СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ДЕСТРУКЦИИ КОСТНО-ХРЯЩЕВОЙ ТКАНИ У БОЛЬНЫХ С ДЕГЕНЕРАТИВНО-ДИСТРОФИЧЕСКИМИ ЗАБОЛЕВАНИЯМИ ТАЗОБЕДРЕННЫХ СУСТАВОВ Российский патент 2003 года по МПК G01N33/53 

Предлагаемое изобретение относится к области медицины, а точнее к способам диагностики деструкции костно-хрящевой ткани у пациентов с дегенеративно-дистрофическими заболеваниями тазобедренных суставов (ДДЗТС).

Органический матрикс костной и хрящевой тканей на 90-95% состоит из коллагеновых волокон (Уайт А. с соавт., 1981 "Основы биохимии", Т. 3., С. 1467-1512), деструкция которых (в той или иной степени) всегда наблюдается при дегенеративно-дистрофических заболеваниях тазобедренного сустава. Грубые разрушения костно-хрящевой ткани у пациентов с ДДЗТС видны на рентгенограммах тазобедренных суставов в виде асептического некроза головки бедренной кости или кистовидной перестройки суставных концов, в то время как незначительные нарушения костной структуры рентгенологически не заметны. На практике для врача травматолога-ортопеда важно не только установить наличие деструкции костно-хрящевой ткани, но и определить насколько активно идет процесс ее разрушения на данный конкретный момент.

В качестве прототипа выбран способ диагностики деструкции костно-хрящевой ткани, заключающийся в определении содержания оксипролина в моче пациентов (см.: Большаков С.Б., Дроздова Л.Н., Лада Е.В. Определение содержания оксипролина в моче больных системным остеохондрозом. //Лабораторное дело, 1983, N9, С.27-29).

Однако известный способ является достаточно трудоемким и требует специальной подготовки больного. Несоблюдение соответствующей диеты и наличие сопутствующей соматической патологии значительно снижают точность метода.

Задачей предлагаемого изобретения является повышение специфичности, точности и чувствительности способа.

Поставленная задача решается за счет того, что в способе, включающем исследование субстрата, в сыворотке крови выявляют наличие аутоантител к коллагену и при значении титра антител 1:160 и менее делают заключение о разрушении коллагеновых волокон.

Способ осуществляют следующим образом. Взрослых и детей-подростков с дегенеративно-дистрофическими заболеваниями тазобедренных суставов (асептическим некрозом головки бедренной кости, кистевидной перестройкой суставных концов, деформирующим коксартрозом, болезнью Легг-Кальве-Пертеса) обследуют с применением традиционных методов: анализируют клинические проявления заболевания, проводят рентгенологическое исследование. Затем у пациентов забирают из вены кровь, отделяют сыворотку и в последней определяют наличие аутоантител к коллагену. В основе метода лежит реакция пассивной гемагглютинации (РПГА) эритроцитов, сенсибилизированных высокоочищенным коллагеном. Содержимое флакона с сухим забуференным физиологическим раствором (ЗФР) разводят в 100 мл дистиллированной воды. Разведенный ЗФР хранят в холодильнике. Во флакон с жидким эритроцитарным реагентом перед применением добавляют 4,5 мл забуференного физиологического раствора (ЗФР). Флакон с реагентом тщательно встряхивают до получения гомогенной взвеси. По ходу работы встряхивание следует повторять. При необходимости использования малых количеств эритроцитарного реагента тщательно ресуспензируют концентрированный реагент, затем чистой пипеткой отбирают необходимый объем и переносят в чистый флакон, затем добавляют 9 объемов ЗФР. Растворенный реагент хранят в холодильнике не более 3 дней. Для постановки РПГА используют микропланшеты (желательно с V-образным дном). Непосредственно перед работой исследуемую сыворотку разводят в 5 раз ЗФР. Для определения гемагглютинационного титра в ряд лунок вносят по 0,025 мл ЗФР. В первую лунку вносят 0,025 мл, из второй в третью и т.д., при этом из последней лунки 0,025 мл отбрасывается. К полученному ряду двукратных разведений добавляют по 0,025 мл реагента. Планшеты осторожно встряхивают и оставляют при комнатной температуре на 30-60 минут, после чего проводят учет реакции. Положительной считается реакция при полной агглютинации эритроцитов - дно лунки покрыто равномерным слоем, отрицательной - эритроциты осели на дно лунки в виде "пуговки " или маленького колечка с ровным краем. Титром антител испытуемой сыворотки считается последнее разведение сыворотки, которое дает ярко выраженную агглютинацию эритроцитов. При оценке реакции следует учесть исходное разведение сыворотки 1/5. У здоровых людей титр аутоантител к коллагену равен 1:10-1:40. При титре антител 1:160 и менее делают вывод о наличии деструкции костно-хрящевой ткани. Основанием для установления границы титра аутоантител для диагностики деструктивных процессов в тканях тазобедренных суставов явились результаты анализа этого показателя у 196 взрослых и детей, страдающих различными заболеваниями (асептическим некрозом головки бедренной кости II-IV ст., кистовидной перестройкой суставных концов II-III ст., коксартрозом I-III ст., болезнью Легг-Кальве-Пертеса II-V ст. ), длительное время находящихся под наблюдением врачей-ортопедов отделения реабилитации Нижегородского НИИ травматологии и ортопедии. На основании анализа результатов клинических и рентгенологических исследований все больные были условно разделены на две группы: первая группа (121 больной) - с деструктивными формами поражения тазобедренного сустава (асептическим некрозом головки бедренной кости, кистевидной перестройкой суставных концов, болезнью Пертеса в стадии фрагментации) и вторая группа (75 пациентов) - без видимых деструктивных изменений костно-хрящевой ткани тазобедренного сустава (деформирующим коксартрозом I-III ст.). Как показали исследования, достоверность суждения о наличии деструкции достигает 95%. Следует отметить, что для взрослых больных с патологией тазобедренных суставов правильность суждения о наличии деструкции костно-хрящевой ткани при титре антител 1:160 достигает 100%, а для детей - соответствует 92%. Для взрослых пациентов достаточно высокой информативностью (76%) обладает и титр аутоантител 1:80 (в сравнении с детьми - 67%).

