СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ НАРУЖНОГО ГЕНИТАЛЬНОГО ЭНДОМЕТРИОЗА Российский патент 2003 года по МПК G01N33/53 

Изобретение относится к медицине, а именно к гинекологии, и может быть использовано для диагностики наружного генитального эндометриоза.

Актуальность изобретения определяется высокой частотой встречаемости наружного эндометриоза, которая по данным разных авторов составляет 12-50% [1, 3, 8]. Диагноз эндометриоза с уверенностью можно поставить лишь на основании результатов инвазивного инструментального исследования (лапароскопии или лапаротомии). В связи с этим разработка адекватных и доступных лабораторных методов диагностики наружного эндометриоза представляет актуальную задачу для практического здравоохранения.

Известен способ диагностики генитального эндометриоза путем исследования функциональной активности базофилов периферической крови больного в присутствии водного экстракта эндометриоидной ткани с концентрацией белка >200 мкг/мл. При показателе >12% диагностируется генитальный эндометриоз [5].

Недостатки способа:
- выделение базофильных лейкоцитов требует забора большого количества крови (18 мл) из-за относительной малочисленности базофилов в периферической крови человека (0,5-1%);
- предлагаемый для использования экстракт эндометриоидной ткани не является стандартизованным препаратом и не включен в "Реестр новых медицинских средств и изделий, разрешенных к применению МЗ РФ";
- способ не предусматривает диагностику различных форм генитального эндометриоза (наружный, внутренний), т.к. данный способ применяется для диагностики всех форм генитального эндометриоза;
- не указывается точность способа.

Наиболее близким по техническому решению к заявляемому способу является способ диагностики наружного генитального эндометриоза путем определения показателя спонтанной НСТ-активности нейтрофилов после их инкубации с α-2 микроглобулином фертильности (ПАМГ-2) и при значениях этого показателя, равного 24% и более, диагностируют наружный генитальный эндометриоз с точностью 84% [6].

Данный способ был выбран нами в качестве ближайшего аналога. Однако он имеет ряд недостатков:
- предлагаемый для использования препарат ПАМГ-2 не имеет широкого производства и не включен в "Реестр новых медицинских средств и изделий, разрешенных к применению МЗ РФ".

- подсчет результатов производится с использованием световой микроскопии, что не позволяет исключить субъективность оценки результатов.

Указанные недостатки предлагается устранить в заявляемом способе.

Заявляемый технический результат достигается тем, что в сыворотке периферической крови женщин определяют концентрацию интерферона-γ (ИФН-γ) и при значениях этого показателя, равных 1000 пкг/мл и менее, диагностируют наружный генитальный эндометриоз с точностью 77%.

Новизна заявляемого способа заключается в том, что впервые предлагается диагностировать наружный генитальный эндометриоз у женщин по определению концентрации ИФН-γ в сыворотке периферической крови.

Раннее определение содержания ИФН-γ в сыворотке периферической крови использовали для диагностики инфекционной аллергии [2], бронхиальной астмы [7] . Кроме того, низкие значения сывороточного ИФН-γ предлагалось использовать для прогнозирования развития инфекционных осложнений у больных с политравмой тяжелой степени [4].

При наружном эндометриозе имеет место изменение реакций клеточной цитотоксичности, что приводит к нарушению специфического иммунного ответа на эндометриальные клетки [9] . По нашему мнению, низкая концентрация ИФН-γ в сыворотке крови женщин с эндометриозом вероятно связана с патогенезом заболевания, т. к. отражает угнетение функциональной активности различных популяций цитотоксических клеток на системном уровне.

Способ осуществляется следующим образом:
1. Производят забор крови из локтевой вены в стерильную пробирку в объеме 1 мл.

2. В сыворотке определяют концентрацию ИФН-γ методом твердофазного иммуноферментного анализа (ИФА) с помощью тест-системы фирмы "CYTIMMUNE", зарегистрированной в Гос. реестре за 98/148, в соответствии с рекомендациями фирмы-разработчика тест-систем. Учет результатов проводят на ридере для ИФА исследований.

