СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ СТЕПЕНЕЙ ТЯЖЕСТИ КРИОПОВРЕЖДЕНИЯ Российский патент 2003 года по МПК G01N33/86 

Изобретение относится к медицине, в частности к физиологии, патофизиологии, хирургии, и может быть использовано для диагностики степени тяжести криотравмы.

Известные способы диагностики степени тяжести криотравмы основываются на данных морфологического изменения тканей, подверженных криовоздействию (Котельников В. П. Отморожения. М.: Медицина, 1988). В ответ на нанесение криотравмы различной интенсивности возникают различные повреждения тканей, начиная от отморожения первой степени при нанесении слабой криотравмы до четвертой степени, с мутиляцией конечностей при нанесении сильной криотравмы. При этом возникают характерные изменения в вегетативном статусе организма, являющиеся предтечей морфологических изменений. Доминирование синтоксических или катотоксических программ адаптации проявляется активацией или депрессией антиоксидантных, противосвертывающих механизмов крови с явлениями угнетения или активации иммуногенеза, по которым можно судить о степени тяжести криотравмы.

Наиболее широко используемым является способ определения степени тяжести криоповреждения по морфологическим изменениям тканей, подверженных криовоздействию (Котельников В.П. Отморожения. М.: Медицина, 1988).

Однако недостатком данного способа определения тяжести является невозможность сопровождать диагностику патогенетической терапией, так как ткани уже погибли, и требуется лишь их удаление.

Прототипом является способ диагностики степени коагулопатии потребления путем изучения противосвертывающих и антифибринолитических (антитромбина III, α₂-макроглобулина, гепарина, плазмина, фибриногена, α₁-антитрипсина) показателей крови путем расчета коэффициента депрессии противосвертывающей системы (КДПС) (Патент РФ 2105312, МПК⁶ G 01 N 33/86, Б.И. 5 от 20.02.98).

Недостатком данного способа является то, что не принимается во внимание активность антиоксидантной системы, системы активности биологически активных аминов и иммунной системы, четко отражающих состояние синтоксических программ адаптации.

Задачей настоящего изобретения является более полная диагностика степени тяжести криоповреждения, отражающая общее функциональное состояние организма.

Поставленная задача решается за счет того, что изучают показатели крови, в плазме которой определяют содержание противосвертывающих факторов, в частности, антитромбина III и α₂-макроглобулина, в плазме крови определяют дополнительно содержание антиоксидантных факторов, системы биологически активных аминов и иммунной системы и диагностируют степень тяжести криоповреждения по коэффициенту активности синтоксических программ адаптации (КАСПА), определяемому по следующей зависимости:

где А_ат-III - относительная активность антитромбина III (%); А_аоа - относительная общая антиокислительная активность плазмы (%); С_ах - относительная концентрация ацетилхолина в крови (нмоль/л); C_IgM - относительная концентрация иммуноглобулинов М в крови; C_α2-мг - относительная концентрация α₂- макроглобулина (мкмоль/л); С_мда - относительная концентрация малонового диальдегида (мкмоль/л); С_кх - относительная концентрация катехоламинов (мкг/л); C_IgA - относительная концентрация иммуноглобулинов А (мкмоль/л). В качестве антиоксидантных факторов взяты показатели общей антиокислительной активности плазмы и малонового диальдегида. В качестве показателей системы биологически активных аминов взяты концентрации ацетилхолина и катехоламинов. В качестве показателей иммунной системы взяты концентрации иммуноглобулина М и иммуноглобулина А.

Способ осуществляется следующим образом.

У животных, в нашем эксперименте крыс, определяют степень включения адаптивных программ, показателем которых является КАСПА.

Для изучения степени включения синтоксических и кататоксических программ адаптации при нанесении криотравмы были проведены эксперименты на 240 крысах. Криотравма слабой интенсивности вызывалась распылением хлорэтила на тазовые лапки крыс до снижения температуры стоп +4,0±0,06^oС с развитием отморожения 1,0±0,02^oС степени; криотравма средней интенсивности также вызывалась распылением хлорэтила на тазовые лапки до снижения температуры стоп -0,4±0,06^oС с развитием отморожения 1,6±0,08 степени; криотравма сильной интенсивности также вызывалась распылением хлорэтила на тазовые лапки до снижения температуры стоп -7,4±0,06^oС с развитием отморожения 3,5±0,01 степени, и мутиляцией тканей на 5-6 сутки наблюдения. У всех животных, в различные сроки после согревания (20 мин, 2 и 4 ч, 1, 2, 5 и 10 сут) в крови, оттекающей из зоны криотравмы, исследовали: состояние антиоксидантного, противосвертывающего и иммунного потенциалов крови, а также обмен биологически активных аминов по общепринятым методикам, на биохимическом анализаторе FP-901 фирмы "Labsistems" (Финляндия) с использованием реактивов фирмы "Boehringer Mannheim" (Германия).

