СПОСОБ ОЦЕНКИ КОМПЕНСАТОРНЫХ ВОЗМОЖНОСТЕЙ ОРГАНИЗМА У БОЛЬНЫХ С АСЕПТИЧЕСКИМ НЕКРОЗОМ ГОЛОВКИ БЕДРЕННОЙ КОСТИ И КИСТОВИДНОЙ ПЕРЕСТРОЙКОЙ СУСТАВНЫХ КОНЦОВ II-III СТЕПЕНИ Российский патент 2004 года по МПК G01N33/577 

Изобретение относится к области медицины, а точнее - к способам диагностики компенсаторных возможностей организма пациентов с асептическим некрозом головки бедренной кости и кистовидной перестройкой суставных концов II-III степени.

Известны способы оценки компенсаторных возможностей у больных с дегенеративно-дистрофическими заболеваниями тазобедренных суставов (см., например, Гершкевич В.И. Клинико-функциональные критерии нарушения статико-динамической функции больных коксартрозом в оценке их трудоспособности: Автореф. дис. на соиск. учен. степени канд. мед. наук. - Л., 1989, с. 8-16).

Однако в целом ряде случаев информации, полученной при использовании клинических и инструментальных методов исследования, оказывается недостаточно для оценки компенсаторных возможностей у данной категории пациентов. Наиболее часто подобные затруднения возникают при оценке компенсаторных возможностей у больных с такой тяжелой патологией тазобедренного сустава, как асептический некроз головки бедренной кости, при которой частота расхождения тяжести клинического состояния больных и рентгенологических изменений в суставе достигает 60-70%.

В качестве прототипа нами выбран способ оценки адаптивных реакций и резистентности организма, заключающийся в заборе периферической крови, приготовлении мазка на предметном стекле и определении интегрального показателя - соотношения лимфоцитов и нейтрофилов (Гаркави Л.Х. и соавт. Адаптационные реакции и резистентность организма. - Ростов-на-Дону: изд-во Ростовск. ун-та, 1990, с. 20-25).

Однако известный способ недостаточно точен и зависим от малейшего изменения состояния пациентов (повышение температуры тела, физическая и эмоциональная нагрузка и т.д.).

Задачей настоящего изобретения является повышение специфичности, точности и чувствительности способа.

Поставленная задача решается за счет того, что в способе, включающем забор крови из периферической вены, в сыворотке крови определяют содержание аутоантител к коллагену II типа и при повышении их количества более 0,008 мг/мл делают заключение о высоком уровне компенсаторных возможностей организма.

Способ осуществляют следующим образом. Забирают кровь из периферической вены (5-6 мл) в сухие пробирки. Для образования сгустка образцы крови последовательно выдерживают по 30′ в термостате при температуре +37°С и в холодильнике при температуре +4°С. После этого свернувшуюся кровь центрифугируют при 200 g 15 минут. Сыворотку отбирают в сухие чистые пробирки. В сорбированные коллагеном человека лунки планшета из коммерческого иммунодиагностического набора вносят образцы исследуемых и контрольных сывороток в разведении 1:50. В первый ряд планшета вносят в разведениях положительный контроль из диагностического набора с исходной концентрацией аутоантител к коллагену II типа 0,1 мг/мл. Разведение производят фосфатно-солевым буферным раствором с твином-80, рН 7,4 (ФСБР-Т). Планшет с нанесенными растворами контроля и исследуемых образцов инкубируют при комнатной температуре в течение 1 часа с последующей отмывкой несвязавшихся белков ФСБР-Т. Затем во все лунки планшета вносят раствор очищенных кроличьих моноклональных антител против иммуноглобулина человека, коньюгированных с пероксидазой хрена в рабочем разведении и инкубируют в тех же условиях. После заключительного отмывания несвязавшегося конъюгата реакцию проявляют раствором 0,1%-ного ортофенилендиамина в 0,05 М цитратном буферном растворе рН 5,0, содержащем 0,01% перекиси водорода. Реакцию останавливают 10% раствором серной кислоты. Результаты учитывают путем определения оптической плотности с помощью фотометра при длине волны 492 нм. Количественное определение аутоантител к коллагену производят с помощью калибровочной кривой, выстроенной прибором при введении значений концентраций положительного контроля в различных разведениях. При повышении содержания аутоантител к коллагену II типа более 0,008 мг/мл делают заключение о высоком уровне компенсаторных возможностей у больных с асептическим некрозом головки бедренной кости.