Вышеизложенное иллюстрируется примерами.

Пример 1
Больная Сив-на И. Н. , 26 лет (ист. б-ни N 197263), поступила в ННИИТО 1.02.01 г. на лечение с диагнозом: правосторонний диспластический деформирующий коксартроз III ст. При проведении иммуноферментного исследования сыворотки крови был выявлен высокий титр аутоантител к коллагену (1:160). Это свидетельствовало о наличии деструкции костно-хрящевой ткани, что подтвердилось при последующем прицельном рентгенологическом исследовании тазобедренного сустава (были выявлены мелкие кисты в головке бедренной кости). Полученные данные использованы для назначения адекватной терапии.

Пример 2
Больная Лап-на Е. В., 21 года (ист. б-ни N 182284), поступила в ННИИТО 16.08.00 г. на лечение с диагнозом: двухсторонний асептический некроз головок обеих бедренных костей III-IV ст. При проведении иммуноферментного исследования сыворотки крови был выявлен низкий титр аутоантител к коллагену (1: 20). Это свидетельствовало об отсутствии на данный момент активной деструкции костно-хрящевой ткани. Полученные данные использованы для назначения соответствующей терапии.

Способ диагностики деструкции костно-хрящевой ткани может быть использован врачами хирургами-ортопедами и реабилитологами при составлении правильной программы консервативного лечения больных с дегенеративно-дистрофическими заболеваниями тазобедренных суставов: выбора тех или иных медикаментозных средств и методов физиолечения.

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для диагностики деструкции костно-хрящевой ткани у больных с дегенеративно-дистрофическими заболеваниями тазобедренных суставов. В сыворотке крови выявляют наличие аутоантител к коллагену. При значении титра аутоантител 1:160 и более делают заключение о разрушении костно-хрящевой ткани. Способ позволяет повысить эффективность диагностики деструкции костно-хрящевой ткани у больных с дегенеративно-дистрофическими заболеваниями тазобедренных суставов.

Способ диагностики деструкции костно-хрящевой ткани у больных с дегенеративно-дистрофическими заболеваниями тазобедренных суставов, заключающийся в исследовании сыворотки крови, отличающийся тем, что выявляют наличие аутоантител к коллагену и при значении титра аутоантител 1:160 и более делают заключение о разрушении костно-хрящевой ткани.