Коэффициент активности синтоксических программ адаптации (КАСПА) рассчитывался следующим образом:

где А_ат-III - относительная активность антитромбина III (%); А_аоа - относительная общая антиокислительная активность плазмы (%); С_ах - относительная кoнцeнтpaция ацетилхолина в крови (нмоль/л); C_IgM - относительная концентрация иммуноглобулинов М в крови; C_α2-мг - относительная концентрация α₂- макроглобулина (мкмоль/л); С_мда - относительная концентрация малонового диальдегида (мкмоль/л); С_кх - относительная концентрация катехоламинов (мкг/л); C_IgA - относительная концентрация иммуноглобулинов А (мкмоль/л).

Данный коэффициент объективно отражает степень активности синтаксических программ адаптации и соответственно кататоксических программ. У здоровых крыс он в среднем составляет 1,0-1,05. При легкой степени криотравмы коэффициент активности синтоксических программ адаптации составляет в среднем 1,1-1,2; при средней степени тяжести - 1,3-1,5 и при тяжелой степени тяжести криотравмы он через 4 ч составляет менее 0,3, и изменяется в динамике криотравмы следующим образом (таблица).

Концентрация или активность используемых для расчета величин выражена в % от значения контрольных величин. В качестве контроля служили данные, полученные у 30 здоровых крыс обоего пола. Данный коэффициент отражает степень адаптивности неспецифических программ адаптации и проявляется в характерной вегетативной симптоматике.

Способ осуществляется следующим образом у больных с различными степенями отморожений.

При поступлении больного в клинику дается клиническая оценка состояния, а также степень включения адаптивных программ, показателем которых является КАСПА.

Данный коэффициент объективно отражает степень активности синтоксических программ адаптации и соответственно кататоксических программ. У здоровых мужчин и женщин КАСПА составляет в среднем 1,0-1,05. При легкой степени отморожения коэффициент активности синтоксических программ адаптации составляет в среднем 1,06-1,2; при средней степени отморожения - 1,21-1,5 и при тяжелой степени коэффициент КАСПА составляет менее 0,9.

Для определения коэффициента КАСПА у больных забирается кровь из локтевой вены натощак в количестве 10 мл, в которой исследуются показатели антиоксидантных, противосвертывающих и иммунных механизмов с одновременным определением биологически активных аминов, в частности адреналина и серотонина, по унифицированным методикам. Затем производится расчет коэффициента активности синтоксических программ адаптации следующим образом:

где С_ст - концентрация серотонина в крови; А_ат-III - активность антитромбина III; А_аоа - общая антиокислительная активность плазмы; С_cд8+ - концентрация Т-супрессоров; С_ад - концентрация адреналина крови; C_α2мг - концентрация α₂-макроглобулина; С_мда - концентрация малонового диальдегида; С_сд4+ - концентрация Т-хелперов.

Концентрация или активность используемых для расчета величин выражена в % от значения контрольных величин. В качестве контроля служили данные, полученные у 20 здоровых мужчин и женщин в возрасте 20-25 лет. Данный коэффициент отражает степень адаптивности неспецифических программ адаптации и проявляется в характерной симптоматике.

Пример 1. Больная Г., 39 лет, обратилась в поликлинику 12.01.1996 года с жалобами на боли в правой кисти и ее небольшой отек, онемение. В ночь на 11.01.1996 года произошло отморожение во время прогулки, когда температура воздуха была -18^oС и ее правая кисть была без перчатки. Дома кисть отогрела теплой водой и на следующий день обратилась в поликлинику.

Объективно: покраснение правой кисти с небольшим отеком. Пульсация на лучевой артерии нормальная. Диагноз: отморожение слабой степени тяжести (I-II степени). Была взята кровь из левой кубитальной вены на исследование КАСПА, который у данной больной составлял 1,15 и соответствовал слабой степени повреждения.

Пример 2. Больной М., 48 лет, обратился в поликлинику 20.02.1997 года с жалобами на боли в обеих стопах с их отеком, онемением и нарушением их движения. 19.02.1997 года был на рыбалке и промочил ноги, температура воздуха была -16^oС. Дома отогрел стопы теплой водой и смазал жиром, но отек не снижался, а появились пузыри с серозным содержимым. Объективно: обе стопы и пальцы отечны, слева отек достигает нижней трети голени, пузыри на пальцах с серозным содержимым, движения пальцев стопы ограничены из-за отека, чувствительность снижена. Диагноз: отморожение стоп средней степени тяжести (II степени).