Отличительными признаками способа являются:
- установлен новый диагностический параметр содержания ИФН-γ в сыворотке крови, при количественных значениях которого, равных 1000 пкг/мл и менее, диагностируется наружный генитальный эндометриоз с точностью 77%.

Сущность заявляемого способа поясняется следующими примерами.

Пример 1. Больная П. 28 лет. Обратилась по поводу вторичного бесплодия в течение 3 лет. В анамнезе 2 медицинских аборта. Неоднократно проводилась противовоспалительная терапия по поводу обострения хронического 2-стороннего аднексита без эффекта. При влагалищном исследовании: матка нормальных размеров, положения. Придатки без особенностей. Пальпация крестцово-маточных связок болезненна. Обследована по поводу бесплодия: цикл - двухфазный по тестам функциональной диагностики и ЦУГ-эндометрия, по данным гистеросальпингографии - матка не изменена, маточные трубы свободно проходимы. Муж обследован - здоров. Посткоитальная проба - положительная.

Предварительный клинический диагноз: бесплодие II. Наружный эндометриоз.

Произведено определение концентрации ИФН-γ в сыворотке периферической крови по заявляемому способу, которая составила 490 пкг/мл (менее 1000 пкг/мл).

Заключение: по заявляемому способу диагностируется наружный эндометриоз.

На 9 день менструального цикла произведена лапароскопия, в ходе которой обнаружено: матка и маточные трубы не изменены, свободно проходимы при хромогидротубации. На брюшине задних листков широких маточных и крестцово-маточных связок обнаружены множественные поверхностные и глубокие очаги эндометриоза площадью более 3 см². Произведены коагуляция и иссечение очагов эндометриоза монополярным коагулятором. Гистологическое исследование удаленных тканей - эндометриоз брюшины.

Окончательный клинический диагноз: Бесплодие II. Наружный эндометриоз II.

Имеет место совпадение диагнозов.

Пример 2. Пациентка 33 лет поступила на отделение эндохирургии для уточнения причины болевого синдрома. Состоит в браке, гинекологические заболевания отрицает. Предъявляет жалобы на постоянные боли ноющего характера внизу живота в течение 2 лет, диспареунию. При влагалищном исследовании тело матки чуть больше нормальных размеров, подвижная, несколько болезненная при смещении. Область придатков - без особенностей.

Предварительный клинический диагноз: Наружный эндометриоз.

Обследование по заявляемому способу показало, что концентрация ИФН-γ в сыворотке периферической крови составила 1156 пкг/мл (более 1000 пкг/мл).

Заключение: диагноз эндометриоза не подтверждается.

На лапароскопии матка и маточные трубы не изменены, тазовая брюшина без патологических включений. Яичники нормальных размеров. Отмечается варикозное расширение вен малого таза.

Окончательный клинический диагноз: Варикозное расширение вен малого таза. Болевой синдром.

Предварительный клинический диагноз наружного эндометриоза не подтвержден.

Пример 3. Больная Н. 25 лет. Обратилась по поводу вторичного бесплодия. В анамнезе один медицинский аборт без видимых осложнений. Состоит в первом браке, гинекологических заболевания в анамнезе не было, специфических жалоб не предъявляет.

При дооперационном обследовании установлен двухфазный менструальный цикл. По данным гистеросальпингографии полость матки имеет правильную форму, маточные трубы не заполняются контрастом от углов. Посткоитальный тест положительный. При объективном осмотре матка нормальных размеров, положения. Придатки не увеличены, своды свободны, выделения слизистые.

Предварительный клинический диагноз: бесплодие I. Хронический сальпингит, проксимальная окклюзия маточных труб.

Обследование по заявляемому способу показало, что концентрация ИФН-γ в сыворотке периферической крови составила 1000 пкг/мл, что предполагает наличие наружного эндометриоза.

