СРЕДСТВО, ПОВЫШАЮЩЕЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВУЮ И АНТИМЕТАСТАТИЧЕСКУЮ АКТИВНОСТЬ ЦИКЛОФОСФАНА Российский патент 2004 года по МПК A61K35/78 A61P35/00 A61P35/04 

Изобретение относится к онкологии и может быть использовано при химиотерапии злокачественных опухолей.

Наиболее близким растительным средством, повышающим противоопухолевую активность и снижающим токсичность циклофосфана, является экстракт шлемника байкальского (1).

Принципы современной химиотерапии опухолей предполагают введение максимально переносимых доз цитостатиков с целью наиболее полного повреждения опухолевых клеток. Высокая токсичность противоопухолевых препаратов является серьезным ограничением в достижении максимального терапевтического эффекта. Дисфункция печени в результате проведения современных схем противоопухолевой химиотерапии развивается у значительного количества больных. Таким образом, актуальным является создание средств, позволяющих повысить противоопухолевую эффективность цитостатиков при снижении их доз и уменьшении токсичности (2).

Одним из широко применяемых в настоящее время цитостатических препаратов является алкилирующий агент циклофосфан (ЦФ). Алкилированию подвергаются многие органические соединения, но определяющим является повреждение ДНК. Основными побочными эффектами циклофосфана являются нарушение кроветворения, иммунодепрессия, также отмечено гепатотоксическое действие (3).

Технической задачей предполагаемого изобретения является расширение арсенала средств из растительного сырья, одновременно повышающих противоопухолевую активность химиопрепаратов и снижающих их токсичность, в частности, гепатотоксичность.

Поставленная задача решается путем применения лохеина в качестве препарата, повышающего противоопухолевую активность циклофосфана и одновременно снижающего его общую токсичность и гепатотоксичность.

Новым является то, что в качестве препарата, повышающего противоопухолевую активность циклофосфана и снижающего его токсичность, используют лохеин.

Данные существенные признаки не выявлены из научно-медицинской и патентной литературы. Они явным образом не следуют из уровня техники для специалистов. Данное средство прошло экспериментальное исследование в лаборатории иммунологии НИИ онкологии ТНЦ СО РАМН г.Томска, на кафедрах фармакологии и фармацевтической технологии Сибирского государственного медицинского университета (г.Томск).

Таким образом, данное техническое решение соответствует критериям изобретения "новизна", "изобретательский уровень", "промышленно применимо".

Лохеин представляет собой экстракт солянки холмовой (сухой и жидкий). Гепатопротективный эффект обусловлен комплексом БАВ, важнейшими из которых являются глицинбетаин, флавоноиды, стерингликозиды, соли органических кислот, алкалоиды (4). Препарат разрешен к применению в качестве БАД МЗ РФ (регистр. удост. 000962.Р.643.06.99).

Новые свойства лохеина были обнаружены экспериментальным путем. Противоопухолевое действие было исследовано на мышах линии С 57 В 1/6 массой 20-22 г. В качестве модели экспериментального злокачественного роста используют гематогенно метастазирующую карциному легких Льюис (LLC), перевиваемую внутримышечно по 10⁶ клеток/мышь. Для проведения эксперимента все мыши с перевитой LLC были разделены на 3 группы: " LLC": мыши, получавшие по 0,5 мл воды per os ежедневно в течение 10 дней, "LLC+циклофосфан": мыши, получавшие по 0,5 мл воды per os ежедневно в течение 10 дней и циклофосфан в дозе 60 мг/кг внутрибрюшинно на 3-и и 7-е сутки после перевивки опухоли, "LLC + циклофосфан + лохеин": мыши, получавшие ЦФ по аналогичной схеме и лохеин (сухой) per os в дозе 200 мг/кг в водном растворе в течение 10 суток со 2-го дня после перевивки опухоли. Мышей забивали на 21-е сутки после перевивки LLC. Эффективность воздействия оценивали по торможению роста опухоли, снижению интенсивности метастазирования, торможению роста метастазов.

Результаты исследования совместного применения циклофосфана и лохеина при терапии карциномы легких Льюис показали, что у мышей при комбинированном лечении наблюдалось более выраженное ингибирование роста первичного опухолевого узла (торможение роста опухоли составило 20% по сравнению с 9% в группе, леченой только цитостатиком) (табл.1, "Повышение противоопухолевой и антиметастатической эффективности циклофосфана лохеином"), при этом наблюдается торможение образования метастазов (уменьшение интенсивности метастазирования в 1,8 раза). Также отмечено ингибирование роста уже образовавшихся метастазов.

Таким образом, в результате проведенного исследования доказана способность лохеина повышать противоопухолевую активность циклофосфана.

Способность лохеина снижать общую токсичность циклофосфана и гепатотоксичность была исследована на белых беспородных крысах-самцах массой 200-250 г. Животные в течение 10 дней получали ежедневно внутрибрюшинные инъекции циклофосфана в дозе 20 мг/кг. С первого дня эксперимента крысам вводили лохеин (200 мг/кг) в виде водного раствора. Контрольные животные получали в те же сроки дистиллированную воду. В сыворотке крови животных через сутки после последнего введения препаратов определяли активность аланинаминотрансферазы (АЛТ), аспартатаминотрансферазы (ACT), содержание билирубина, белка, вычисляли соотношение АСТ/АЛТ (коэффициент де Ритиса), коэффицент глюкуронирования билирубина (отношение содержания конъюгированного билирубина к общему количеству пигмента).

Результаты экспериментов, представленные в табл.2 ("Влияние лохеина на биохимические показатели при поражении печени крыс циклофосфаном"), свидетельствуют, что лохеин снижает как общую токсичность циклофосфана (о чем свидетельствует предотвращение гибели животных), так и уменьшает выраженность гепатотоксических расстройств, вызванных цитостатиком: снижает количество билирубина и активность печеночных ферментов в сыворотке. Также лохеин повышает содержание белка в крови.

Таким образом, доказана способность лохеина снижать токсичность циклофосфана, в том числе, гепатотоксичность, и повышать его противоопухолевую активность.

Литература

1. Удинцев С.Н., Разина Т.Г., Кузнецов В.В., Яременко К.В. Использование экстракта шлемника байкальского при химиотерапии опухолей в эксперименте // Бюллетень СО АМН СССР, 1988, №2, с.86-88.

2. Богуш Т.А., Богуш Е.А. Уменьшение токсичности противоопухолевых препаратов - путь к повышению эффективности лечения злокачественных опухолей // Вопросы онкологии, 1995, т.41, №2, с.52 и 53.

3. Экспериментальная оценка противоопухолевых препаратов в СССР и США / Под ред. З.П.Софьиной. - М.: Медицина, 1979, 296 с.

4. Саратиков А.С., Венгеровский А.И., Чучалин B.C. Экстракт солянки холмовой (лохеин) - эффективная защита печени. - Томск: STT, 2000, 114 с.

Предложено средство, повышающее противоопухолевую и антиметастатическую активность циклофосфана. В качестве такового предложен лохеин, известный ранее как средство для снижения гепатотоксичности. Изобретение расширяет арсенал средств указанного назначения, при этом наблюдается как торможение образования новых метастазов, так и подавление роста уже образованных. 2 табл.

Применение лохеина в качестве средства, повышающего противоопухолевую и антиметастатическую активность циклофосфана.