Взята кровь из кубитальной вены на исследование КАСПА. Его показатель был равен 1,35, что соответствовало средней тяжести повреждения.

Пример 3. Больной А., 32 лет, обратился в поликлинику 22.01.1995 года с жалобами на резкие боли в обеих кистях и значительный отек обеих кистей и пальцев, ограничение движения в них, онемение. Отморожение произошло в ночь с 20 на 21 01.1995 года во время работы, когда при температуре воздуха -25^oС в течение 1,5 ч находился без перчаток. Дома обе кисти отогрел в горячей воде, смазал жиром, но позже появились пузыри с геморрагическим содержимым. Объективно: обе кисти и пальцы резко отечны, справа отек достигает локтевого сустава, пузыри на пальцах с геморрагическим содержимым, движения пальцев ограничены из-за отека и их чувствительность снижена. Пульсация лучевых артерий сохранена. Диагноз: отморожение кистей сильной степени (III-IV степени). Взята кровь из кубитальной вены на исследование КАСПА. Данный показатель у больного 0,34 и соответствует сильной степени повреждения, что характерно для резкого доминирования кататоксических программ адаптации с депрессией синтоксических механизмов, и выражается в характерной симптоматике.

Данный способ диагностики степени тяжести криоповреждения является более полным, позволяющим отразить общее функциональное состояние организма, что дает возможность проводить диагностику до гибели тканей и сопровождать диагностику патогенетической терапией.

Изобретение относится к области медицины, в частности к физиологии, патофизиологии, хирургии, и может быть использовано для диагностики степени тяжести криотравмы. Способ обеспечивает более полную диагностику степени тяжести криоповреждения, отражающую общее функциональное состояние организма. В плазме крови больного определяют содержание противосвертывающих факторов, в частности антитромбина III и α₂-макроглобулина, диагностируя степень тяжести криоповреждения, при этом дополнительно определяют содержание антиоксидантных факторов, системы биологически активных аминов и иммунной системы и диагностируют степень тяжести криоповреждения по коэффициенту активности синотоксических программ адаптации (КАСПА), определяемому по следующей зависимости:

где А_ат-III - относительная активность антитромбина III, %; А_аоа - относительная общая антиокислительная активность плазмы, %; С_ах - относительная концентрация ацетилхолина в крови, нмоль/л; C_IgM - относительная концентрация иммуноглобулинов М в крови; C_α2-мг - относительная концентрация α₂-макроглобулина, мкмоль/л; С_мда - относительная концентрация малонового диальдегида, мкмоль/л; С_кх - относительная концентрация катехоламинов, мкг/л; С_IgA - относительная концентрация иммуноглобулинов А, мкмоль/л, по показателям которого определяется степень повреждения. В качестве антиоксидантных факторов взяты показатели общей антиокислительной активности плазмы и малонового диальдегида. В качестве показателей системы биологически активных аминов взяты концентрации ацетилхолина и катехоламинов. В качестве показателей иммунной системы взяты концентрации иммуноглобулина М и иммуноглобулина А. 3 з.п. ф-лы, 1 табл.

1. Способ диагностики степеней тяжести криоповреждения заключающийся в том, что изучают показатели крови, в плазме которой определяют содержание противосвертывающих факторов, в частности, антитромбина III и α₂-макроглобулина, диагностируя степень тяжести криоповреждения, отличающийся тем, что в плазме крови определяют дополнительно содержание антиоксидантных факторов, системы биологически активных аминов и иммунной системы и диагностируют степень тяжести криоповреждения по коэффициенту активности синотоксических программ адаптации (КАСПА), определяемому по следующей зависимости:

где А_ат-III - относительная активность антитромбина III, %;
А_аоа - относительная общая антиокислительная активность плазмы, %;
С_ах - относительная концентрация ацетилхолина в крови нмоль/л;
C_IgM - относительная концентрация иммуноглобулинов М в крови;
C_α2-мг - относительная концентрация α₂-макроглобулина, мкмоль/л;
С_мда - относительная концентрация малонового диальдегида, мкмоль/л;
С_кх - относительная концентрация катехоламинов, мкг/л;
С_IgA - относительная концентрация иммуноглобулинов А, мкмоль/л. 2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что в качестве антиоксидантных факторов взяты показатели общей антиокислительной активности плазмы и малонового диальдегида. 3. Способ по пп. 1 и 2, отличающийся тем, что в качестве показателей системы биологически активных аминов взяты концентрации ацетилхолина и катехоламинов. 4. Способ по пп. 1 - 3, отличающийся тем, что в качестве показателей иммунной системы взяты концентрации иммуноглобулина М и иммуноглобулина А.