоверных изменений за исключением процента переваривания, уровень которого в конце эксперимента был достоверно выше, чем в его начале (59,90±1,76 против 51,00±3,69), не достигая при этом значений данного показателя в группе подростков, в рацион которых добавлялся бета-каротин. В отношении количества активно фагоцитирующих клеток обнаружена лишь тенденция к их возрастанию (р>0,30) у детей, получавших бета-каротин (56,10±3,21 против 51,20±1,61 в начале эксперимента).

Одной из причин обнаруженной активации переваривающей активности нейтрофильных гранулоцитов при включении в пищевой рацион бета-каротина может быть усиление микробицидной оксидазной системы клеток. В частности, результатами исследования установлено достоверное возрастание показателей спонтанного NBT-теста: СЦИ 0,39±0,03 против 0,14±0,01 в исходном фоне и %ФПК 7,46±2,11 против 2,68±0,90 до начала эксперимента (фиг. 3,4). Между тем, наблюдаемые изменения нельзя считать гиперактивацией, которая зачастую приводит к последующему истощению оксидазной микробицидности. В пользу такого предположения свидетельствуют факты о сохранении адекватности реагирования микробицидной системы НГ в нагрузочных тестах in vitro: величина коэффициента мобилизации составила при этом 1,63±0,01 против 1,26±0,04 в исходном фоне (фиг.4). Кроме того, обращает на себя внимание менее выраженное и недостоверное увеличение кислород-зависимой микробицидности нейтрофилов детей группы сравнения, не получавших бета-каротин, что также не позволяет считать наблюдаемые изменения в системе НГ гиперэргической реакцией.

Таким образом, результаты апробации позволяют рассматривать бета-каротин как иммуномодулятор выраженного иммунопротективного действия.

Обсуждая возможные механизмы выявленных эффектов бета-каротина, следует учесть, что данный препарат обладает широким спектром иммунотропной активности, вызывая модуляцию функций как иммунокомпетентных лимфоцитов, так и фагоцитов - клеток макрофагального звена (Gruner S.e.a., 1986; Prabhata R.e. a. , 1990). Кроме того, известно, что бета-каротин способен сохранять на нормальном уровне интерлейкин-2 при действии иммунодепрессантов (Буюклинская О. В. и соавт., 1992), который, в свою очередь, является активатором функциональной активности клеток гранулоцитарного ряда (Stevens P., Piazza D., 1990; Li Jun e.a., 1996). В связи с тем, что основной механизм активирующего эффекта бета-каротина обусловлен синтезом новых гликопротеиновых рецепторных молекул на иммунокомпетентных клетках (Кузнецов С. и соавт., 1992), наблюдаемую нами активацию функции захвата, поглощения и переваривания антигенного материала нейтрофилами детей, получавших бета-каротин, можно связать именно с этой его способностью. Наконец, известны факты о бета-каротине, как о средстве, повышающем устойчивость к стрессорным воздействиям (Потапова А. А. и соавт., 1995).

Включение в пищевой рацион практически здоровых лиц бета-каротина в течение 40 дней в суточной дозе 20 мг достоверно повышает способность нейтрофилов к поглощению и перевариванию антигенного материала, активирует оксидазную микробицидность клеток, не выходя при этом за достоверные пределы физиологической нормы, а лишь переводя их на более высокий уровень функционирования. Это позволяет считать бета-каротин достаточно-эффективным иммунопрофилактическим средством, повышающим неспецифическую резистентность организма детей-подростков.

Практически здоровым лицам назначали 0,2% бета-каротин на подсолнечном масле, из расчета 5 мл (пример 1) и 7 мл (пример 2) 2 раза в день в течение 40 дней.

ПРИМЕР 1.

Горелов Станислав, 17 лет.

ПРИМЕР 2.

Саманов Роман, 12 лет.

Наблюдение за лицами (примеры 1, 2), представленное в табл. 1 и 2, в течение эпидемического периода ОРИ, показало, что ни один из них не болел простудными заболеваниями.

Медико-социальный эффект от применения предлагаемого "Способа профилактики сезонных заболеваний ОРИ и повышения защитных сил организма в целом фармакологическим средством бета-каротином" достоверно повысит защитные свойства организма и снизит сезонную заболеваемость ОРИ в скученных коллективах на 25-30%, предотвратит воздействие на организм людей неблагоприятных средовых факторов, сопровождающих их деятельность.

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для профилактики сезонных заболеваний ОРИ и повышения защитных сил организма в целом. Для этого включают в пищевой рацион бета-каротин в дозе 20 мг/сут в течение 40 дней. Способ достоверно повышает защитные свойства организма и снижает сезонную заболеваемость ОРИ. 2 табл., 4 ил.

Способ профилактики сезонных заболеваний острых респираторных инфекций и повышения защитных сил организма, включающий введение в пищевой рацион добавок, отличающийся тем, что назначают 0,2%-ный бета-каротин на растительном масле в течение 40 дней по 5-7 мл 2 раза в день.