СРЕДСТВО ДЛЯ ТЕРМИНАЛЬНОЙ АНЕСТЕЗИИ Российский патент 2004 года по МПК A61K31/245 A61K47/48 A61P23/02 

Изобретение относится к медицине и прежде всего к средствам для терминальной анестезии и может использоваться в анестезиологии, офтальмологии, стоматологии, оториноларингологии, хирургии.

Известны лекарственные средства, используемые для терминальной анестезии в числе которых композиция дикаина с адреналином (Галенко-Ярошевский В.П. Сравнительное исследование местноанестезирующей активности рихлокаина и лидокаина при сочетении с некоторыми адреномиметиками. Дис. на соиск. уч. степ. к. м. н. - Ростов-на-Дону, 2000, с.42-58), дикаина гидрохлорид и дикаина гемисукцинат, Косяков И.В., Муртазаева Л.В. "Местноанестезирующие свойства дикаина гемисукцината в эксперименте" В кн.: II Российский национальный конгресс “Человек и лекарство”. Тез. докл. - М., 1995 - с.31).

Наиболее близким к заявке является использование дикаина гидрохлорида.

К его недостаткам относятся недостаточная продолжительность действия, высокая общая токсичность и раздражающее действие.

Техническим результатом данного изобретения является увеличение анестезирующей эффективности, снижение побочных эффектов.

Технический результат достигается тем, что в состав предлагаемого средства для терминальной анестезии входит дикаин гидрохлорид, дикаин гидрохлорид, химически связанный с полимерным носителем глицидилатом.

N-карбоксиметил хитозана, образующийся при соотношении дикаина гидрохлорида и указанного полимерного носителя 1,4:1 соответственно и натрия хлорида при следующем соотношении, мас.%: дикаин гидрохлорид - 20; дикаин гидрохлорид, химически связанный с полимерным носителем глицидилатом N-карбоксиметил хитозана, образующийся при соотношении дикаина гидрохлорида и указанного полимерного носителя 1,4:1 соответственно - 65; натрия хлорид - 15.

Средство получается в четыре этапа.

Этап 1. Деполимеризация хитозана химическим способом.

В процессе деполимеризации ХЗ химическим способом использовались образцы ферментного гидролизата ХЗ с М=390 кДа.

Ферментный гидролиз проводили хитинолитическим комплексом бактерии вида Bacillus sp. 739 известным способом в водном р-ре Хз 0,1 М АсОН и 1% NaN₃ при соотношении фермент - субстрат 0,4, при 55°С в присутствии натрий-ацетатного буфера (рН 5,2) в течение 0,5 ч (Ильина А.В., Варламов В.П., Мелентьев А.И. и др. Деполимеризация хитозана хитинолитическим комплексом бактерии рода Baccillus sp. 739. Прикладная биохимия и микробиология. 2001, т. 37, №2, с.160-163).

2%-ный Водный раствор ХЗ с М=60-70 кДа и степенью дезацетилирования 80%, содержащий 0,01% муравьиной к-ты и 1% перекиси водорода, термостатировали при 70°С в течение 15-20 мин. Образовавшийся раствор вакуумировали при 30-40°С (-0,7 кПа), остаток после вакуумирования растворяли в воде, измеряли приведенную вязкость с использованием капиллярного вискозиметра - η/с 1,5-1,6 дл/г, что соответствует М=15-20 кДа. Полученный ХЗ представляет собой твердый продукт, хорошо растворимый в воде.

Этап 2. N-Карбоксиметилирование хитозана

Хитозан с М=15-20 кДа и степенью дезацетилирования 80% растворили в 50 мл воды и 0,01 муравьиной кислоты при 20°С. Раствор поместили в реактор с обратным холодильником и электромешалкой и ввели 0,47 г натрий хлоруксусной кислоты. Смесь термостатировали при перемешивании и 70°С в течение 3 ч. Реакционную массу вакуумировали при 70°С (-7 кПа). Остаток после вакуумирования - твердый, слегка окрашенный продукт, растворимый в воде и спиртоводной смеси (70%). Натриевая соль N-карбоксиметил-β-1,4-(2-амино-2-дезокси)-D-глюкана (КМХ) плавится с разложением при 150-170°С. Выход 1,3 г (80%).