Основанием для установления диагностически значимого уровня аутоантител к коллагену II типа явились результаты обследования 16 больных с асептическим некрозом головки бедренной кости III-IV ст. и 35 пациентов с кистовидной перестройкой суставных концов II-III ст. Все больные находились на консервативном лечении в отделении реабилитации Нижегородского НИИ травматологии и ортопедии. На основе анализа результатов клинико-функциональных исследований все пациенты были разделены на группу с высоким уровнем компенсаторных возможностей организма и группу с низким уровнем компенсаторных возможностей организма. У всех больных с асептическим некрозом головки бедренной кости (АНГБК) группы с высоким уровнем компенсаторных возможностей организма значения аутоантител к коллагену второго типа были выше 0,008 мг/мл (от 0,008 до 0,16 мг/мл) и в среднем соответствовали 0,0364±0,0181 мг/мл. Наиболее высокие значения аутоантител (0,16 мг/мл) были у клинически наиболее скомпенсированного пациента. У пациентов с АНГБК группы с низким уровнем компенсаторных возможностей организма значения аутоантител к коллагену второго типа были ниже 0,008 мг/мл (от 0,003 до 0,008) и в среднем составляли 0,0050±0,00002 мг/мл.

Данные об уровне аутоантител к коллагену II типа можно использовать для оценки компенсаторных возможностей и у больных с кистовидной перестройкой суставных концов (КПСК) тазобедренного сустава. В частности, значения аутоантител выше 0,008 мг/мл наблюдались у 82% пациентов с КПСК с высоким уровнем компенсаторных возможностей организма. Средние значения аутоантител у них составили 0,0305±0,0324 мг/мл. У пациентов с кистовидной перестройкой суставных концов с низким уровнем компенсаторных возможностей организма значения аутоантител ниже 0,008 мг/мл наблюдались в 70% случаев.

Примеры применения

Больной Горелов А.Н., 59 лет (ист. б-ни № 199726), поступил в НИИТО 10.02.02 г. на лечение с диагнозом: асептический некроз головки левой бедренной кости III ст. При проведении иммуноферментного исследования сыворотки крови были выявлено, что количество аутоантител к коллагену второго типа составляет 0,16. Это свидетельствовало об очень высоком уровне компенсаторных возможностей организма, что коррелировало с удовлетворительным клиническим состоянием пациента: боли в тазобедренном суставе беспокоили только после длительной ходьбы, объем движений в суставе был ограничен незначительно. Полученная информация была использована для выбора метода лечения - было решено отсрочить оперативное вмешательство (эндопротезирование сустава) и провести курс консервативного лечения.

Больная Ермохина Л.А., 44 лет (ист. б-ни № 199534), поступила в НИИТО 19.11.01 г. на лечение с диагнозом: двухсторонний диспластический коксартроз III ст. с кистовидной перестройкой суставных концов. При проведении иммуноферментного исследования сыворотки крови были выявлено, что количество аутоантител к коллагену второго типа составляет 0,028. Это свидетельствовало об относительно высоком уровне компенсаторных возможностей организма, что коррелировало с клиникой: несмотря на выраженность рентгенологических изменений в тазобедренных суставах, у больной имелись легкие статодинамические нарушения. Больной был проведен курс консервативного лечения, направленный на улучшение трофических процессов и поддержание компенсаторных возможностей организма.

Способ оценки компенсаторных возможностей у больных с асептическим некрозом головки бедренной кости и кистовидной перестройкой суставных концов II-III степени позволяет с достаточной достоверностью объективно оценить течение дегенеративно-дистрофического процесса при низких затратах и небольшом времени исследования. Способ информативен, выполним в условиях специализированного стационара и может быть использован в клинической практике.

Изобретение относится к области медицины, а именно к способу оценки компенсаторных возможностей организма у больных с асептическим некрозом головки бедренной кости и кистовидной перестройкой суставных концов II-III степени. Сущность способа состоит в том, что в сыворотке крови, взятой из периферической вены, определяют содержание аутоантител к коллагену II типа и при их значении более 0,008 мг/мл компенсаторные возможности организма оценивают как высокие. Техническим результатом является повышение специфичности, точности и чувствительности способа.

Способ оценки компенсаторных возможностей организма у больных с асептическим некрозом головки бедренной кости и кистовидной перестройкой суставных концов II-III степени, отличающийся тем, что в сыворотке крови, взятой из периферической вены, определяют содержание аутоантител к коллагену II типа, и повышение их количества более 0,008 мг/мл свидетельствует о высоких компенсаторных возможностях организма.