При лапароскопии выявлено, что матка и маточные трубы не изменены, свободно проходимы при хромогидротубации. На брюшине широких маточных связок обнаружены множественные глубокие очаги эндометриоза общей площадью более 3 см². Результат гистологического исследования биоптата брюшины - эндометриоз брюшины, что подтверждает правильность диагноза, установленного по заявленному методу.

Окончательный клинический диагноз: Бесплодие II. Наружный эндометриоз II.

Указанным способом обследовано 57 женщин, данные исследования приведены в таблице. Верификация разработанного способа произведена при помощи лапароскопии (проведение колор-теста, гистологического исследования биоптатов брюшины).

Преимущества заявляемого способа:
1. Малый объем крови, используемый для исследования.

2. Автоматизированное проведение анализа, исключающее субъективность при оценке результатов.

3. Техническая простота способа.

4. Использование промышленно производимых тест-систем.

Итого:
Точность способа - 77%
Чувствительность способа - 77%
Специфичность способа - 78%
Литература
1. Адамян Л.В., Кулаков В.И. Эндометриозы: Руководство для врачей. - М.: Медицина, 1998. - 320 с.

2. Баранова Н.И., Молотилова Б.А., Костина Е.М., Болдина С.Н. Динамика показателей IFNγ у больных с инфекционной аллергией (ИА) в процессе иммунотерапии (ИТ) бактериальными аллергенами. // Медицинская иммунология. - 2001. - Т.3, 2. - С.159.

3. Баскаков В.П. Клиника и лечение эндометриоза. - М. - 1990. - 240 с.

4. Маркелова Е. В., Силич Е.В., Недобыльская Ю.П. Прогностическая значимость уровня ИФНγ в сыворотке крови у больных с политравмой. // Медицинская иммунология. - 2000. - Т.2, 2. - С.176-177.

5. Патент 2004910. Кулаков В.И., Сухих Г.Т., Пшеничникова Т.Я., Волков Н. И. , Ионов И.Д. Российский научно-исследовательский центр перинатологии, акушерства и гинекологии. Способ диагностики генитального эндометриоза. Бюллетень "Изобретения", - 1993. - 45-46. - с.164.

6. Патент 2164687. Посисеева Л.В., Сотникова Н.Ю., Шор А.Л., Анциферова Ю. С. Ивановский научно-исследовательский институт материнства и детства им. В. Н. Городкова. Способ диагностики наружного генитального эндометриоза. Бюллетень "Изобретения. Полезные модели". - 2001. - 9, ч.2. - С.221.

7. Просекова Е.В., Гельцер Б.И., Шестовская Т.Н., Деркач В.В. Выявление интерферонаγ в сыворотке крови детей с бронхиальной астмой (БА). // Медицинская иммунология. - 2001. - Т.3, 2. - С.170.

8. Стрижаков А.Н., Давыдов А.И. Эндометриоз. Клинические и теоретические аспекты. М.: Медицина. - 1996. - 330 с.

9. Oosterlynck D.J., Cornillie F.J., Waer M., Vanderputte M., Koninckx P.R. Women with endometriosis show a defect in natural-killer activity resulting in a decreased cytotoxicity to autologous endometrium. // Fertil. Steril. - 1991. - Vol.56. - P.45-51.

Изобретение относится к медицине, в частности к гинекологии. Способ позволяет исключить субъективность при оценке результатов по диагностике генитального наружного эндометриоза у женщин и прост в исполнении. Проводят у женщин исследование биологического материала, при этом в пробе сыворотки крови периферической венозной крови определяют концентрацию интерферона-γ и при его содержании, равном 1000 пкг/мл и менее, диагностируют наружный эндометриоз. 1 табл.

Способ диагностики генитального наружного эндометриоза у женщин путем исследования биологического материала, отличающийся тем, что в пробе сыворотки крови периферической венозной крови определяют концентрацию интерферона-γ и при его содержании равном 1000 пкг/мл и менее диагностируют наружный эндометриоз.