Этап 3. Глицидиловый эфир N-карбоксиметил хитозана

1 г КМХ растворили в 50 мл воды, раствор поместили в реактор с обратным холодильником и электромешалкой, в раствор вводили 1,1 мл хлорметилоксирана (ЭПХ) с t кип. = 116,1°С, n20d

= 1,438, d2020 = 1,81 в виде раствора в 4 мл этанола; соотношение реагентов КМХ:ЭПХ 1:4. Смесь термостатировали при перемешивании и 50°С в течение 5 ч. Образовавшуюся реакционную массу вакуумировали при 70°С (-7 кПа). Остаток после вакуумирования - слегка окрашенный порошкообразный продукт, растворимый в воде и частично в водно-спиртовых смесях. Полученный глицидиловый эфир КМХ (ГКМХ) выделен с примесью натрия хлорида. В состав смеси входит 82% ГКМХ и 18% хлорида натрия; общий выход 1,36 г.

Этап 4. Химическая иммобилизация β-диметиламиноэтилового эфира N-бутиламинобензойной кислоты гидрохлорида (дикаина) в структуру ГКМХ

1 г ГКМХ растворили в 20 мл воды и поместили в реактор с мешалкой, в раствор ввели 1 г дикаина, растворенного в 4 мл воды, реакционную массу перемешивали при 20°С в течение 1,5 ч. Соотношение реакционно-способных компонентов полимерной матрицы ГКМХ и иммобилизуемого дикаина 1:1,4. Реакционную массу вакуумировали при 70°С (-7 кПа), остаток после вакуумирования - твердый продукт с температурой разложения 130-140°С, растворимый в воде и частично в спиртоводной смеси; растворимость в воде 3-3,5 г в 100 мл; рН растовора 6-6,5; η_отн раствора при концентрации 1 г/дцл - 1,162. В составе полученного продукта содержится 1,09 г (65%) лекарственного полимера, 0,31 г (20%) не связанного с полимером дикаина гидрохлорида, 0,26 г (15%) натрия хлорида.

Количественное определение дикаина гидрохлорида в составе средства для терминальнальной анестезии.

0,4 г Субстанции растворили в 11 мл воды и 10 мл разведенной соляной кислоты, добавили воды до общего объема 80 мл и 1 г бромида калия. При постоянном перемешивании титровали 0,1 М раствором нитрита натрия со скоростью 2 мл/мин (за 0,5 мл до эквивалентного количества), далее со скоростью 0,05 мл/мин при 18°С. Точку эквивалентности определяли с помощью внутреннего индикатора (тропеолин 00): 1 мл 0,1 М раствора нитрата натрия соответствует C₁₅H₂₄N₂O₂·HCl.

На титрование израсходовано 2,62 мл 0,1 М раствора нитрата натрия. Это соответствует содержанию дикаина гидрохлорида в навеске субстанции 0,4 г 0,0788 г - 19,85%.

Исследование инфракрасных спектров дикаина гидрохлорида, химически связанного с глицидилатом N-карбоксиметил хитозана, производилось путем сравнения с составом ИК-спектров глицидилата N-карбоксиметил хитозана и дикаина гидрохлорида. При подготовке к спектральному анализу исследуемое средство для терминальной анестезии было исчерпывающе экстрагировано в отношении дикаина гидрохлорида. В составе ИК-спектров дикаина гидрохлорида, химически связанного с полимером-носителем глицидилатом N-карбоксиметил хитозана, установлено наличие полос поглощения: 850, 730 см^-1 - внеплоскостные деформационные колебания связей С-Н в бензольном кольце; 1600 см^-1 - плоскостные валентные колебания углерод-углеродных связей бензольного кольца; 3030 см^-1 - валентные колебания =С-Н бензольного кольца.

Указанные полосы отсутствуют в составе спектра глицидилата N-карбоксиметил хитозана, но характерны для спектров дикаина гидрохлорида. Это свидетельствует о присоединении к структуре N-карбоксиметил хитозана дикаина гидрохлорида.

Структурная формула дикаина гидрохлорида, химически связанного с полимером носителем глицидилатом N-карбоксиметил хитозана.

Биологическая активность

Все исследования были проведены в соответствии с “Руководством по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ”. - М., 2000, с.176-178.

Исследование глубины терминальной анестезии проводилось по методике Ренье Валетта с одновременным изучением раздражающего действия по методике Сетникера в опытах на кроликах серой масти массой 2,5-3 кг. Каждая концентрация испытывалась на восьми животных. Установлено, что средство вызывает выраженный эффект.

В таблице 1 представлены данные, в единицах Ренье, глубины терминальной анестезии у кроликов при двукратном закапывании в конъюнктивальный мешок по две капли с интервалом в 60 с растворов средства и дикаина гидрохлорида.

Установили, что средство обладает минимальным раздражающим действием. За пять баллов (+++++) принималось слущивание эпителия роговицы на 40%; четыре балла (++++) - 30%; три балла (+++) - 20%; два балла (++) -10%; один балл (+) - 5%; (±) - 5% у части животных в группе реакция отсутствует.

В таблице 3 представлены данные раздражающего действия средства и дикаина гидрохлорида.

Исследование длительности терминальной анестезии в равных концентрациях по субстанции дикаина выявило значительное превосходство средства перед дикаином.

В таблице 4 представленны данные о длительности терминальной анестезии.

Исследование острой токсичности проводили на 72 белых мышах массой 19-21 г при подкожном введении. Установлена половинная летальная доза LD₅₀ средства и дикаина, равняющаяся соответственно (57±3,49) мг/кг и (44±5,69) мг/кг.

Таким образом, заявляемое средство обладает выраженной терминальной анестезией, высокой длительностью действия, минимальным раздражающим действием и более низкой токсичностью, превосходя по этим параметрам прототип.

Использование предлагаемого средства позволяет увеличить длительность манипуляций в связи с увеличением продолжительности терминальной анестезии в полтора - два с половиной раза при той же концентрации субстанции дикаина, уменьшить используемую концентрацию растворов в связи с увеличением глубины терминальной анестезии, увеличить объем используемых растворов в связи со снижением острой токсичности и раздражающего действия.

Изобретение относится к медицине и может использоваться в анестезиологии, офтальмологии, стоматологии, оториноларингологии, хирургии. Средство содержит дикаин гидрохлорид, натрия хлорид и дикаин гидрохлорид, химически связанный с полимерным носителем глицидилатом N-карбоксиметил хитозана в определенных количествах. Соотношение дикаина гидрохлорида и указанного полимерного носителя составляет 1,4:1 соответственно. Новое средство характеризуется повышенной анестезирующей эффективностью, высокой длительностью действия, минимальным раздражающим действием и низкой токсичностью. 4 табл.

Средство для терминальной анестезии, содержащее дикаин гидрохлорид, отличающееся тем, что в его состав дополнительно входит дикаин гидрохлорид химически связанный с полимерным носителем глицидилатом N-карбоксиметил хитозана, образующийся при соотношении дикаина гидрохлорида и указанного полимерного носителя 1,4:1, соответственно, и натрия хлорид, в отношении, мас.%:

Дикаин гидрохлорид 20

Дикаин гидрохлорид, химически связанный с полимерным носителем глицидилатом N-карбоксиметил хитозана, образующийся при соотношении дикаина гидрохлорида к указанному полимерному носителю 1,4:1, соответственно 65

Натрия хлорид 15